Relatore: Azzurra Bolognini Data: 15/07/2021 Titolo: RICERCA DELL’ AMIDO NEGLI ALIMENTI Obiettivo/scopo: Rilevare la presenza di amido (amilosio)e riuscire a differenziarne l’ assenza in campioni organici di alimenti. Prerequisiti: L’amido è un polisaccaride costituito da unità di glucosio unite da legami glicosidici ed è una molecola di conservazione che si trova solo nelle piante. Le catene formate durante la reazione di condensazione sono molecole lineari o fortemente ramificate. Le piante immagazzinano il glucosio come amido polisaccaridico; anche i cereali (grano, riso, mais, avena, orzo) ed i tuberi come le patate sono ricchi di amido. L’amido può essere separato in due frazioni: amilosio e amilopectina. Gli amidi naturali sono miscele di amilosio (10-20%) e amilopectina (80-90%). La struttura dell’amilosio è costituita da lunghe catene polimeriche di unità di glucosio. amilosio L’amilosio è una catena lineare in cui le molecole di glucosio ( il monomero ) si legano tra loro con un legame α-1,4-glucosidico : la catena assume una struttura elicoidale a causa della geometria imposta dagli angoli di legame tra le molecole di glucosio. amilopectina Mentre l’amilopectina , presenta una struttura ramificata ( sono infatti presenti legami α-1,6- glucosidico nei punti di ramificazione) E’ questo il motivo per cui l’ amilosio è solubile in acqua (forma una dispersione colloidale in acqua calda) mentre l’ amilopectina è insolubile. Solo le piante e gli alimenti a base vegetale dovrebbero risultare positivi per la presenza di amido. La presenza di amido può essere verificata impiegando il cosiddetto Reattivo di Lugol, una soluzione acquosa iodo-iodurata di colore marrone chiaro, inodore. Essa si prepara facendo sciogliere 20 grammi di KI in 100 ml di acqua distillata e aggiungendo 10 grammi di Iodio cristallino; la soluzione madre così ottenuta viene quindi diluita in ragione di 1:4 in acqua distillata per ottenere la soluzione di lavoro. Principio del metodo L’amido ha una reazione specifica con il Lugol: Primariamente → I2 + KI → I3– + K+ Quando in una sostanza è presente amido, lo ione I3– presente nel reattivo, interagisce con la catena elicoidale dell’ amilosio, inserendosi al suo interno. Il complesso risultante assorbe radiazione luminosa e si ha un viraggio verso una colorazione blu/violetta della soluzione contenente l’amilosio . Se il Reattivo di Lugol non dovesse essere reperito, può essere facilmente sostituito da un disinfettante allo iodio (es. Betadine, una miscela di povidone-iodio), o dalla tintura di iodio (qui lo iodio viene sciolto in alcool, o alcool e acqua), a seconda di ciò che è disponibile. Materiali e reagenti: Provette, porta provette, contagocce, bacchetta di vetro, mortaio con pestello. reattivo di Lugol - acqua distillata Campioni di alimenti: pasta – riso – sale - patata- mela – farina - zucchero Procedimento: 1. Abbiamo preparato una serie di provette (tante quante sono i nostri campioni + una in cui abbiamo predisposto il controllo, costituito da sola acqua distillata) e le abbiamo numerate con un pennarello. 2. Abbiamo sminuzzato finemente ogni alimento tramite mortaio, trasferendoli poi nella provetta marcata con il numero corrispondente a ciascun alimento, riempiendo grosso modo le provette con la stessa quantità di campione 3. Abbiamo aggiunto 5 ml circa di acqua distillata in ciascuna provetta e mescolato con una bacchetta (diversa per ogni provetta per evitare contaminazione tra i campioni) 4. Abbiamo aggiunto con il contagocce alcune gocce del reattivo di Lugol in ciascuna provetta, mescolato e annotato subito su una tabella qualsiasi cambiamento di colore abbia avuto luogo rispetto alla provetta di controllo (nella provetta del controllo la presenza di sola acqua + reattivo di Lugol dava origine a una soluzione giallastra, indice di assenza di amido). Analisi e Tabella di raccolta dei dati: ALIMENTO Pasta COLORAZIONE DOPO L’AGGIUNTA DEL REATTIVO DI LUGOL Blu-viola Riso Blu-viola Sale Giallo Patata Blu-viola Mela Giallo Farina Blu-viola Zucchero Giallo POSITIVO NEGATIVO X X X X X X X Conclusioni e discussione dei risultati: L’ osservazione dei risultati ci ha consentito di rilevare che i campioni di pasta, riso, patata e farina dopo l’ aggiunta del Reattivo di Lugol, hanno virato verso una colorazione blu- violastra, indicando in essi la presenza di amido. Contrariamente, i campioni di sale, mela e zucchero dopo l’ aggiunta del Reattivo di Lugol hanno virato verso una colorazione giallastra sovrapponibile a quella del controllo, comportamento che si traduce come l’ assenza di amido in tali campioni. Bibliografia David L.Nelson, Michael M Cox, Introduzione alla biochimica del Lehninger, Zanichelli, 2011 B.Colonna, Le basi chimiche della vita, Pearson, 2016 Sitografia www.wikipedia.org