REALQUALITY REALQUALITY RQ-IL28B rs8099917 Cod. RQ-91 Kit per l'identificazione e la genotipizzazione del polimorfismo rs8099917 nel gene umano codificante per l’Interleuchina 28B mediante PCR Real time Controlli positivi: DNA contenenti parte della sequenza di interesse IL28B omozigote T/T, eterozigote T/G e omozigote G/G per il polimorfismo in esame Piattaforme compatibili: Validato su Applied Biosystems 7500 Fast/Fast Dx, 7300 e StepOne/StepOnePlus Real-Time PCR System (Applied Biosystems) Dx Real-Time System e CFX96 Real-Time PCR Detection System (Bio-Rad) Risulta impiegabile su strumenti in grado di utilizzare un volume di reazione di 25 µL e di rilevare adeguatamente la fluorescenza dei fluorofori FAM e JOE. Specificità Analitica: assenza aspecifici di primer e probe INTRODUZIONE L'epatite C è una malattia infettiva, causata dall'Hepatitis C Virus (HCV), che colpisce in primo luogo il fegato. L'infezione è spesso asintomatica, ma la sua cronicizzazione può condurre alla cicatrizzazione del fegato e, infine, alla cirrosi, che risulta generalmente evidente dopo molti anni. In alcuni casi, la cirrosi epatica potrà portare a sviluppare insufficienza epatica, cancro del fegato, varici esofagee e gastriche. La terapia di riferimento per HCV è costituita dall’utilizzo combinato di Interferone pegilato (Peg-IFN) e Ribavirina (RBV) (EMEA, 2011). Molteplici studi hanno dimostrato che la risposta a tale trattamento farmacologico è influenzata sia dal genotipo virale che dalla variabilità genetica dell’ospite. In particolare si sono rivelati estremamente informativi alcuni polimorfismi del gene codificante per l’Interleuchina 28B (IL28B). Il gene IL28B è localizzato nel cromosoma 19 e codifica per la proteina INF-λ3, implicata nella risposta immunitaria contro HCV. I due polimorfismi rs12979860 e rs8099917 sono risultati correlati con un’aumentata remissione virale sostenuta in pazienti con infezione da HCV di genotipo 1. Nello specifico, per quanto riguarda il polimorfismo rs8099917, determinato da un cambiamento nucleotidico T>G nella sequenza del promotore a monte del gene che codifica per IL28B, è stato riportato che pazienti con genotipo TT rispondono molto più efficacemente alla terapia antivirale rispetto a quanto non avvenga in pazienti eterozigoti TG o omozigoti GG. La tecnica Real time PCR consente un’identificazione precisa, rapida e sensibile di questo polimorfismo. di appaiamenti Sensibilità/Specificità Diagnostica: 99,33% Sensibilità Analitica: 2 ng DNA/reazione Figura 1. Scatter Plot visualizzato su Applied Biosystems 7300 RealTime PCR System con SDS software INFORMAZIONI PER GLI ORDINI Cod. # Prodotto Formato RQ-91-48/96 REALQUALITY RQ-IL28B rs8099917 48/96 test BIBLIOGRAFIA Aparicio E et al. Plos One 5 (10), 1-5, 2010 EMEA, Guideline on clinical evaluation of medicinal products for the treatment of chronic hepatitis C, 2011 Ge D et al. Nature 461 (7262), 399-401, 2009 Ito K et al. J Clin Microbiol 49 (5), 1853-1860, 2011 CARATTERISTICHE TECNICHE Numero di test: 48 o 96 test Stabilita’: 12 mesi Materiale di partenza: DNA estratto da sangue intero periferico e pellet linfocitario Melis R et al. J Mol Diagn 13 (4), 446-451, 2011 Rauch A et al. Gastroenterology 138 (4),1338–1345, 2010 Suppiah V et al. Nat Genet 41 (10), 1100-4, 2009 Tanaka Y et al. Nat Genet 41 (10), 1105-1109, 2009 Thomas DL et al. Nature 461(7265), 798-801, 2009 Thompson AJ et al. Gastroenterology 139 (1), 120–129, 2010 RQ-IL28B_rs8099917_techleaf_i20131219 AB ANALITICA srl Via Svizzera 16 – 35127 PADOVA (ITALY) tel. +39 049 761698 - Fax +39 049 8709510 e-mail: [email protected] www. abanalitica.it