Polyclonal Goat
Anti-Mouse Immunoglobulins/RPE
Goat F(ab’)2
Codice n. R0480
Edizione 01.05.03
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
R 0480 è destinato all’uso nella citometria a flusso.
R 0480 è stato prodotto per fornire una prestazione ottimale nella citometria a flusso utilizzandolo in
combinazione all’anticorpo monoclonale murino. Essendo l’immunoglobulina di capra del frammento F(ab') 2, il
reagente è particolarmente adatto all’uso su cellule non fissate di recettori Fc evidenziati, ma anche per altre
applicazioni in cui la parte Fc della molecola dell’anticorpo potrebbe interferire.
R 0480 è anche molto adatto allo screening di colture cellulari di ibridoma murino per la produzione di anticorpi.
Reagente fornito
R 0480 è la frazione di immunoglobulina F(ab’)2 frammentata e purificata dell’antisiero di capra coniugato con
R-ficoeritrina (RPE). Il coniugato viene fornito in forma liquida in Tris/HCl 0,05 mol/L, NaCl 0,1 mol/L, NaN3
15 mmol/L, abumina di siero bovino all’1%, pH 7,2.
Concentrazione proteica (g/L): fare riferimento all’etichetta sulla fiala.
Valore spettrofotometrico: E567 nm/E278 nm: 4,1 corrispondente al rapporto molare RPE/anticorpo pari a circa 1.
Preparazione
1.
La frazione immunoglobulinica è stata assorbita in fase solida per rimuovere gli anticorpi che crossreagiscono con le immunoglobuline umane e con il siero ferale di vitello.
2.
La frazione immunoglobulinica assorbita è stata successivamente purificata per cromatografia di affinità
utilizzando bead di agarosio accoppiato con immunoglobuline murine.
3.
La frazione immunoglobulinica isolata per affinità è stata, quindi, degradata con pepsina e il frammento
F(ab')2 è stato isolato per filtrazione di gel.
4.
Infine, il frammento F(ab')2 è stato coniugato con RPE.
Immunogeno
Immunoglobuline, principalmente IgG, isolate dal siero di topo.
Specificità
L’anticorpo reagisce con tutte le sottoclassi delle IgG murine e con le IgM murine. La reazione con le altre
immunoglobuline murine non è stata studiata, ma l’anticorpo reagirà probabilmente con tali immunoglobuline
mediante le loro catene leggere.
La cross-reazione con immunoglobuline umane e con il siero fetale di vitello, secondo la determinazione con la
metodica ELISA, è molto ridotta, inferiore allo 0,5%. La cross-reazione con le immunoglobuline di coniglio e di
suino è inferiore allo 0,5%.
La cross-reazione con le immunoglobuline della cavia è pari a circa il 10%, mentre la cross-reazione con le
immunoglobuline di ratto è pari a circa il 30%.
Precauzioni
1. Per uso professionale.
2. Il prodotto contiene azide sodica (NaN3), una sostanza chimica altamente tossica allo stato puro. Alle
concentrazioni indicate, il prodotto non è classificato come pericoloso, ma l’azide sodica potrebbe reagire con
le tubature in piombo e in rame formando accumuli altamente esplosivi di azidi metalliche. Per lo smaltimento
del prodotto, eliminare il materiale sciacquando abbondantemente con acqua per evitare l’accumulo di azidi
metalliche nelle tubature.
3. Utilizzare le procedure di manipolazione indicate per i prodotti derivati da fonti biologiche.
Conservazione
Conservare al buio a 2-8 C. Non usare dopo la data di scadenza riportata sulla fiala. Se i reagenti sono
conservati in condizioni diverse da quelle specificate, l’utente deve verificarne le condizioni.
I coniugati non devono essere conservati in forma diluita. Se si dovesse osservare una colorazione inattesa
non attribuibile a modifiche delle procedure di laboratorio e si sospetta un problema relativo all’anticorpo,
contattare il Servizio tecnico.
Valori di diluizione
(104553-002)
Nella citometria a flusso, R 0480 può essere utilizzato ad un volume di 10 L per effettuare test e a un
intervallo di diluizione di 1:10-1:20. Questo valore va inteso solamente come guida. Le condizioni ottimale
possono variare a seconda del campione e del metodo di preparazione e deve essere determinata dai singoli
laboratori. Occorre ricordare che i coniugati con fluorocromo sono fotosensibili e che pertanto i campioni
devono essere protetti dalla luce durante la procedura di colorazione, fino all’analisi.
R 0480/IT/KKR/01.05.03 p. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Legenda dei simboli
(104553-002)
Numero di catalogo
Limiti di temperatura
Utilizzare entro
Dispositivo medico-diagnostico
in vitro
Tenere lontano dal calore
(consultare la sezione
Conservazione)
Fabbricante
Consultare le istruzioni per
l’uso
Codice del lotto
R 0480/IT/KKR/01.05.03 p. 2/2
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