Polyclonal Rabbit
Anti-Herpes Simplex Virus Type 2
Codice n. B 0116
Edizione 02.05.03
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
L'anticorpo è idoneo all'impiego nell'identificazione dell'HSV in materiale cellulare umano ottenuto da lesioni
superficiali o biopsie e all'identificazione dell'HSV da colture di tessuti infetti.
L'interpretazione dei risultati deve tenere conto dell'anamnesi del paziente e deve basarsi su ulteriori test
diagnostici eseguiti da un professionista qualificato.
Reagente fornito
Frazione immunoglobulinica purificata di antisiero di coniglio fornita in forma liquida. In NaCl 0,1 mol/L, NaN3
15 mmol/L.
Concentrazione della proteina: fare riferimento all'etichetta sulla fiala.
Immunogeno
Cellule della cornea di coniglio (linea cellulare continua) infettate da HSV tipo 2 (ceppo MS) solubilizzato in
detergente.
Specificità
L'anticorpo reagisce con gli antigeni specifici dell'HSV tipo 2 e con gli antigeni comuni dell'HSV tipo 1 e 2.
L'anticorpo interagisce con tutte le principali glicoproteine presenti nell'envelope virale e con almeno una
proteina core, come determinato mediante immunoelettroforesi crociata.
Le tracce di anticorpi contaminanti contro il siero umano e bovino sono state rimosse mediante assorbimento in
fase solida.
L'anticorpo non ha reagito con il plasma umano e bovino nei saggi ELISA e non ha evidenziato nessuna reattività
crociata con il citomegalovirus e il virus di Epstein-Barr. Se l'anticorpo è utilizzato ad una concentrazione
relativamente elevata, è possibile osservare una debole reattività crociata con il virus varicella-zoster, mentre non è
stata rilevata nessuna reattività crociata nei test di immunofluorescenza indiretta alla diluizione 1:50.
Precauzioni
1. Il prodotto può essere utilizzato con diverse tecniche e su diversi tipi di campioni e materiali, perciò spetta ai
singoli laboratori verificare la validità del sistema di analisi applicato..
2. Per uso professionale.
3. Questo prodotto contiene sodio azide (NaN3), una sostanza chimica fortemente tossica in forma pura.
Sebbene non sia classificato come prodotto a rischio, il contenuto di NaN 3 alle concentrazioni indicate può
reagire con il rame e il piombo delle tubature formando azidi metalliche fortemente esplosive. Durante lo
smaltimento, sciacquare le tubature con abbondante acqua per prevenire l'eventuale accumulo di azide
metallica.
4. Adottare le normali procedure previste per il trattamento dei prodotti di origine biologica.
Conservazione
Conservare a 2–8 ºC.
Non utilizzare dopo la data di scadenza stampata sulla fiala. Se i reagenti sono conservati in condizioni difformi
da quelle specificate, tali condizioni dovranno essere verificate dall'utente. Non sono stati osservati segni
evidenti che indichino l'instabilità del prodotto, pertanto è opportuno analizzare un controllo positivo e un
controllo negativo contemporaneamente ai campioni dei pazienti. Qualora si ottengano risultati imprevisti, che
non siano cioè giustificati da un cambiamento delle procedure di laboratorio ma siano dovuti ad un probabile
difetto dell'anticorpo, contattare l'Assistenza Tecnica.
Applicazione
A meno che non sia stata accertata la stabilità del sistema di analisi, si consiglia di diluire il prodotto
immediatamente prima dell'uso.
Immunofluorescenza indiretta:
1.
Collocare il materiale da analizzare su un vetrino per microscopio. Lasciarlo asciugare all'aria e fissarlo in
acetone per 10 minuti a temperatura ambiente.
2.
Sciacquare in acqua distillata per 2–3 minuti. Lasciare asciugare all'aria.
3.
Incubare per 1 ora a 37 ºC con Polyclonal Rabbit Anti-HSV Type 2 (MS), diluito con rapporto 1:100 in
tampone fosfato salino a pH 7,2, contenente 0,05% Tween 20 (PBST).
4.
Sciacquare 3 volte per 3 minuti in PBST e per 1 minuto in acqua distillata. Lasciare asciugare all'aria.
5.
Incubare per 30 minuti a 37 ºC con Dako Swine Anti-Rabbit Immunoglobulins/FITC, codice n.
F 0205, diluito con rapporto 1:50 in PBST.
6.
Sciacquare 3 volte per 3 minuti in PBST e per 1 minuto in acqua distillata. Lasciare asciugare all'aria.
7.
Aggiungere il liquido di montaggio (ad esempio parti uguali di glicerolo e tampone fosfato salino a pH 8).
Tecnica di immunoperossidasi indiretta:
Si consiglia la diluizione 1:100 dell'anticorpo Polyclonal Rabbit Anti-HSV Type 2 (MS) per l'immunoperossidasi
indiretta (1).
(111936-002)
B 0116/IT/OS/02.05.03 p. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
ELISA:
Il prodotto è idoneo all'uso come anticorpo di cattura per la determinazione dell'HSV nei campioni clinici analizzati
con il saggio ELISA sandwich con doppio anticorpo, in combinazione con il prodotto Dako Peroxidase-Conjugated
Anti-HSV Type 2 (MS), codice n. P 0176. La diluizione consigliata per il rivestimento di una piastra microtitolo
(Nunc MaxiSorp) è di 1:1000 (2).
Sierologia:
L'anticorpo può essere anche impiegato come anticorpo bloccante nei test sierologici ELISA specifici per tipi di
HSV (3).
Bibliografia
1. Adams RL, Springall DR, Levene MM, Bushell TE. The immunohistochemical detection of herpes simplex
virus in cervical smears. - A valuable technique for routine use. J Pathol 1984;143:241-7.
2. Vestergaard BF. Antigens and antibodies in viral disease. In:Bergmeyer HUB, ed. Methods of enzymatic
analysis. Vol X. Weinheim: VCH, 1986:226-42.
3. Vestergaard BF, Grauballe PC. ELISA for herpes simplex virus (HSV) type-specific antibodies in human sera
using HSV type 1 and type 2 polyspecific antigens blocked with type-heterologous rabbit antibodies. Acta Path
Microbiol Scand 1979;sect B 87:261-3.
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in vitro
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