10/12/16 OGMnellenostretavole 07-12-2016 PRESENTAZIONE A CURA DI: Do�.ssa Mar�na Antonini Do�.ssa Elisa Marche� Do�.ssa Francesca Mecarelli 1 TEMI TRATTATI 1. IntroduzioneagliOGM,principalese�oridiimpiego, vantaggiesvantaggi 2. TecnichediproduzionedegliOGM 3. LegislazioneItalianaedEuropeariguardol’usodegliOGMin agricoltura,alimentazioneumanaeanimale 2 1 10/12/16 OrganismoGene�camenteModificato(OGM)èper definizioneunesserevivente(ba�eri,pianteoanimali)neiqualièstata modificata,grazieaprocedimen�diingegneriagene�ca,unaporzionedi patrimoniogene�coalloscopodio�enerenuovecara�eris�che chenonsisarebberomaipotutesvilupparespontaneamenteinquella�pologia diorganismo. 3 UnOrganismoTransgenico(OT)èunessere viventechehains’èilpatrimoniogene�codispecie diverse.Gliorganismitransgeniciprodo�dall'uomocon letecnichedell'ingegneriagene�caconsentonodiinserire unapartedelpatrimoniogene�codiunanimaleinun animaledispeciediversa,oinunapianta,cosachecon tecnichediincrocionaturalisarebbeimpossibile. 4 2 10/12/16 Se�ori di impiego degli OGM q AGRICOLTURA q MEDICO-FARMACEUTICO q INDUSTRIA 5 AGRICOLTURA ü maistransgenicoresistenteallelarvedellapiralide ü patatecontolleranzaalladoriforaeaivirus ü soiaresistenteall'erbicidaRound-Up ü pomodoriamaturazionedilazionataedota�di proprietàinse�cide ü colzaconunmigliorcontenutoinacidigrassi(rido�o contenutodiacidoerucico) ü fagioliconproprietàinse�cide ü pomodoriamaturazioneritardata ü risoingradodisinte�zzareprecursoridellavitamina A 6 3 10/12/16 Miglioramento delle Qualità ü Qualitànutrizionali:conmodificazionigene�chesisonoo�enutepianteconmaggiorcontenutodi amminoacidi,minerali,vitamineoconunacomposizionelipidicamodificata.Unesempiodiquesto �podimodificazionièilrisoGoldenRice,capacedisinte�zzarelavitaminaA 7 ü Qualitàcommerciali:unesempiodimodifichegene�checonquestafinalitàèil pomodoroFLAVRSAVRincuièstatointrodo�oilgenelacuiespressione bloccal’a�vitàdelgenenaturaledell’enzimaresponsabiledelrammollimento inmaturazione.Inquestomodoilpomodoropuòessereraccoltopiùtardiesi conservapermaggiortempomantenendoinalteratoilsuogusto. 8 4 10/12/16 MEDICINA E FARMACOLOGIA ü produzionediormoni(insulina) ü prodo�delsangue(fa�oriVIII,IXefa�oriII,VI,X) ü farmacian�nfe�viean�tumorali ü immunomodulatorievaccini ü sviluppodireagen�etecnichediagnos�che(an�corpimonoclonali, sondemolecolariaDNA,PCR)applicabiliallediversemala�e ü terapiagenica 9 INDUSTRIA ü unsalmonediallevamentoGMcheraggiungelamaturitànellametàdeltempo rispe�oalsalmonenaturale,l’u�lizzodiquestaspecieconsen�rebbediallentarelo sfru�amentodellerisorsenaturaliavantaggiodell'ecosistema,percercaredi ridurrelapescaintensivaneimari ü Nel2012,inCanada,èstatosviluppatounOGMcapacediridurreindire�amente l'inquinamentodafosfa�nelleacque,conl'obbie�vodimoderarelacrescitaalgale el'asfissia(conconseguentemorte)dellafaunai�calocale.Atalproposito,lefeci deimaialidiallevamentosisonodimostrateunadellemaggiorifon�difosfa�chesi riversanonelleacquelocali,quindièstatasperimentatalaproduzionediunmaiale cheriduceleemissionidifosfa�dal30al70%rispe�oall'animaleoriginario. ü ceppidiversidelba�erioPseudomonaspu�dasonoingradodidegradareidiversi �pidiidrocarburipresen�nelpetrolio ü L’impiegodialtripar�colariceppidiba�erisembranoessereingradodiasportare laquasitotalitàdizolfopresentenelcarbone.Ques�dunquepossonoessere u�lizza�perlepioggeacide,chedanneggianopesantementelaghieforeste,lequali sonodovutesopra�u�oallapresenzadizolfoeisuoicompos�chesiliberanodalla combus�onedelcarbone. 