ALK /NPM1
Sonde per Citogenetica Molecolare (FISH)
Descrizione della sonda
La sonda FISH ALK/NPM1 è progettata per rilevare la traslocazione tra il gene ALK situato in 2p23 e il gene NPM1 in
5q35 mediante la tecnica FISH. La traslocazione tra il gene ALK e il gene NPM1 è indicata come t(2;5)(p23;q35). Per
la citogenetica convenzionale, la traslocazione si verifica nel 50% dei casi dei linfomi anaplastici a grandi cellule
(ALCL). Come valutato mediante immunoistochimica, l'espressione della proteina di fusione ALK/NPM1, che è
generata dalla t(2;5), si verifica più frequentemente nelle forme di ALCL infantile con un tasso di ricorrenza dell’ 83%,
rispetto all’ALCL negli adulti che ha un tasso di ricorrenza del 31%. La presenza della t(2; 5)(p23; q35) comporta una
migliore prognosi globale per i pazienti con ALCL.
.
ALK
Rappresentazione schematica della sonda ALK/NPM1
ALK
2p23
telomere
5’
~541kb
3’
centromere
Le barre orizzontali e verticali indicano le regioni coperte dalle sonde
(approssimate alla scala GRCh37/Hg19/2009). La marcatura diretta
ALK (rosso) e NPM1 (verde) affiancano i rispettivi geni.
~556kb
NPM1
5q35
centromere
NPM1
2
5
5’ 3’
~552kb
telomere
~502kb
Interpretazione del segnale
Nei nuclei diploidi normali in metafase e interfase, possono essere osservati due segnali rossi e due segnali verdi,
corrispondenti rispettivamente ai due cromosomi omologhi normali 2 e 5.
Per quanto riguarda la traslocazione, il modello più comunemente osservato è composto da un singolo segnale rosso
e verde, che rappresenta i cromosomi 2 e 5 normali e due segnali di fusione (rosso/verde o giallo), che rappresentano
i cromosomi traslocati.
Figura 1: Metafase diploide
normale e nucleo in interfase (da
sangue periferico normale) con 2
segnali rossi (ALK) e 2 verdi
(NPM1).
Figura 2: Nucleo diploide
normale in interfase (da midollo
osseo) con 2 segnali rossi (ALK)
e 2 verdi (NPM1).
Referenze
1. Drexler, H.G., et al. Leukemia, 2000. 14(9):p.1533-59.
2. Weitzman, S., et al. Curr Oncol Rep, 2002. 4(2):p.107-13.
www.technogenetics.it
Figura 3: Nucleo in interfase con
1 segnale rosso (ALK), 1 verde
(NPM1) e 2 segnali di fusione
(rosso/verde o giallo).
Filtri Microscopio a Fluorescenza
Fluoroforo
Eccitazione max
Emissione max
Verde
496 nm
520 nm
Rosso
580 nm
603 nm
DAPI
360 nm
460 nm
27
