LABORATORIO DI BIOLOGIA RELAZIONE N°. 1 ESERCITAZIONE: Saggio di Lugol SCHEMA: Coltello Porta provette con Provette Pipetta Monouso (pipetta Pasteur) Spatola d’Acciaio Zucchero Spruzzetta con Acqua di Rubinetto Limone Soluzione di Lugol Riso Cipolla Pane Patata Farina OGGETTO: Determinazione della presenza di amido nei vari alimenti Data: Cognome e Nome: Classe: 16/10/2013 3Bbiot. Cocomazzi Raffaele STRUMENTI E APPARECCHI UTILIZZATI: Porta provette con 8 provette Le provette sono dei tubi chiusi a un’estremità, che servono per analizzare una o più sostanze. Nel nostro caso le si utilizzano per determinare la presenza di amido negli alimenti. Bacchetta di vetro La bacchettina di vetro è uno strumento utilizzato per omogeneizzare in tutti i punti le soluzioni. Nel nostro caso è utilizzato per mescolare bene gli alimenti e l’acqua dentro le provette. Spatola di acciaio E’ un attrezzo utilizzato per la manipolazione di sostanze e quindi per prelevare sostanze. Spruzzetta con acqua di rubinetto La spruzzetta è un recipiente di plastica che contiene generalmente acqua distillata e permette di “spruzzare” facilmente il suo liquido all’interno tramite un tubicino di plastica flessibile. Nel nostro caso la si utilizza con acqua di rubinetto. Pipetta mono uso (o pipetta Pasteur) E’ un attrezzo chimico ideato da Louis Pasteur, normalmente denominato contagocce. Essa non può essere adoperata come strumento di precisione poiché è priva di una scala graduata. Essa è spesso utilizzata con funzione qualitativa e non quantitativa (come saggi in provetta e simili) in cui è importante solo la natura dei reagenti e non la loro quantità in moli. Coltelli Utilizzati per sbucciare, tagliare e sminuzzare i vari alimenti Carta Assorbente SOSTANZE O ALIMENTI UTILIZZATI: Farina Cipolle Limoni Zucchero (Saccarosio C12H22O11) Patate Riso Pane Soluzione di Lugol (o reattivo di Lugol) TABELLA: COLORE DI PARTENZA COLORE FINALE ESITO PRESENZA AMIDO (Con l’acqua) (Con il Lugol) 0 * ACQUA TRASPARENTE GIALLO CHIARO NEGATIVO 1 FARINA BIANCO VIOLA TORBIDO POSITIVO 2 CIPOLLA TRASPARENTE GIALLO CHIARO NEGATIVO 3 LIMONE OPACO GIALLO CHIARO NEGATIVO 4 ZUCCHERO TRASPARENTE GIALLO CHIARO NEGATIVO 5 PATATA OPACO GRIGIO SCURO POSITIVO 6 RISO GIALLINO VIOLA POSITIVO 7 PANE BIANCO TORBIDO VIOLA SCURO-NERO POSITIVO n ALIMENTO (*): UTILIZZATO COME CAMPIONE DI CONFRONTO PER IL CONTROLLO NEGATIVO RELAZIONE: CONOSCENZE TEORICHE: L’amido L'amido è uno zucchero polisaccaride, comunemente contenuto in alimenti come pane, pasta, riso, patate... La sua formula grezza è: (C6H10O5)n dove n è un numero che varia da un centinaio fino ad alcune migliaia, e che sta ad indicare i residui di unità di glucosio monomeriche che sono unite tra loro per formare i polimeri. Insieme alla cellulosa è uno dei più noti polisaccaridi presenti nei vegetali, che lo sintetizzano naturalmente a partire dal glucosio. Un grammo di amido apporta circa 4,2 kcal. Esso è un polimero del glucosio costituito per l’ 80% da amilopectina e per il 20% da amilosio che si differenziano l'uno dall'altro per la struttura. L'amilosio è un polimero lineare che tende ad avvolgersi ad elica. L'amilopectina è invece un polimero ramificato che presenta catene di base di struttura simile all'amilosio che si dispongono a formare una struttura ramificata. L'amido si trova nei frutti, nei semi e nei tuberi delle piante. Nell'industria alimentare le cinque fonti principali di amido sono il mais, le patate, il riso, la