10 5 10/12/16 VANTAGGI DEGLI OGM ü O�enerecoltureimmuniadinse�fitofagieamicrorganismifitopatogeni ü Evitareglieffe�letalideidiserban�sulraccoltoesull’ambiente ü Diminuireleperditeeconomichechederivanodaldeterioramentodellederratealimentarinel periododellaconservazione ü Possibilitàdicol�varepianteinambien�proibi�vi(aridi,freddi,conterrenisalinizza�o impoveri�) ü Accrescereilcontenutonutrizionaleendogenodeiprodo�agricoli(for�ficazionedeglialimen�) ü Eliminarelapresenzaneglialimen�disostanzecheprovocanoallergieedintolleranze ü Somministraremolecoleconazionefarmacologicaprodo�edire�amentedallestessepiante ü Produzionemassivadiormonicheprimapotevanoessereprodo�esoloinpiccolequan�tà ü Produzionedifarmaciricombinan�perlaterapiagenicadialcunepatologie ü Produrreorganismiingradodidegradaregliinquinan�ambientali 11 SVANTAGGI OGM ü LepianteOGM,chechiaramentevengonotestateperevitareognipossibilepericolo, potrebberoancheprodurredellesostanzetossiche,magariinquan�tàirrisoriemache potrebberodiventaresignifica�veassumendoleperlunghiperiodiditempo ü InserendonellespecieOGMdeigenicheconferisconoresistenzaaglian�bio�ci,c'èil rischiochetalecara�eris�cavengatrasferitaancheaba�eripatogeni,cheintalsenso diverrebberoquindiimmuniaifarmaciconvenzionali ü AumentandolaresistenzadellespecievegetaliOGMafitofagiederbeinfestan�,c'èla possibilitàcheques�inse�epiantediven�nonocive,tramiteunmeccanismodi selezionenaturale,viaviapiùaggressiviecapacidisuperaretaliresistenze ü Laforteriduzionedellabiodiversità,conimposizionedellespecieOGMadannodialtre specieevarietà"naturali",èunodeitemipiùcaldisucuivertonoleresistenzealla diffusionedegliOGM ü PerprodurreunorganismoOGMoccorronoingen�inves�men�,chehannodifa�o resol'interose�oremonopoliodipochissimemul�nazionali.Essendoquestedelle a�vitàguidateprimaditu�odalprofi�o,vièilrischioconcretocheilbenecomunenon siaalcentrodell'a�enzionedeiricercatori;adesempio,creandospecieOGMsterili,le industrieobbliganodifa�ogliagricoltoriarifornirsidisemen�dallestesseindustrie detentricideibreve� 12 6 10/12/16 GliOGMvengonoo�enu�grazieatecnichediingegneriagene�ca,che perme�onodiinserireall'internodiunorganismo,frammen�diDNA provenien�daaltri.Ilnuovoindividuoverràde�otransgenicoeilDNA cosìo�enutoverràdefinitoricombinante. Introduzionedire�a,inunorganismo,dimaterialeereditabilepreparatoalsuo esterno; Tecnichedifusioneodiibridazione,cheperme�onolacostruzionedicellule vive,contenen�nuovecombinazionidimaterialegene�coereditabile,mediante lafusionedipiùcellule; TecnichediDNAricombinante,chemediantel'usodiunve�ore, consentonolasintesidinuovecombinazionidiDNAeilloroinserimentoinun organismoospite,nelqualepossonoreplicarsiinmodocon�nuo. Gliospi�perilmantenimentoel'amplificazionesono,ingenere,iba�eri,poichéfacilmente