Acromegalia nell’antico Egitto Deficit di ormone della crescita Il gozzo Esoftalmo Concetto tradizionale di sostanza ormonale Ghiandola Circolo Bersaglio Ampliamento del concetto tradizionale di sostanza ormonale ormoni, fattori di crescita, messaggeri Tipi di azione ormonale • Endocrina • Paracrina • Autocrina PNEI ? psico neuro endocrino immunologia psico-neuro-endocrino-immunologia (PNEI) Classi di ormoni • struttura peptidica –ormoni peptidici e proteici –catecolamine –fattori di crescita • struttura steroidea –steroidi –vitamina D –ormoni tiroidei Ormoni steroidei • lipofilia • forte legame con proteine vettrici • interazione con recettori nucleari e citoplasmatici • controllo della sintesi di enzimi che regolano il metabolismo cellulare • secrezione di proteine (ovalbumina) Ormoni tiroidei • lipofilia • forte legame con proteine plasmatiche • interazione con recettori nucleari o citoplasmatici e controllo dell’attività biosintetica e metabolica azioni per molti versi analoghe a quelle degli steroidi Ormoni peptidici • • • • Idrofilia debole legame con proteine vettrici interazione con recettori di membrana mantenimento della differenziazione e funzione cellulare • azione sui processi metabolici cellulari Azioni ormonali in generale ormoni steroidei e tiroidei – eventi nucleari ormoni peptidici – modulazione di effetti citoplasmatici e di membrana Interazione ormone - proteina legante H proteina legante H proteina legante Interazione ormone - recettore H Recettore Segn. H Recettore Segn. Sequenza dell’azione ormonale >secrezione >circolazione >interazione recettoriale >trasmissione del messaggio >azione ormonale organizzazione gerarchica releasing hormone Tropina ipofisaria feed-back mechanism CRH - + ACTH - Hypothalamus Pituitary + cortisol Adrenal cortex ipotalamo CRH TRH GnRH GRH SRIF PIF (dopamina) ipofisi ACTH TSH FSH LH GH PRL ghiandole bersaglio releasing hormones • TRH • GnRH • CRH • GHRH TSH FSH LH ACTH GH PRL Meccanismi generali di attivazione della cellula bersaglio • recettori di membrana Citoplasma Nucleo cAMP fosforilazione Ca++ Regolazione enzimatica Meccanismi generali di attivazione della cellula bersaglio • recettori intracellulari Citoplasma Nucleo mRNA Risposta Proteina trasmissione del messaggio ormone recettore proteina regolatrice adenilato ciclasi trasmettere il messaggio e produrre un evento Ricezione del messaggio Detector Arrivo del messaggio Switch Innesco dell’evento Generator Durata dell’evento Timer Anatomia delle proteine G Ns Rs Detector s GTP localizzato nell’estremità carbossi terminale della subunità Anatomia delle proteine G Rs Ns s GTP Switch Anatomia delle proteine G Rs Ns s GTP Generator Anatomia delle proteine G Rs Ns s GTP Timer GDP principi generali di radioimmunologia • massima specificità ottenuta con reattivi biologici: anticorpi • massima sensibilità ottenuta con reattivi radioattivi AG AB AG* principi generali di radioimmunologia dosaggio in eccesso o in difetto di anticorpi dosaggio immunoradiometrico (IRMA) (tipo sandwitch in fase solida) Diagnostica genetica in endocrinologia • Neoplasie Endocrine Multiple tipo 2, ca. midollare familiare (mutazioni germinali del gene RET) • Neoplasie Endocrine Multiple tipo 1 (Mutazioni germinali della M ENINA ) • Oligo-azoospermie (microdelezioni del cromosoma Y ) • Deficit enzimatici della steroidogenesi (adrenoleucodistrofia, 21 idrossilasi, ecc…) • Ipotiroidismo congenito (mutazioni di PAX8) • Follow-up carcinoma differenziato della tiroide (mRNA da sangue periferico) Gene RET e tecniche di identificazione delle mutazioni Gene RET Sequenza automatica Sequenza manuale Analisi con enzimi di restrizione C T G>A C T C Dosaggio della Tg da sangue e/o linfonodi linfonodi sangue Estrazione RNA Sintesi cDNA Amplificazione con PCR Analisi per Tg su gel Terapia genica in endocrinologia Iperfunzione Ipofunzione • correzione dei geni • attivazione geni con promoter tessuto specifici • oligonucleotidi antisenso • correzione dei geni Patologie Endocrine Neoplasie • geni “suicidi” • correzione dei geni • immunoterapia Malattie autoimmuni • immunomodulazione Terapia genica nel carcinoma anaplastico della tiroide Prima del trattamento Dopo ciclo di terapia genica