NPM1 MutaQuantTM Kit e Standard
PROFILING LEUKEMIA
Rilevazione quantitativa, sensibile, accurata e altamente riproducibile delle
mutazioni NPM1 in DNA genomico e RNA isolato da sangue periferico.
NPM1 e Leucemia Mieloide Acuta
La Leucemia Mieloide Acuta (AML) è una malattia
clinicamente eterogenea da un punto di vista
citogenetico e molecolare. Differenti anormalità
cariotipiche definiscono diversi sottogruppi
prognostici. Quasi la metà dei casi AML presentano
un cariotipo normale (AML-NK) costituendo così il più
grande raggruppamento citogenetico di AML.
Il gene per la nucleofosmina (NPM1) codifica per una
proteina nucleocitoplasmatica multifunzionale (NPM),
che migra tra nucleo e citoplasma con prevalente
localizzazione nucleolare1. Il gene NPM1 è traslocato
o mutato in vari linfomi e leucemie. Studi recenti 2,3
hanno dimostrato che circa il 60% dei pazienti AML
con cariotipo normale hanno una mutazione
all’interno dell’esone 12 del gene NPM1, questo dato
rende la mutazione NPM1 la più specifica e frequente
lesione genetica descritta nelle AML adulte de novo
(circa un terzo). Circa 40 varianti molecolari delle
mutazioni NPM1 sono state identificate ad oggi.
Indipendentemente dal loro tipo, esse generano
comuni alterazioni nella porzione C-terminale della
proteina NPM. Le mutazioni creano un nuovo motivo
(NES) di esporto nucleare e distruggono residui critici
di triptofano a livello del dominio di legame
nucleolare, il risultato è l’accumulo della proteina
NPM nel citoplasma (NPMc+). La maggior parte delle
mutazioni NPM1 sono caratterizzate dall’inserzione di
quattro paia di basi. La mutazione più comune
(mutazione A), una duplicazione del tetranucleotide
TCTG, è presente nel 70-80% dei casi di AML
NPMc+ adulta. Le mutazioni B e D sono state
osservate circa nel 10% e nel 5% dei casi
rispettivamente. Inoltre numerosi studi hanno
dimostrato che i pazienti AML-NK con mutazioni
NPM1, ma senza mutazioni concomitanti FLT3-ITD,
rappresentano un sottogruppo indipendente con
prognosi favorevole. Studi retrospettivi hanno
dimostrato che le mutazioni NPM1 potrebbero essere
considerate marcatori molecolari prognostici per il
monitoraggio della malattia minima residua in AMLNK e che la quantificazione delle copie mutate di
NPM1 potrebbe costituire un fattore predittivo di una
eventuale ricaduta precoce 6,7. I risultati preliminari di
trial clinici ad ampia indagine concordano con queste
indicazioni 8.
Tecnologia Calibrata e Normalizzata
La tecnologia MutaQuant utilizza l’amplificazione
in PCR da DNA genomico (gDNA) e da cDNA con
analisi quantitativa delle mutazioni NPM1 A, B, D
e del gene di controllo ABL.
Un piccolo frammento che identifica il sito di
mutazione viene amplificato con uno strumento di
real-time PCR, mediante primer e probe ottimizzati.
Il saggio NPM1 MutaQuant utilizza una tecnologia
validata basata su plasmidi calibratori come curve
standard, questa tecnologia permette la
quantificazione precisa e riproducibile della
mutazione.
Questo saggio risulta significativamente migliore
rispetto agli altri metodi per sensibilità, facilità d’uso
e risparmio di tempo.
Prodotti Associati
MutaQuantTM standard sono disponibili per la
rilevazione specifica di polimorfismi da campioni
sia di RNA (cDNA) sia di DNA genomico. Al fine di
offrire una soluzione che copre le mutazioni più
frequenti di NPM1, Ipsogen ha sviluppato
MutaQuant Gene Standards comprensivi di cinque
provette per la mutazione A, per la mutazione B e D
di NPM1; tali provette contengono diluizioni del
gene mutato da utilizzare come calibratori della
RQ-PCR.
RUO
Questi prodotti sono solamente
per ricerca, non per uso diagnostico.
Primer e probe per l’amplificazione
del trascritto NPM1 mutazione A
Primer e probe per l’amplificazione
del trascritto NPM1 mutazione B
Primer e probe per l’amplificazione
del trascritto NPM1 mutazione D
Primer e probe per
l’amplificazione del
trascritto ABL
Perché scegliere NPM1 MutaQuant Kit?
• Rilevazione sensibile e altamente specifica della
mutazione A del gene NPM1
• Risultati espressi come Normalized Copy
Number (NCN) NCNNPM1-A= CNNPM1-A / CNABL X100
• Protocollo standardizzato
• Compatibilità su multi-piattaforma
• Soluzioni pre-diluite pronte all’uso
• Tempo di lavoro ottimizzato per il massimo delle
prestazioni del laboratorio
• Ridotti rischi di contaminazione
• Attrezzature & QMS conformi a ISO 13485:2003
Ciascun MutaQuant Kit contiene:
• 1 provetta con la miscela di primer e probe
specifici per l’allele mutato NPM1
• 1 provetta con la miscela di primer e probe specifici
per la rilevazione del gene di controllo ABL
• 1 set di standard per l’allele mutato NPM1
(5 diluizioni da 101 a 106 copie/5 µl)
• 1 set di standard per il gene di controllo ABL
(3 diluizioni da 103 a 105 copie/5 µl)
Informazioni per gli ordini:
Descrizione
Numero di campioni
in duplicato
Numero d’ordine
24 - 30*
504MQPP04
24 - 30*
504MQPP05
NPM1 mut A
MutaQuant™ Kit
NPM1 mut B&D
MutaQuant™ Kit
Bibliografia
for each mutation B or D
* Il numero di campioni varia in funzione dello strumento utilizzato
** Sistema di estrazione, retrotrascrizione e Taq polimerasi non sono inclusi nel kit
1. Falini B et al. N Engl J Med. (2005) 352(3): 254-266.
2. Falini B et al. Review - Blood (2007) 109(3): 874-885.
3. Falini B et al. Review - Haematologica (2007) 92(04): 519-532.
4. Mrozek et al. Blood (2007) 109(2): 431-448.
5. Hollink IH et al. Leukemia (2009) 23(2): 262-270
6. Chou WC et al. Leukemia (2007) 21(5): 998-1004.
7. Gorello P et al. Leukemia (2006) 20(6): 1103-1108.
8. Schnittger S et al.Haematologica (2007) 12th Congress of the European
Hematology Association, Vienna, June 7-10, 2007. Abstract Book.
Prodotti associati:
Numero d’ordine
NPM1 mut A cDNA MutaQuant
Standard*
Numero di provette
Numero di reazioni
504MQRS01
5
8
NPM1 mut B e D cDNA MutaQuantTM Standards*
504MQRS02
5+5
8+8
NPM1 mut A gDNA MutaQuantTM Standard*
504MQRS01G
5
8
504MQRS02G
5+5
8+8
TM
NPM1 mut B e D gDNA MutaQuant
TM
Standards*
* Ciascun set di MutaQuantTM Standard è composto da 5 diluizioni plasmidiche da 101 a 106 copie/5μl
Ipsogen MutaQuant è un marchio registrato Ipsogen.
I nostri prodotti e le nostre tecnologie sono coperti da brevetti.
Per maggiori informazioni visitare la pagina web:
www.ipsogen.com/leukemia-products/healthcare-professionales/product-portfolio/
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