IL28B-ITPA TYPE

IL28B-ITPA TYPE
Cod. 04-47A
Kit per l’identificazione simultanea di
polimorfismi nei geni IL28B e ITPA mediante
Ibridazione Inversa Allele Specifica (Reverse
Line Blot)
Sovrapponendo alla strip ottenuta il lucido interpretativo è
possibile determinare in modo semplice e veloce i
polimorfismi eventualmente presenti.
CARATTERISTICHE TECNICHE
NUMERO DI TEST: 20 test
STABILITA’: 6 mesi
INTRODUZIONE
Il Hepatitis C Virus (HCV) causa un’infezione cronica che
può evolvere in epatite cronica, in cirrosi epatica o in
carcinoma epatocellulare.
Il trattamento standard attualmente raccomandato è
rappresentato da Peg-Interferone-alfa-2a (PEG- INF) e
ribavirina (RBV) per 24-48 settimane, tuttavia, tale regime è
ben tollerato ed efficace solo nel 60% dei soggetti, mentre il
40% dei pazienti con genotipo 1 del virus non riesce ad
ottenere una risposta virologica sostenuta (SVR).
In letteratura sono stati presentati diversi studi che correlano
l’efficacia della terapia oltre che a fattori virali anche a fattori
genetici legati all’ospite. Rilevanti risultano essere dei
polimorifsmi nella regione del gene IL28B (Interleuchina 28).
Numerosi studi hanno riportato che individui omozigoti WT
per i polimorifsmi rs8099917 e rs12979860 nel gene IL28B
rispondono più efficacemente alla terapia (raggiungimento
della SVR); inoltre, recentemente si è visto che gli omozigoti
WT per altri due polimorfismi nel gene ITPA (Inosina
Trifosfatasi) presentano un maggior rischio di sviluppare
un’anemia emolitica cronica in seguito a trattamento con
Ribavirina.
Risulta pertanto importante, ai fine della gestione clinica dei
pazienti con epatite C, conoscere a priori lo stato genetico
del paziente al fine di scegliere una terapia il più efficace e
mirata possibile.
MATERIALE DI PARTENZA: DNA estratto
AMPLIFICAZIONE: Premix monodose pronte all’uso.
POLIMORIFSMI IDENTIFICATI:
rs12979860 C>T nel gene IL28B
rs8099917 T>G nel gene IL28B
rs7270101 A>C nel gene ITPA
rs1127354 C>A nel gene ITPA
TEMPO DI ESECUZIONE: 3,5 ore
PROCEDURA
1. AMPLIFICAZIONE DEL DNA: amplificazione multiplex
premix, circa 2h e 30 minuti.
2. DEN. DELL’AMPLIFICATO: incubazione 5 min. a
temperatura ambiente con soluzione di denaturazione;
3. IBRIDAZIONE e LAVAGGI: 60 minuti.
4. RIVELAZIONE COLORIMETRICA: 20 min mediante
incubazione con i cromogeni (NBT/BCIP).
PRINCIPIO DEL TEST
Il kit IL28B-ITPA TYPE permette l’identificazione delle
varianti genetiche associate alla variabilità inter-individuale
nella riposta alla terapia con Interferone (IFN) e Ribavirina
(RBV) in pazienti con Epatite C cronica. In particolare
vengono indagate mediante amplificazione genica e
successiva ibridazione inversa allele specifica i polimorifsmi:
rs8099917 e rs12979860 nel gene IL28B e i polimorifsmi
rs1127354 e rs7270101 nel gene ITPA.
Controllo di colorazione
IL28B rs12979860 C
IL28B rs12979860 T
IL28B rs8099917 T
IL28B rs8099917 G
ITPA rs7270101 A
ITPA rs7270101 C
ITPA rs1127354 C
ITPA rs1127354 A
REFERENZE
Ge D, Fellay J, Thompson AJ et al.. Nature 2009;
461(7262): 399-401
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MJ
et
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Blood.
2010
Meinkoth, J. and Wahl, G. et al., In Analytical
Biochemistry, 138: 267, 1984.
Rauch A, Kutalik Z et al., Gastroenterology. 2010
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Suppiah V, Moldovan M et al., Nature Genetics 2009;
41: 1100-4
SCH TEC IL28 R030512
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May