REALQUALITY REALQUALITY RS-VZV Cod. RQ-35 Kit per l’identificazione e la quantificazione del virus Varicella-Zoster (VZV) mediante PCR Real time INTRODUZIONE Il virus Varicella-Zoster (VZV), appartenente alla famiglia degli Herpesviridae, è responsabile sia della varicella (infezione primaria) che dell'herpes zoster (riattivazione dell’infezione latente). Di norma la varicella è una malattia benigna dell’infanzia, tuttavia in alcuni casi possono insorgere complicanze che variano da infezioni batteriche secondarie da Streptococcus pyogenes o da Staphylococcus aureus, che sono causa della formazione di cicatrici deturpanti, fino a gravi encefaliti. In circa il 10-20% dei casi, la varicella è seguita dopo diversi anni dall’herpes zoster. Il virus della varicella, infatti, permane nei gangli delle radici nervose dorsali ed in età adulta può riattivarsi. I più colpiti sono le persone anziane (>60 anni) e i soggetti immunocompromessi. Lo zoster può provocare lesioni neurologiche irreversibili (paralisi dei nervi cranici, emiplagia controlaterale). Se viene ad essere coinvolta la branca oftalmica del nervo trigemino, si manifesta lo zoster oftalmico. La retinite da virus Varicella-Zoster è una complicanza che può condurre a perdita della vista, e si presenta nei soggetti immunocompromessi o immunocompetenti. VZV può inoltre dare polmonite interstiziale nel 20-30% dei casi. Negli immunocompromessi causa una patologia progressiva e fatale poiché il virus può diffondere facilmente agli organi interni (polmoni, fegato..). Altre manifestazioni della varicella sono la sindrome da varicella congenita e la varicella perinatale. La diagnosi di laboratorio è effettuata a più livelli e prevede test citologici, test sierologici, immunofluorescenza in situ e analisi molecolari. La sensibilità diagnostica della PCR è risultata essere decisamente superiore (95%) di quella delle tecniche classiche come la coltura (20%), la sierologia e l’immunofluorescenza (82%). CARATTERISTICHE TECNICHE Controllo interno: Amplificazione gene β-globina (BG) in multiplex con il target patogeno Controllo positivo: DNA contenente parte del genoma di VZV e del gene BG Piattaforme validate: Applied Biosystems 7500 Fast/Fast Dx, 7300 e StepOne/StepOnePlus Real-Time PCR System (Applied Biosystems) LightCycler® 480 Real-Time PCR System (Roche) Dx Real-Time System e CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad) Risulta impiegabile su strumenti in grado di utilizzare un volume di reazione di 25 μL e di rilevare adeguatamente la fluorescenza dei fluorofori FAM e JOE. Specificità analitica: assenza di appaiamenti aspecifici di primer e probe; assenza di cross-reattività Sensibilita’analitica (detection limit): 0,76 copie genoma virale /µL DNA estratto Sensibilità analitica (range linearità): 10 - 107 copie genoma virale/reazione Riproducibilità variabilità intra-assay: 0,25% Riproducibilità variabilità inter-assay: 0,28% Specificità diagnostica: 100% Sensibilità diagnostica: 99% Accuratezza: 99,4% Figura 1. Curva standard VZV visualizzata su Applied Biosystems 7500 Fast Dx Real-Time PCR System con SDS software. INFORMAZIONI PER GLI ORDINI Cod # RQ-35-48/96 Cod # RQ-36-ST Prodotto REALQUALITY RQ-VZV STANDARD Formato 4 x 60 µL BIBLIOGRAFIA Stabilità: 12 mesi Regione amplificata: regione genica ORF29, codificante per la Major DNA binding protein Formato 48/96 test Per la costruzione della curva standard: Numero di test: 48 o 96 test Materiale di partenza: DNA estratto da tamponi da lesioni cutanee, liquor/CSF, plasma, sangue intero Prodotto REALQUALITY RS-VZV Gilden DH et al. N Eng J Med 342, 635-645, 2000 Saiki RK et al. Science 230, 1350-1354, 1985 Sauerbrei A et al. J Clin Virol 14, 31-36, 1999 Weller TH. J Infect Dis 166 (Suppl 1),S1-S6,1992 Questo prodotto usa una tecnologia brevettata da Biosearch Technologies per l'utilizzo in diagnostica molecolare umana. RS-VZV_techleaf_i20150715 AB ANALITICA srl Via Svizzera 16 – 35127 PADOVA (ITALY) tel. +39 049 761698 - Fax +39 049 8709510 e-mail: [email protected] www. abanalitica.it