manipolabiliedisponibiliinelevatequan�tà. 13 14 7 10/12/16 LemolecolediDNAvengonotagliateinpiccoliframmen�daglienzimidirestrizione, capacidiesercitareuntaglioincorrispondenzadispecifichesequenzedibasi, sequenzediriconoscimento,diverseperciascunenzima. Glienzimipiùu�lizza�riconoscono sequenzepalindromichediDNA, dellalunghezzadi4-8bp. Itagligenerano frammen�con estremitàasingolo filamento,de�e “appiccicose”o “coesive”. 15 Iplasmiditrasportanoisegmen�diDNAdaamplificareall'internodellecellule ba�eriche MolecolediDNAcircolare,extra-cromosomiche,adoppiofilamento; Sonocapacidireplicarsiautonomamenterispe�oalDNAba�erico; Sonoportatoridigenichearrecanounvantaggioall'ospite(resistenzaagli an�bio�ci); Possonocontenerefinoa10Kbedesserepresen�finoa200/250copieper 16 cellula. 8 10/12/16 L'originedireplicazionedeve Esserericonosciutanellacellula Ospite,inmodocheilve�ore VengareplicatoinsiemealDNA Cheporta. Necessitadiunsingolositodi taglioperunoopiùenzimidi restrizione Devepossederemarcatoriselezionabili checonsentonoallecellulecontenen�il ve�ore diessereiden�ficateeselezionate. 17 18 9 10/12/16 Possonoessereu�lizza�comeospi�diclonaggio: 19 Introduzionedelve�orenellecelluleospi� Medianteprocessinaturali: Trasformazione:iprocario�sonoingradodiricevereDNAesternoingradodiprodurrenuove cara�eris�chenelfeno�po; Coniugazioneba�erica:ilDNAvienetrasferitodaunacellulaall'altraa�raversoilpilum; Trasduzione:inserimentodelmaterialegene�conelba�eriomediantevirus. Mediantemetodifisiciochimici: Ele�roporazione Tra�amentoconCaCl2 “Genegun” Microiniezione 20 10 10/12/16 Sio�erràla replicazionedel ve�oreedelgene isolatoalsuointerno contestualmenteal processodidivisione cellulare,originando cloni. Ognicellulaconterrà allafinealmenouna copiadelgene.Le cellulesono ricombinan�. 21 Laselezioneavvienegrazieamarcatoriselezionabili Ba�erivuo� Ba�ericontenen�ilve�ore Ba�ericontenen�ilve�oreel'inserto(ba�eriricombinan�) PRIMASELEZIONE:siinseriscenelplasmideungeneperlaresistenzaadun an�bio�co(AMP).Soloiba�erichecontengonoilplasmidepossonocrescerein unacolturachecon�enel'an�bio�co. SECONDASELEZIONE:u�lizzodell'operoneLaceSAGGIOCROMOGENICO. L'operoneLacèun'unitàpresenteneiba�ericheperme�eilmetabolismodel la�osio.Inassenzadiquest'ul�mol'operonesaràina�vatodaunrepressore. Qualoravengaaggiuntola�osioilrepressorevienerimossoel'operone,a�vo, trascrive. 22 11 10/12/16 23 LatecnologiadelDNAricombinantehaunenormeimpa�osull'industriaalimentareefarmaceu�ca esullamedicinaumana.Imicroorganismigene�camentemodifica�sonoampiamenteu�lizza�per: Laricercabiochimicaocellulareelostudio/diagnosidimala�e Produzionedifarmaci,vaccini,enzimialimentari Iba�erigene�camentemodifica�sisonospessodimostra�gliorganismimiglioripersinte�zzare unprodo�oproteico(masiu�lizzanoanchecelluleeucariotecomelievi�ocolturedicellule vegetalieanimali). Insulina GH 24 12 10/12/16 INGEGNERIAGENETICAAPPLICATAAGLIANIMALI Èpossibilesolosedell'animaledisponiamodiunacellulauovofecondataodelleduecelluleembrionali