sintesi proteica • La sintesi proteica è il processo che porta alla formazione delle proteine da sequenze del DNA definite geni. • Si tratta di un processo a più fasi • Nelle sue linee fondamentali questo processo è identico in tutte le forme di vita, sia eucarioti che procarioti Dove avviene • Nei procarioti avviene nel batterioplasma • Nei procarioti , il processo comincia nel nucleo e termina nel citoplasma o nel lume reticolo endoplasmatico rugoso Sequenze nucleotidiche del DNA definite “loci” costituiscono i geni Ogni gene codifica per una specifica proteina L’RNA Nella sintesi proteica interviene un altro acido nucleico, l’RNA, presente in 3 forme diverse (ma a filamento singolo): - l’RNA messaggero (mRNA) - l’RNA ribosomale (rRNA) - l’RNA transfer (tRNA) L’RNA messaggero l’RNA messaggero (mRNA) è una molecola a catena lineare singola prodotta nel nucleo attarverso la trascrizione della sequenza genica a cui risulta complementare . L'mRNA è il trascritto di un gene nel linguaggio dell'RNA, che prevede quattro basi, identiche al DNA fatta eccezione per l'uracile che sostituisce la timina. Un mRNA maturo appena esportato dalla nucleoplasma attraverso la membrana nucleare è stato inoltre modificato mediante aggiunta di una 5'-metilguanina all'estremità 5' (cappuccio dell'mRNA), mediante una coda poliadenilata (AAAAA...) all'estremità 3' e associato a diverse tipologie di proteine utili a far riconoscere al resto della cellula l'avvenuta maturazione ed esportazione di questo fuori dal nucleo. Il ribosoma legge le basi dell'mRNA a triplette (dette codoni) e a ciascuna tripletta (per un totale di 64, che si ottiene elevando il numero delle basi dell'mRNA, cioè 4, al numero di cifre di una tripletta, 3) fa corrispondere un amminoacido rispettando il codice genetico. L’RNA ribosomale L’RNA ribosomale (rRNA) è sintetizzato nel nucleolo ed è il costituente principale (insieme ad alcune proteine) dei ribosomi, da cui il nome. L’RNA transfer L’RNA transfer (tRNA) è una particolare catena di RNA che viene rappresentato bidimensionalmente come una T... aminoacido D T anticodone che nella struttura tridimensionale è decisamente più complessa Il tRNA è una piccola molecola di RNA composta mediamente da 80 nucleotidi. Sono nti 61 tipi diversi di tRNA. Ha una caratteristica forma simile a quella di un quadrifoglio (la forma è data dal fatto che i nucleotidi che lo compongono sono appaiati in modo tale da originare una molecola con quattro sporgenze; due di queste sono più importanti: la prima è costituita da due nucleotidi non appaiati che sono sempre gli stessi per tutte le molecole di tRNA, cioè A C C; la seconda molecola è opposta alla prima, è costituita da una tripletta di basi anch' esse non appaiate che sono diverse per ciascuno dei 61 diversi tipi di tRNA). Vi sono quattro aree di particolare interesse in ciascuna molecola di tRNA, in particolare due anse, dette ansa D e ansa T, l'anticodone, specifico per ciascun tRNA e complementare ad un codone del mRNA e l'attacco dell'amminoacido corrispondente al codone all'estremità 3'. Esistono più tRNA per uno stesso amminoacido (infatti vi sono solo 48 anticodoni diversi codificati da circa 500 geni) e nel contempo un tRNA può associarsi a più di un codone. La serie di codoni che specifica uno stesso amminoacido è identica nelle prime due basi e differisce solo nella terza, con poche eccezioni. Un amminoacil-tRNA-sintetasi specifica per ciascun amminoacido (circa 20 tipi diversi) accoppia l'amminoacido corrispondente all'estremità 3' di ciascun tRNA (traduzione). Amminoacidi La sintesi proteica richiede anche gli amminoacidi, cioè i “monomeri” che, assemblati in sequenza, costituiranno le catene polipeptidiche Amminoacidi Tutte le proteine sono costituite da 20 tipi di amminoacidi, che sono indicati con i codici corrispondenti Ala Cys Asp Glu Phe Alanina Cisteina Acido aspartico Acido glutammico Fenilalanina Gly His Ile Lys Leu Glicina Istidina Isoleucina Lisina Leucina Met Asn Pro Gln Arg Metionina Asparagina Prolina Glutammina Arginina Ser Thr Val Trp Tyr Serina Treonina Valina Triptofano Tirosina Ribosomi Sono la sede della sintesi proteica I ribosomi, come detto, sono costituiti da rRNA e proteine Le fasi della sintesi proteica Le fasi della sintesi proteica sono 2: -La Trascrizione (che, negli eucarioti, avviene nel nucleo) -La Traduzione (che avviene sui ribosomi) La trascrizione Nella fase di trascrizione la doppia elica di una porzione di DNA viene dapprima svolta… … ad opera di un enzima detto RNA-Polimerasi La trascrizione Lo stesso enzima apre la doppia elica… e inizia, utilizzando uno dei due filamenti come stampo, a costruire una molecola complementare di mRNA. I dettagli di questo processo saranno descritti nelle attività nucleari Dalla trascrizione alla traduzione Il codice genetico Ma come si fa a passare dal “linguaggio” degli acidi nucleici (che utilizza 4 “lettere”)… … al “linguaggio” delle proteine (che utilizza 20 “lettere”)? Il codice genetico Certo non può esserci una corrispondenza 1:1 Ma non è neanche possibile associare un amminoacido ad una coppia di basi azotate Infatti le possibili coppie di basi sono 42 = 16 (AA, UU, CC, GG, AU, AC, AG, UA, UC, UG, CA, CG, CU, GA, GU, GC) troppo poche per poter codificare i 20 amminoacidi Il codice genetico Appare evidente, quindi, che il codice utilizzato si basa su triplette di basi… … infatti 43 = 64 combinazioni sono più che sufficienti per codificare i 20 amminoacidi Il codice genetico Ed ecco quindi il codice genetico: Ovviamente è ridondante: ci sono cioè più triplette che codificano per lo stesso amminoacido Ci sono anche le triplette di inizio (AUG) e di stop (UAA, UAG e UGA) che determinano l’inizio e la fine di una sequenza polipeptidica Il codice genetico Il codice genetico è universale: praticamente tutti gli organismi viventi utilizzano questo stesso codice per tradurre una sequenza di basi azotate (il DNA e poi l’RNA) in una sequenza di amminoacidi (la proteina) Ogni tripletta di basi sull’RNA è anche detta codone La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln G U Ala U C G Val A C A anticodone codone G C U C A A C C U G U A Gly U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln G U Ala U C G C U C A G A Val A C C C U G U A A Gly U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G C U G C A A A A C C U G U A U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Val Gly Gln Ala C G U U C G A G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Val Ala Gly Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Ala Gly Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Gly Ala Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Gly Ala Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C C G A A G C U G U U C A A C C U G U A U G G A La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C G C U G U U C A A C C U G U A A U G G A La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C A G G C U G U U C A A C C U G U A G U A La traduzione … e così via. 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