25/01/2016 sintesi proteica Cos’è la sintesi proteica • La sintesi proteica è il processo che porta alla f formazione delle proteine utilizzando le i d ll t i tili d l informazioni contenute nel DNA. • Si tratta di un processo complesso in cui intervengono vari “attori” • In generale questo processo è identico in tutte In generale questo processo è identico in tutte le forme di vita, sia eucarioti che procarioti 1 25/01/2016 Dove avviene • Il processo comincia nel nucleo (negli eucarioti) e termina nel citoplasma o nel i ti) t i l it l l reticolo endoplasmatico ruvido Gli “attori” – Amminoacidi La sintesi proteica consiste nella formazione di una sequenza di amminoacidi legati tra loro con legami peptidici Tutte le nostre proteine sono costituite da solo 20 tipi di amminoacidi Ala Cys Asp Glu Phe Alanina Cisteina Acido aspartico Acido glutammico Fenilalanina Gly His Ile Lys Leu Glicina Istidina Isoleucina Lisina Leucina Met Asn Pro Gln Arg Metionina Asparagina Prolina Glutammina Arginina Ser Thr Val Trp Tyr Serina Treonina Valina Triptofano Tirosina Una sequenza q di amminoacidi, come q questa… Gl y Al a Me t Val Tyr … è un polipeptide. 2 25/01/2016 Gli “attori” – DNA Nel DNA sono contenute le “istruzioni” per sintetizzare le diverse proteine Ogni “porzione” di DNA che h codifica difi per una specifica proteina è detta gene Ad esempio, questo potrebbe essere il gene per l’insulina… … e questo il gene per l’emoglobina 3 25/01/2016 La struttura del DNA fu scoperta negli anni ’50 dagli scienziati Watson e Crick da allora iniziò una nuova disciplina: la genetica molecolare • Il DNA è composto da 2 catene di nucleotidi avvolte l’una attorno all’altra a formare una doppia elica • le molecole di zucchero e i gruppi g pp fosfato hanno una funzione di supporto, come i montanti di una scala, le basi azotate sono i pioli. Cavazzuti Biologia © Zanichelli editore 2011 I nucleotidi sono i «mattoni» del DNA •I nucleotidi sono costituiti da: costituiti da: • una base azotata; • uno zucchero; • un gruppo fosfato. Cavazzuti Biologia © Zanichelli editore 2011 4 25/01/2016 Gli “attori” – RNA Nella sintesi proteica interviene un altro acido nucleico nucleico, l’RNA l’RNA, a filamento singolo singolo, presente in forme diverse Le più importanti sono: - RNA messaggero (mRNA) - RNA ribosomale (rRNA) - RNA transfer (tRNA) RNA messaggero l’RNA messaggero (mRNA) è una singola catena lineare di RNA che fa da tramite tra il nucleo e il citoplasma. Contiene una copia “in negativo” del gene (tratto di DNA), cioè il DNA viene usato come stampo per la creazione di un filamento complementare di RNA. La sequenza di RNA sii compone di gruppi di tre basi ciascuno, chiamati codoni. 5 25/01/2016 L’RNA ribosomale L’RNA ribosomale (rRNA) è il costituente principale p p ((insieme ad alcune p proteine)) dei ribosomi, da cui il nome. Robosomi= sono le “fabbriche” cellulari di proteine. Sono piccoli organuli costituiti da due subunità L’RNA transfer Il tRNA è un «camioncino» che: • trasposta 1 aminoacido • Ha una «targa» chiamata antiocodone, composta da 3 lettere che sono 3 basi composta da 3 lettere, che sono 3 basi azotate, che possono essere A – U – G – C . Es il tRNA con anticodone UAC trasporta l’aminoacido tirosina, con CUC trasporta leucina, con AUG trasporta metionina ecc. Il tRNA viene rappresentato bidimensional mente come un trifoglio... 6 25/01/2016 Codice genetico standard Con le 4 basi A U G C possiamo ottenere 64 triplette. 61 di essi codificano g gli amminoacidi, mentre i restanti tre (UAA, UAG, UGA) codificano segnali di stop (stabiliscono, cioè, a che punto deve interrompersi l'assemblamento della catena polipeptidica) Visto che gli amminoacidi sono 20, triplette diverse trasportano stessi amminoacidi sintesi proteica ) 7 25/01/2016 sintesi proteica = è la produzione di proteine che vanno a formare il corpo dell’individuo (fenotipo) La sintesi proteica avviene dentro ogni cellula del corpo, in fabbriche chiamate RIBOSOMI tRNA: camion che trasporta amminoacidi mRNA: nastro con istruzioni per il montaggio in sequenza degli aminoacidi RIBOSOMA proteina Le fasi della sintesi proteica sono 2: -La Trascrizione (che, negli eucarioti, avviene nel nucleo) -La Traduzione (che avviene sui ribosomi) La trascrizione Nella fase di trascrizione la doppia elica di una porzione di DNA viene dapprima svolta… … ad opera di un enzima detto RNA-Polimerasi 8 25/01/2016 La trascrizione Lo stesso enzima apre la doppia elica… … e inizia, utilizzando uno dei due filamenti come stampo, a costruire una molecola complementare di mRNA. La trascrizione Ecco un modello tridimensionale dell’RNAPolimerasi 9 25/01/2016 La trascrizione C G G C A T G C T A T A G C G C A T C G A T T A Ad esempio, prendiamo di una porzione di DNA come quella mostrata a sinistra La trascrizione C G G C A T G C T A T A G C G C A T C G A T T A Ad esempio, prendiamo di una porzione di DNA come quella mostrata a sinistra 10 25/01/2016 La trascrizione C G G C A T G C T A T A G C G C A T C G A T T A Ad esempio, prendiamo di una porzione di DNA come quella mostrata a sinistra La trascrizione C G G C A T G C T A T A G C G C A T C G A T T A Ad esempio, prendiamo di una porzione di DNA come quella mostrata a sinistra 11 25/01/2016 DNA DNA La trascrizione C G G C A T G C T A T A G C G C A T C G A T T A Dopo la separazione i d deii due filamenti, l’RNA polimerasi comincia ad assemblare la catena complementare di mRNA… mRNA DNA La trascrizione C G G C A U G C T A T A G C G C A U C G A U T A … utilizzando come stampo t uno dei filamenti e secondo la complementarietà delle basi. 12 25/01/2016 La trascrizione G C U … La catena di RNA messaggero così formata... C A A C C U G U A La trascrizione … La catena di RNA messaggero così formata... 13 25/01/2016 La trascrizione … sarà una sorta di impronta i t “in “i negativo” del gene da cui si è originato… G C U C A A C C U G U A RNA messagero … e migrerà verso i ribosomi liberi nel citoplasma o verso quelli attaccati al reticolo endoplasmatico rugoso, portando le istruzioni per la sintesi della proteina. Dalla trascrizione alla traduzione 14 25/01/2016 Il codice genetico Ecco il codice genetico: triplette di basi azotate (codoni) presenti sul tRNA che richiamano uno specifico aminoacido Ovviamente è ridondante: ci sono più triplette che codificano per lo stesso amminoacido Ci sono anche le triplette di inizio (AUG) e di stop (UAA, UAG e UGA) che determinano l’inizio e la fine di una sequenza polipeptidica Il codice genetico Il codice genetico è universale: praticamente tutti gli organismi viventi utilizzano questo stesso codice per tradurre una sequenza di basi azotate (il DNA e poi l’RNA) in una sequenza di amminoacidi (la proteina) Ogni tripletta di basi su mRNA è anche detta codone 15 25/01/2016 La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln G U Ala U C G Val A C A Gly U G G A anticodone codone G C U C A A C C U G U A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln G U Ala U C G C U C A G A Val A C C C U G U A Gly U G G A A 16 25/01/2016 La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G C U G C A U G G A A A A C C U G U A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A U G G A A 17 25/01/2016 La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Gln Val Gly Ala G U U C C G A G C U C A A C C U G U A U G G A A 18 25/01/2016 La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Val Gly Gln Ala C G U U C G A G C U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione Successivamente su ogni codone si attaccherà il tRNA con si La fase di traduzione ha inizio quando l’RNA messaggero l’anticodone complementare, portandosi dietro un amminoacido. attacca al ribosoma. Val Ala Gly Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A U G G A A 19 25/01/2016 La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Ala Gly Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Gly Ala Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A U G G A A 20 25/01/2016 La traduzione L’amminoacido del primo tRNA si lega poi a quello del secondo… Val Gly Ala Gln C C G A G U U G C U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C C G A U G G A A G C U G U U C A A C C U G U A 21 25/01/2016 La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione … il primo tRNA si allontana… Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A U G G A A 22 25/01/2016 La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C G A C G C U G U U C A A C C U G U A U G G A A La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C G C U G U U C A A C C U G U A U G G A A 23 25/01/2016 La traduzione … e un nuovo tRNA si attacca all’RNA messaggero Val Gly Ala Gln C A G G C U G U U C A A C C U G U G U A A La traduzione … e così via. Val Ala Gln Gly C G C U G U U G G A C A A C C U G U A U A 24 25/01/2016 La traduzione … e così via. Val Ala Gln Gly C G C U G U U G G A C A A C C U G U A U A La traduzione … e così via. Val Ala Gln Gly C G G C U U A U U C A A G G A C C U G U A 25 25/01/2016 La traduzione … e così via. Val Ala Gln Gly G G U C U U C C A A G G A C C U G U A U A La traduzione … e così via. Val G U Ala Gln Gly U C G C U C A A G G A C C U G U A U A 26 25/01/2016 La traduzione … e così via. Val Ala Gln Gly C G C U C A A G G A C C U G U A U A La traduzione … e così via. Ala Gln Gly Val C G C U C A A G G A C C U G U A U A 27 25/01/2016 La traduzione … e così via. Ala Gln Gly G C U C A A Val G G A C A U C C U G U A La traduzione … e così via. Ala Gln Gly G C U C A A Val G G A C A U C C U G U A 28 25/01/2016 La traduzione … e così via. Ala Gln Gly Val G C U C A A G G A C A U C C U G U A La traduzione In questo modo si viene a costruire un polipeptide sempre più grande finché non si arriva ad un codone di stop e la sintesi si interrompe. 29 25/01/2016 esercizio DNA Costruire il DNA e tRNA che permettono la sintesi di questo tratto di Proteina: Met-Cys-Ser-Pro-Leu-Val Codoni su tRNA che codificano per gli aminoacidi mRNA CODICE GENETICO Val Met AUG Cys ……. Ser ……. Immagini e dati utilizzati per la realizzazione di questa presentazione provengono da alcuni siti, fra i quali: http://www.psico.unitn.it/didattica/corsi/50042/ http://it.wikipedia.org/wiki/Sintesi_proteica http://ogm.greenpeace.it/new/dogmacentrale.php Un interessante filmato che riassume la sintesi proteica è disponibile sul sito www.molecularlab.it nella sezione Multimedia. 30