Costanti di ionizzazione MODALITA’ DI PREPARAZIONE DI SOLUZIONI TAMPONE M = n moli/L soluzione g PM x L soluzione M= g= d x ml PM x L soluzione ml = g = M x PM x L soluzione g x PM x L soluzione PM x L soluzione d (densità) = g /ml M= n moli = g / PM g =d x ml ml = M x PM x L soluzione d g x PM x L soluzione x ml PM x L soluzione g Esempio: Calcolare il pH di una soluzione tampone che contiene CH3COOH 0,10M e CH3COONa 0,20M. Il Ka dell’acido acetico è 1.7x10-5 In soluzione acquosa il sale acetato di sodio dissocia CH3COONa(s) CH3COO-(aq) + Na+(aq) per cui la soluzione è 0.20M in CH3COO- (la base) Il pKa dell’acido acetico è: pK a log1,7 10-5 4,77 Applicando l’equazione di Henderson-Hasselbach si ha: [CH 3COO ] pH pK a + log [CH3 COOH] 4.77 + log pH= 4.77 + log 2 4.77 + 0.30 5.07 0.20 0.10 Esempio: Calcolare il rapporto fra la concentrazione di acido acetico e di ione acetato necessari per preparare una soluzione tampone con pH 4,9. Il pKa dell’acido acetico è 4,77 Applicando l’equazione di Henderson-Hasselbach si ha: [base] pH pK a + log [acido] [CH 3COO ] 4,9 4,77 + log [CH 3COOH] [CH 3COO ] log 4,9 4,77 0,13 [CH 3COOH] [CH 3COO ] 100,13 1,35 [CH 3COOH] [CH 3COO ] 1,35 [CH 3COOH] Ad esempio se in un litro di soluzione mettiamo 1,0 moli di acido acetico, dobbiamo aggiungere 1,35 moli di acetato di sodio [CH 3COO ] 1,35 [CH 3COOH] Ad esempio se in un litro di soluzione mettiamo 1,0 moli di acido acetico, dobbiamo aggiungere 1,35 moli di acetato di sodio Per preparare 100ml di soluzione: Per ogni ml di acido acetico si devono usare 1,35 ml di acetato di sodio per un totale di 2,35 ml Volendo preparare una soluzione di 100ml: 1ml di CH3COOH : 2,35 ml tot =x ml di CH3COOH :100 100 x 1/ 2,35 = 42,6 ml di CH3COOH e 57,4 ml di CH3COO- (che è il complemento a 100) METODI IMMUNOCHIMICI L’utilizzo di anticorpi, prodotti contro un particolare enzima, può fornire la base per un dosaggio enzimatico, basato sul metodo ELISA, in grado di distinguere isoenzimi o enzimi diversi che catalizzano reazioni identiche Dosaggio immunometrico mediante anticorpi marcati con enzimi Enzyme-Linked Immunosorbant Assay (ELISA) SAGGIO ELISA PER LA DETERMINAZIONE DEI LIVELLI DI DHT pg DHT standard sieri Δ/coeff ang/µl