aiprimistadidisviluppodellozigote. Microiniezionediuovafecondate:vieneinie�atounframmentodiDNAcontenenteil genedesideratoinunuovoappenafecondato,tramiteunamicropipe�a.Avvenutoil trasferimento,lozigoteingegnerizzatovieneimpiantatoinunamadresos�tu�vache porteràaterminelagestazione.Questatecnicaèstataapplicataperprodurree breve�areilcosidde�o“oncotopo”. Sos�tuzionedigeninellecellulestaminaliembrionali(ESC):iltransgenevienemanipolatoinprecedenza epoiinseritoinunve�orechecon�enegeniperlaresistenzaadunan�bio�co,cosìdafacilitarela selezionedellecelluletrasformateafineprocedura.Ilve�orevieneintrodo�onelleESC,chedanno origineadunapopolazioneclonale.Lecelluleinfine,vengonoinie�ateinembrioniditopochevengono impiantateinmadrisos�tu�ve. TopiKO:topiincuièstatoina�vatoungene.ItopiKOvengonousa�comemodelliperlemala�e umanedalmomentocheigenomiditopoeuomosonosimiliperoltrel'80%. 25 NORMATIVA EUROPEA 26 13 10/12/16 DIRETTIVA 90/219/CEE Emanatail23aprile1990,compostada23ar�colie5allega� Scopoprincipale:limitazionedell’usoimpropriodegliOGM Inpar�colare: 1. ObbligodiclassificazionedegliOGMinduecategorie 2. Obbligo per gli impian� specifici di a�uazione di misure di sicurezza e prevenzionedeirischiperilcontenimentodipotenzialiinciden� 3. Obbligodirichiestadiautorizzazioneperlosvolgimentodellea�vitàalle autoritàcompeten� 4. Obbligo,incasodiincidente,dino�ficadapartedellostatomembroe obbligo di compilazione di un registro de�agliato da parte della Commissione 27 DIRETTIVE DEGLI ANNI SEGUENTI 1. 2. 3. 4. Dire�va91/448/CEEdellaCommissione,29luglio1991 Dire�va94/51/CEdellaCommissione,7novembre1994 Dire�va96/134/CEdellaCommissione,16gennaio1996 Dire�va98/81/CEdellaCommissione,26o�obre1998 28 14 10/12/16 Modificheapportate: 1. Procedureamministra�vesemplificate 2. Correlazionetragliobblighidino�ficaeirischidegliimpieghi 3. CreazionediunelencodiOGMsicuri 4. Obbligo, per gli Sta� membri, di inviare una relazione alla Commissioneogni3annisull’esperienzafa�a 5. Obbligo,perlaCommissione,dipresentareunarelazionesuquella inviatadagliSta�membri 29 In par�colare, per ogni Stato membro la Commissione deve verificare: 1. Impian�eda�vità 2. Potenzialirischi 3. Sistemidino�ficaeautorizzazioni 4. Inciden�avvenu� 5. Problemidiinterpretazionedelladire�va 6. Sistemiinforma�vipubblici 7. Pianidiinterventoperemergenzeeinciden� 8. Tuteladelleinformazioniriservate 9. Smal�mentodeirifiu� 30 15 10/12/16 ULTERIORI MODIFICHE DELLA DIRETTIVA 90/219/CEE Dire�va2000/608/CEdellaCommissione,27se�embre2000 Dire�va 2001/18/CE del Consiglio, 8 marzo 2001: stabilisce i criteri perlasicurezzaumanaeambientaledegliOGM 31 PROPOSTA DI REGOLAMENTO DEL PARLAMENTO EUROPEO E DEL CONSIGLIO SUI MOVIMENTI TRANSFRONTALIERI DEGLI OGM PresentatadallaCommissioneepubblicatanellaGazze�aUfficialec. 