Ethan Frome - Accademia di qualitologia

AO Salvini
Istruzioni Operative
per la determinazione dei
Marcatori Cardiaci
Dipartimento di Patologia Clinica
IST:SMeL.B. 16
Rev 0
Servizio di Laboratorio Analisi
Bollate
MARCATORI CARDIACI
Mioglobina
Troponina I
CK-MB massa
0 Premessa
Metodo fluorimetrico per la determinazione della Mioglobina, Troponina I, CK-MB massa.
Dosaggio sandwich a due siti basato su una tecnica immunoenzimatica su fase solida.
In questa procedura l' anticorpo monoclonale legato a dendrimeri viene dispensato nella
porzione centrale della card; quando il campione viene aggiunto sulla striscia reagisce con
l'anticorpo immobilizzato.
Dopo una breve incubazione nella zona di reazione viene dispensato il coniugato
costituito da un anticorpo monoclonale marcato con enzima, diretto verso un secondo
distinto sito antigenico del marcatore cardiaco da determinare. Durante questa seconda
incubazione si forma un sandwich Ab-Ag-Ab marcato; l'anticorpo marcato non legato viene
eluito dalla zona di reazione mediante l'aggiunta di una soluzione di lavaggio/substrato al
centro della zona di reazione, contemporaneamente inizia anche la reazione enzimatica.
Questa è direttamente proporzionale alla concentrazione del marcatore nel campione.
L'attività viene letta da un sistema ottico di lettura della fluorescenza di superficie.
Il sistema è sottoposto a Controllo di Qualità Interno ed Esterno.
Preparato :
L. Arcangeli
L. Re
A. D'Alessio
Data : 19/06/01
Verificato/Approvato
L. Arcangeli
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1 Scopo e campo di applicazione
Le presenti Istruzioni Operative hanno lo scopo di illustrare le modalità operative ed i criteri
stabiliti per gestire la determinazione dei Marcatori Cardiaci in premessa. Esse, pertanto,
sono destinate a tutto il personale dell’Unità.
2 Descrizione delle attività
Il test viene eseguito su campione di plasma contenente Li o Na eparina; può essere
utilizzato sia il tubo primario, sia 500 uL di plasma centrifugato e separato nelle apposite
coppette.
Strumento utilizzato : Stratus CS
Kit utilizzato
: * MYO TestPak
* cTnI TestPak
* CKMB TestPak
Ditta
: Dade
Campione
: provetta tappo verde cod. 367684 (5 mL)
FASE PREANALITICA
Lo strumento deve rimanere sempre acceso.
- le luci rosse a dx indicano allarmi che devono essere eliminati per poter procedere.
- il display indica sempre i tempi di attesa.
- Agitare e riportare a T° ambiente tutte le card prima dell'uso
 Controllo del Sistema : F3 "Cambia modo"
eseguire una volta al dì
posizionarsi con le frecce "< >" su "Modo Controllo Sistema"  F4 accetta
eliminare eventuali allarmi; quando il tasto START diventa verde premerlo.
Lo strumento esegue Check automatici (circa 5 minuti)
- ritorna in "Modo Paziente"
N.B. : Conservare il biglietto di stampa attestante l'avvenuto controllo nella apposita
cartelletta e compilare la Tabella
"Data Controlli"
apponendo la data e la firma
dell'operatore
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 Calibrazione : F3 "Cambia modo"
Stabile per due mesi a partire dal lotto nuovo
posizionarsi con le frecce "< >" su Modo Calibrazione  F4
seguire le indicazioni sul display :
- aprire le confezioni monouso ( 1 Cal Pak * + 3 Test Pak) e disporre i pak con la freccia
rivolta verso lo strumento
- chiudere lo sportello del campione  START (circa 25 minuti)
- ritorna in "Modo Paziente"
* la CalPak della Troponina è conservata a -20°C.
N.B. : Conservare il biglietto di stampa attestante l'avvenuta calibrazione nella apposita cartelletta e
compilare la Tabella "Data Calibrazioni" apponendo la data e la firma dell'operatore.
Possono rimanere on-board 3 lotti diversi di calibrazioni per ogni analita.
FASE ANALITICA
Vedi anche Metodiche specifiche allegate.
1. Il campione può essere processato in due modi :

Direttamente da tubo primario :
- Porre il rotore di centrifuga nell'invito porta-rotore
- Porre la provetta nella cannula
- Porre la cannula all'interno dell'alloggiamento dietro lo sportello
- Chiudere lo sportello.

Centrifugare il campione, versare 500 uL di plasma nella coppetta che va poi posta
nell'apposito invito per campioni nell'alloggiamento centrale
2. Posizionare il TestPak da eseguire, con la freccia rivolta verso lo strumento
3. Digitare ID Paziente

enter
4. Digitare ID Operatore

enter

START
Dopo circa 15 minuti viene stampato l' esito.
N.B. Se il valore supera la linearità del metodo lo strumento stampa "Superiore al range…." NON diluire il
plasma con fisiologica ma utilizzare lo specifico DilPak insieme al TestPak : lo strumento esegue in
automatico una diluizione 1:5 e moltiplica direttamente il risultato.
Alta lettura di fluorescenza : diluire il plasma con fisiologica almeno 1:10 e ripetere il test
5. Allegare la stampa del risultato alla richiesta dell'urgenza.
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VARIE
Valori
Riferimento :
Linearità :
Unità di
misura :

Mioglobina
< 82
Fino a 900
ng/mL

Troponina I
< 0.1
Fino a 50
ng/mL

CK-MB massa
< 3.5
Fino a 150
ng/mL
Allarmi più comuni :
Tips
Mancano i puntali
Trays
Manca scatoletta porta puntali
Alarm
Evidenzia Codice di Errore: consultare il Manuale
Waste
Eliminare vaschetta di scarico, piena
Nel caso qualcosa rimanesse incastrato : -
aprire sportello di scarico
con un oggetto appuntito premere sulla freccia 
sollevare la parte anteriore dello strumento
togliere eventuali oggetti ostruenti
Per ulteriori allarmi consultare il Manuale Tecnico
Ristampa Copia Referto :

F4 Menù

F3 Dati

F1 Stampa
Compare : "Stampa Ultimi …" : indicare il n° del paziente o degli ultimi pazienti desiderati
(da 1 a 20)  F1 Stampa
Verifica SCADENZA delle Calibrazioni :


F2 Stato Reagenti 
EXIT per uscire
F4 Metodica Seguente : è possibile scegliere la metodica
Manutenzione :
Vedi copia Manuale allegata.
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"DATA CONTROLLI del SISTEMA"
Mese di …………………………
Data
Firma Operatore
N.B. Allegare stampato
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Troponina I
Data e firma Operatore
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"DATA CALIBRAZIONI"
Anno …………………………
Mioglobina
Data e firma Operatore
CK-MB massa
Data e firma Operatore
Apporre DATA e FIRMA dell'Operatore nella casella relativa allo specifico analita calibrato
N.B. Allegare stampato
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Tabella Controllo di Qualità BioRad
Livello 1
Data / firma
dell'operatore
Livello 3
Lotto……………/ Scad……………
Val. atteso :
- Tropo
- Myo
- CK-MB m
(Eseguire il Lunedì e Giovedì)
Lotto……………/ Scad………………
Val. atteso :
- Tropo
- Myo
- CK-MB m
(Eseguire il Lunedì e Giovedì)
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
CK-MB
Tropo
Myo
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