VETERINARY
VETERINARY
RV-BVDV-BDV
Cod. V1-10
Kit per l’identificazione di Bovine Viral
Diarrhoea Virus (BVDV) e Border Disease Virus
(BDV) mediante PCR Real-Time
INTRODUZIONE
Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) e Border Disease Virus
(BDV) sono virus ad RNA con envelop appartenenti al genere
Pestivirus famiglia delle Flaviviridae. Del virus della BVDV si
conoscono 3 genotipi (BVDV-1 BVDV-2 e BVDV-3) mentre
della BDV ad oggi è stato identificato un solo genotipo. Il
contagio può avvenire in epoca pre o post-natale. Nel contagio
pre-natale, se la vacca s’infetta in gestazione, il virus
raggiunge nella fase viremica il feto. Nel caso del contagio
post-natale il virus, generalmente presente sotto forma non
citopatogena, penetra a livello oro-nasale, congiuntivale o
genitale dove ha luogo la replicazione primaria. La replicazione
secondaria avviene invece a livello di milza, linfonodi e
mucosa intestinale. La trasmissione è in maniera
predominante di tipo orizzontale per contatto stretto tra gli
animali, attraverso secrezioni oculo-nasali, saliva, urina e feci.
Le sorgenti d’infezione più comuni sono rappresentate da
animali con infezione post-natale in atto.
L’uso delle metodiche molecolari ha aumentato notevolmente
la possibilità di diagnosi di queste infezioni. Grazie all’estrema
sensibilità della metodica Real time PCR, l’RNA virale può
essere identificato anche su quei campioni che non possono
essere processati con metodi alternativi. Inoltre l’analisi può
essere condotta su campioni di sangue e siero prelevato da
animali con età inferiore ai sei mesi di vita consentendo di
evidenziare la presenza del virus nelle fasi precoci
dell’infezione.
CARATTERISTICHE TECNICHE
Piattaforme compatibili:
Validato su
Dx Real-Time System e CFX96 Real-Time PCR Detection
System (Bio-Rad);
Applied
Biosystems 7500 Fast/Fast Dx (Applied
Biosystems);
Applied Biosystems 7300 Real-Time PCR System (Applied
Biosystems);
Applied Biosystems StepOne/StepOne Plus Real-Time PCR
System (Applied Biosystems).
Compatibile su:
PikoReal96 Real-Time PCR System (Thermo Scientific).
Risulta impiegabile su strumenti in grado di utilizzare un
volume di reazione fino a 20 μL e di rilevare adeguatamente la
fluorescenza dei fluorofori FAM e JOE.
Specificità analitica: scelta accurata e specifica di primer e
sonda. Utilizzo di condizioni di amplificazione stringenti.
Sensibilita’analitica (detection limit): 1,2 copie di genoma
virale/µL RNA estratto (95% positività)
Riproducibilità variabilità intra-assay: 0,98%
Riproducibilità variabilità inter-assay: 0,78%
Specificità diagnostica: 95%
Sensibilità diagnostica: 98%
Accuratezza: 96%
Figura 1. Curva di amplificazione del controllo positivo BVDV-BDV visualizzata
su Applied Biosystems 7500 Fast Dx Real-Time PCR System con SDS software.
INFORMAZIONI PER GLI ORDINI
Cod #
Numero di test: 48 o 96 test
V1-10-48
Stabilità: 6 mesi
Materiale di partenza: RNA estratto da cute auricolare (“ear
notch”), siero, tampone nasale, pelo con follicolo pilifero
V1-10-96
Prodotto
VETERINARY
RV-BVDV-BDV
VETERINARY
RV-BVDV-BDV
Formato
48 test
96 test
BIBLIOGRAFIA
Regione amplificata: 5’ UTR
Controllo interno: Amplificazione IC in multiplex con il target
patogeno
- Baker J.C. (1995) Vet. Clin. N.A. Food Anim. Pract.; 11(3):425-445
Controllo positivo: DNA contenente parte del genoma di
BVDV
- Decaro N., et al. (2012) J. Clin. Microbiol.; 50(2):509-512
Retrotrascrizione: condotta insieme all’amplificazione (onestep RT-PCR Real time)
- Smith R.L., et al. (2013) Prev. Vet. Med.; 113(4):492-503
- Booth R.E., et al. (2013) Veterinary Research; 44 (1):43-57
- Peletto S (2014) Biomed Res Int. 2014;2014:147145
RV_BVDV_BDV_techleaf_i20141015
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