151del25giugno2002 Talepropostamiraastabilireunsistemadino�ficheediscambiodi informazionirela�veagliOGMversoPaesiterzi,affinchéimovimen� transfrontalieriditaliorganismiavvenganonelrispe�odell’ambiente edellasaluteumana 32 16 10/12/16 Disposizionicomuni: 1. Elencoditu�eleinformazionidacomunicare,siapergliSta�membri, siaperlaCommissione,secondoilProtocollodiCartagena 2. Obbligo, per Sta� membri e Commissione, di designare en�tà per la comunicazione dire�a con il segretariato del protocollo e autorità competen� 3. Incasodiesportazione,obbligoperloStatoesportatoredidis�nguere gli OGM des�na� all’alimentazione umana o animale, o a trasformazione,daquellides�na�adessereemessinell’ambiente,con tantodino�ficadainviarealloStatoimportatore,chedovràrispondere entro 270 giorni. Lo Stato esportatore poi ha l’obbligo di inviare una copiadellano�ficaedellaricevutadiritornoall’autoritàcompetentee allaCommissione,garantendolasicurezzadegliOGMesporta� 4. Incasodiinciden�,obbligodiinformazioneglobale,dapartedegliSta� membrichenesonoaconoscenza,perado�arelemisuredisicurezza 33 … e in Italia?! 34 17 10/12/16 NORMATIVA ITALIANA 35 1) Governo G. Amato Tenta�vo di bloccare l’introduzione di mais OGM nel territorio nazionale,senzaa�estatapericolositàdiques�organismisullasalute umanaeambientale AlfonsoPecoraroScanio:MinistrodellePoli�cheAgricoleeForestali (25 aprile 2000- 11 giugno 2001), cerca di bloccare la sperimentazionenelcampoOGM 36 18 10/12/16 2) Governo Alemanno Con�nuo divieto di sperimentazione sugli OGM da parte del MinisterodellePoli�cheAgricoleeForestali 37 3) Decreto legisla�vo 224/03 Emanatol’8luglio2003 Prevedel’a�uazionedelladire�va2001/18/CE Contaledecreto,sihailpermessodisperimentazioneestesoatu� gliambi�diricerca CriterioperlalegalitàdegliOGM:qualsiasi�podisemiu�lizzatoperi mangimi animali o per le col�vazioni che presen� una quan�tà inferioreallo0,049%diOGMrisultalegale Svolta! 38 19 10/12/16 Regolamentoeuropeo1829/2003/CE Regolamentoeuropeo1830/2003/CE Trasforma�inleggeitalianasolonel2004! Essi: 1. Regolamentanol’e�che�aturadegliOGM 2. Ribadiscono la soglia massima dello 0.5% di OGM nei mangimi animali, mentre per i prodo� ad uso alimentare la soglia massima di OGM è dello 0.9% 3. Obbligano ogni Regione ad aderire ad un piano di controllo nazionale e a stabilire un piano locale conforme sia a quello nazionale, sia a quello 39 comunitario SITUAZIONE ATTUALE La ricerca scien�fica e le sperimentazioni sugli OGM sono legali, ma mol� mangimi animali provengono da Paesi in cui l’uso degli OGM nonèmoltoregolamentato.. Polemicheeaccuse,sopra�u�oneicasidiemergenzesanitarie ricollegateamangimiOGM 40 20 10/12/16 Esempi sono: influenza A(H1N1), influenza aviaria ed Encefalopa�a Spongiforme Bovina (BSE, Morbo dellamuccapazza). Per questo, dal 1999 un Decreto del Presidente della Repubblica impone il divieto di usare OGM per produrre alimen� rivol� a gestan�,neona�ebambini. 41 IN CONCLUSIONE… L’uso di OGM è legale, nei limi� consen�� dalla legge, senza il bisognodicreareunaguerrainfondata Laricercastalavorandomoltosullabiosicurezza,peroffriregaranzie aiconsumatori È stato fondato un Comitato per confrontare e coordinare tu�e le diverseposizioni,suquestoargomento,deivarien�interessa� Grazie alle e�che�e obbligatorie che indicano la presenza di OGM neglialimen�,ilconsumatorehamaggioriinformazioniedètutelato, potendodecidereseconsumaretalialimen�omeno 42 21 10/12/16 GRAZIE PER L’ATTENZIONE! 43 22