I BATTERI PAS : Classe di insegnamento A60 Biologia e scienze A.A . 2013/2014 04/06/2014 Tipologie di batteri Crescita di batteri della cavità orale Staphylococcus Piastra di Agar-sangue (colonie batteriche) Microscopio (cellule batteriche) Batteri della cavità orale Batteri totali saliva: 102 – 104 c.f.u/ml Colony-forming unit (CFU): stima grezza del numero di batteri (o lieviti) vivi presenti in un campione Staphylococcus aureus (46.4 %) Staphylococcus epidermidis (41.1 %) and others (Staphylococcus hominis, Staphylococcus warneri, Staphylococcus intermedius, Staphylococcus capitis, Staphylococcus haemolyticus, Staphylococcus lugdunensis and Staphylococcus gallinarum)…. Emolisi degli eritrociti Beta-emolitici (Stafilococchi) Alpha-emolitici (Bacilli) Gamma-emolitici Colorazione Gram Colorazione Gram Composizione parete batterica Crystal violet Water-insoluble complex Soluzione di Lugol (10% KI) Alcohol Escherichia coli Escherichia coli (gram -) Curva di crescita batterica 8h 0h 12-16h (O.N) Diluizione 1:10 , 1:1000 Preparazione batterica in LB (Lysogenic Broth, Bertani 1952) Luminescenza batterica Reazione di bioluminescenza Luciferasi batterica from riboflavin (vitamin B2) E.coLight Operone Lux Trascrizione C D A Reduttasi Transferasi B Luciferasi E DNA batterico Sintetasi Complesso enzimatico di ossido-riduzione Operone Lux modificato in E. coli Eco-light Trascrizione pBAD Operone Lux E.coLight bioluminescenza Curva di crescita batterica E.coLight Produzione luminosa E.coLight Picco a 6h 12-16h (O.N) Tesi di Daniele Rossetto, 2012 Progetto microbioma • Cellule totali corpo umano: > 30 X 1012 • Cellule totali betteriche nel corpo umano: 300 X 1012 500 – 1000 specie batteriche 200 laboratori 80 istituzioni LIEVITI Lieviti: funghi unicellulari appartenenti alla divisione degli Ascomiceti Condizioni aerobie e anaeorobie Genere Saccharomyces: funghi di forma ovaleellittico. Le dimensioni sono di 5 – 10 micrometri Utilizzati per i processi di fermentazione S. cerevisiae - http://www.lifesciencesfoundation.org/eventsThe_Saccharomyces_cerevisiae_genome.html La fermentazione è una via metabolica alternativa Quando la cellula è in carenza di ossigeno, può ricorrere alla fermentazione. Nelle cellule animali, il piruvato in arrivo dalla glicolisi accetta due atomi di idrogeno, riducendosi a lattato, perciò si parla di fermentazione lattica. Altri organismi producono invece alcol etilico e liberano CO2 attraverso la fermentazione alcolica. Sylvia S. Mader Immagini e concetti della biologia © Zanichelli editore, 2012 15 La fermentazione La fermentazione produce solo 2 ATP attraverso la sintesi a livello del substrato, ma fornisce energia in modo rapidissimo per attività di breve durata. La fermentazione alcolica sfrutta i lieviti che fermentano e viene impiegata per la panificazione e la produzione di vino e birra. Alcuni batteri svolgono la fermentazione acetica, che produce l’aceto di vino. Lo yogurt, la panna acida e i formaggi sono invece prodotti sfruttando i batteri della fermentazione lattica. Sylvia S. Mader Immagini e concetti della biologia © Zanichelli editore, 2012 16 Fermentazione lattica: •Microorganismi anaerobi (yogurt) •Cellule muscolari sottoposte a uno sforzo intenso in condizoni anaerobie Fermentazione alcolica: realizzata dai lieviti, funghi unicellulari, appartenenti al genere Saccharomyces. Panificazione e vinificazione.