tapioca e il grano. Una semplice analisi qualitativa che indica la presenza dell'amido può essere condotta in laboratorio saggiando la sostanza con il reattivo di Lugol. In presenza di amido, il reattivo tende a legarsi (in particolare all'elica dell'amilosio) dando un complesso che assorbe la luce, virando verso il blu scuro. Il reattivo di Lugol Il reattivo di Lugol è un colorante in soluzione acquosa di iodo-iodurata di colore giallo-marrone chiaro, inodore utilizzata nei laboratori di biologia come colorante per il riconoscimento della presenza di amico o per delineare alcune strutture cellulari durante l’osservazione microscopica. Il reattivo prende il nome dal suo inventore, il francese Jean Guillaume Auguste Lugol. In soluzione KI (ioduro di potassio) si dissocia e l'anione I- tende a reagire con lo iodio elementare secondo la reazione: I2 + KI I3- + K+ Il Lugol è utilizzato per il riconoscimento della presenza di amido perché l’amido è composto da Amilopectina e soprattutto Amilosio, il quale legandosi con lo ione I3– fa virare la soluzione da giallo a blu scuro o nero. DESCRIZIONE DELLA PROVA: Lo scopo della prova è quello di rilevare la presenza di amido nei vari alimenti. Per svolgere la prova bisogna prima di tutto preparare il campione di riferimento come controllo negativo, cioè inserire la normale acqua in una provetta e aggiungere da 2 a 5 gocce del reattivo di Lugol. Il risultato sarà una soluzione giallognola perché nell’acqua non c’è amido e quindi il Lugol non cambia colore. Ogni volta che la soluzione con le diverse sostanze (gli alimenti) uscirà di questo colore vuol dire che l’amido non è presente, o è presente in bassissime quantità. In seguito si sbucciano e si sminuzzano finemente gli alimenti mettendoli nelle provette (solo dopo aver numerato le provette ed aver elencato il numero in tabella) cercando di avere più o meno la stessa quantità di sostanza per ogni provetta. Poi si aggiunge un po’ di acqua (5-10ml) in modo che le provette raggiungano tutte lo stesso livello e che siano diluite allo stesso modo, quindi si mescola bene aiutandosi anche con la bacchettina di vetro. Dopo aver preparato le soluzioni ed aver annotato nella tabella i colori di partenza attinenti, si procede con l’analisi delle sostanze aggiungendo ad esse, aiutandosi con la pipetta mono uso (o Pasteur), alcune gocce di soluzione di Lugol. Alcune sostanze diventeranno di colore scuro, altre di colore giallino. Ora si riporta nella tabella il cambiamento di colore e si confronta il risultato di ciascuna provetta con il campione di riferimento. Si può facilmente notare come il colore della farina, della patata, del riso e del pane sia totalmente diverso da quello del campione di riferimento, questo perché gli alimenti contengono amido. Se si aggiunge la saliva in queste provette contenenti amido, si può notare come il colore pian piano si schiarisce. Questo cambiamento di colore è dovuto alla presenza di ptialina (o amilasi) nella saliva, un enzima che provvede alla digestione chimica degli amidi, spezzandoli in zuccheri più semplici. CONCLUSIONI: Come possiamo vedere nella tabella delle osservazioni, le sostanze che reagiscono con il reattivo di Lugol sono la farina, il riso, il pane e la patata. Infatti i vacuoli della patata contengono l’amido come materiale di riserva e il pane è costituito in gran parte da questo polisaccaride, così come la farina (che costituisce il pane) e il riso. OSSERVAZIONE DELL’INSEGNANTE: