Polyclonal Goat
Anti-Mouse Immunoglobulins/FITC
Goat F(ab’)2
Codice nr. F 0479
Edizione 01.05.03
Uso previsto
Per uso diagnostico in vitro.
L'anticorpo F 0479 è previsto per l’uso in citometria a flusso.
L'F 0479 è stato prodotto per garantire una performance ottimale in citometria a flusso quando usato in
combinazione con un anticorpo monoclonale murino. Essendo un frammento F(ab') 2 di immunoglobulina di
capra, il reagente è particolarmente indicato per il lavoro su cellule non fissate che esibiscono recettori Fc, e
anche per altre applicazioni nelle quali la porzione Fc della molecola anticorpale potrebbe costituire un
elemento di disturbo.
L'F 0479 è indicato anche per lo screening delle colture cellulari di ibridoma murino per la produzione
anticorpale.
Reagente fornito
L'F 0479 è la frazione immunoglobulinica frammentata di F(ab’)2 e purificata di antisiero di capra coniugato con
fluoresceina isotiocianato isomero 1 (FITC). Il coniugato è fornito in forma liquida in Tris/HCl 0,05 mol/L, NaN3
15 mmol/L, albumina di siero bovino all'1%, pH 7,2.
Concentrazione proteica (g/L): fare riferimento all’etichetta sulla fiala.
Rapporto F/P: E495 nm/E278 nm = 0,65 ± 0,05 corrispondente ad un rapporto molare FITC/proteina pari a 2,5.
Preparazione
1.
La frazione immunoglobulinica è stata assorbita in fase solida per rimuovere la cross-reattività degli
anticorpi con le immunoglobuline umane e il siero fetale di vitello.
2.
La frazione immunoglobulinica assorbita è stata ulteriormente purificata mediante cromatografia di affinità
con sfere di agarosio associate a immunoglobuline murine.
3.
La frazione immunoglobulinica isolata per affinità è stata quindi degradata mediante pepsina e la frazione
F(ab')2 isolata mediante gel filtrazione.
4.
Infine la frazione F(ab')2 è stata coniugata con fluoresceina isotiocianato isomero 1 (FITC).
Immunogeno
Immunoglobuline, principalmente IgG, isolate dal siero di topo.
Specificità
L’anticorpo reagisce con tutte le sottoclassi delle IgG murine e con le IgM murine. La reazione con altre
immunoglobuline murine non è stata esaminata, ma l'anticorpo probabilmente reagisce con queste tramite le
loro catene leggere.
La cross-reazione con le immunoglobuline umane e con il siero fetale di vitello è molto bassa secondo la
determinazione con ELISA, inferiore allo 0,5%. La cross-reazione con le immunoglobuline di coniglio e maiale è
inferiore allo 0,5%.
La cross-reazione con le immunoglobuline della cavia è circa del 10% e con le immunoglobuline del ratto di circa il
30%.
Precauzioni
1. Per operatori specializzati.
2. Il prodotto contiene azide sodica (NaN3), una sostanza chimica altamente tossica allo stato puro. Alle
concentrazioni indicate, il prodotto non è classificato come pericoloso, ma l’azide sodica potrebbe reagire con
le tubature in piombo e in rame formando accumuli altamente esplosivi di azidi metalliche. Per lo smaltimento:
del prodotto, è consigliabile sciacquare abbondantemente con acqua per evitare l’accumulo di azidi metalliche
nelle tubature.
3. Utilizzare le procedure di manipolazione indicate per i prodotti derivati da fonti biologiche.
Conservazione
Conservare al buio a 2-8C. Non usare dopo la data di scadenza riportata sulla fiala. Se i reagenti sono
conservati in condizioni diverse da quelle specificate, l’utente deve verificarne le condizioni.
I coniugati non devono essere conservati in forma diluita. Se si dovesse osservare una colorazione inattesa
non attribuibile a modifiche delle procedure di laboratorio e si sospetta un problema relativo all’anticorpo,
contattare il Servizio Tecnico.
Linee guida per la diluizione In citometria a flusso, l'F 0479 può essere usato a un volume di 10 L per test e con una diluizione di 1:101:20. Questo valore va inteso solamente come guida. Le condizioni ottimali possono variare a seconda del
campione e del metodo di preparazione e devono essere determinate dai singoli laboratori. Occorre ricordare
che i coniugati con fluorocromo sono fotosensibili e che pertanto i campioni devono essere protetti dalla luce
durante la procedura di colorazione, fino all’analisi.
(104740-002)
F 0479/IT/KKR/01.05.03 p. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Legenda dei simboli
(104740-002)
Numero di catalogo
Limiti di temperatura
Dispotivo medico-diagnostico
in vitro
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Fabbricante
F 0479/IT/KKR/01.05.03 p. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
