La chimica dei principi nutritivi idee di base Appunti ridotti all’ per gli allievi della 4A 1 La chimica dei principi nutritivi Gli alimenti apportano agli animali le sostanze nutritive di cui questi hanno bisogno. Un unico alimento è generalmente incapace di far fronte, da solo, all’insieme dei fabbisogni animali. E’ per questo che in ogni razione occorre associare vari alimenti. Tutti gli alimenti sono formati dalle stesse sostanze: acqua, minerali, glucidi (o carboidrati), lipidi, sostanze azotate. ACQUA Macroelementi Cloro, fosforo, zolfo, calcio, sodio, potassio, magnesio Microelementi Ferro, rame, zinco, cobalto, manganese, iodio, selenio… citoplasmatici Pentosi Esosi Disaccaridi Fruttosani Amido parietali dei vegetali Cellulosa Emicellulosa Sostanze pectiche Lignina SOSTANZA ORGANICA SOSTANZA SECCA TAL QUALE CENERI glucidi lipidi protidi Sostanze azotate non protidi Gliceridi Steroidi Cere Aminoacidi liberi Peptidi Polipeptidi Proteine Ammidi (urea…) Ammine Ammoniaca Basi azotate La massa dell’alimento “così com’è” viene anche definita “tal quale”. Essiccando l’alimento, otteniamo un residuo secco chiamato sostanza secca (s.s.). Perciò umidità = massa prima dell’essiccazione (tal quale) - s.s. La sostanza secca, sottoposta ad incenerimento a 550°C, lascia un residuo minerale chiamato “ceneri”. La massa scomparsa durante l’incenerimento è chiamata sostanza organica (s.o.). Si calcola così: s.o. = s.s. – ceneri La sostanza organica è formata da glucidi, lipidi e sostanze azotate. 2 La chimica dei principi nutritivi 1. Glucidi I glucidi, o carboidrati, sono molecole presenti sia nei vegetali sia negli animali. Hanno numerose e importanti funzioni vitali. Le funzioni dei glucidi sono le seguenti: • danno energia immediata (glucosio, fruttosio..) • formano tessuti in grado di assicurare struttura ad animali e vegetali (chitina, cellulosa) • danno energia a più lenta cessione (amido e glicogeno). I glucidi sono detti anche carboidrati perché la formula chimica di molte molecole appartenenti a questo gruppo può essere espressa come idrato di carbonio (CH2O)n, con n≥3. Per esempio, il glucosio ha formula C6H12O6. I carboidrati sono classificati in base alla loro struttura: Monosaccaridi e disaccaridi sono noti anche col nome di “zuccheri” per il loro sapore dolce. Sulla base della loro complessità molecolare, distinguiamo tra 3 La chimica dei principi nutritivi • monosaccaridi, composti da una sola molecola, come ad esempio glucosio, fruttosio, mannosio, galattosio; • disaccaridi, composti da due monosaccaridi legati tra di loro con eliminazione di una molecola d’acqua (legame glicosidico); sono disaccaridi, ad esempio, maltosio, cellobiosio, lattosio, saccarosio; • polisaccaridi, formati da molte molecole legate insieme. Possono essere omopolisaccaridi se sono composti dalla stessa molecola che si ripete, come ad esempio amido, glicogeno, cellulosa; eteropolisaccaridi se nella loro composizione entrano molecole diverse. Monosaccaridi Osserviamo la struttura di due zuccheri tra i più semplici: la gliceraldeide e il diidrossiacetone. Notiamo tre atomi di carbonio, tre di ossigeno, sei di idrogeno: C 3H6O3. Entrambe le molecole hanno la stessa formula molecolare, ma è diversa la loro formula di struttura. Qual è la differenza? Nel primo caso si tratta di un’aldeide; nel secondo caso, si tratta di un chetone. Sono due isomeri. I monosaccaridi dunque possono essere distinti in due gruppi: aldosi e chetosi. 4 La chimica dei principi nutritivi Il glucosio, ad esempio, è un aldoso, perché contiene un gruppo aldeidico; il fruttosio, invece, è un chetoso, perché ha il gruppo chetonico. Altre differenze dipendono dalla posizione dei gruppi ossidrilici (-OH), che possono trovarsi disposti in modo diverso intorno al carbonio. In realtà, in natura, esistono solo poche combinazioni di questo tipo. Se osserviamo la posizione dell’ossidrile sul penultimo atomo di carbonio, notiamo che esso può trovarsi a destra o a sinistra. Nel primo caso viene attribuita la lettera D (destro), nel secondo caso la lettera L (levo, cioè sinistro). Le formule di struttura usate sono quelle di Fisher, semplici ma non reali. Data la conformazione spaziale naturale della catena carboniosa, gli zuccheri non sono MAI MOLECOLE LINEARI; sono dei semi – cicli che, reagendo fra gruppi funzionali vicini, tendono a chiudersi formando degli anelli. Data l’instabilità della molecola ciclica, questa si riapre in emiciclo generando così un equilibrio tra la forma aperta e quella chiusa. Entrambe le forme coesistono in soluzione acquosa. Il D – glucosio viene a formare un anello a 6 C e si può rappresentarlo anche semplicemente con un esagono: glucosio fruttosio Anche per il fruttosio è possibile una forma ciclica, però a pentagono. La formula ciclica è detta “di HAWORTH” ed è più reale. Formando un anello, il C in posizione 1 della catena può dare origine a due isomeri (= anomeri), che differiscono per la posizione dell’ossidrile legato: 5 La chimica dei principi nutritivi tipo α tipo β L’OH, come si vede, può trovarsi sotto o sopra il piano su cui sta l’anello. Nel primo caso è un glucosio α (alfa), nel secondo è un glucosio β (beta). La posizione del gruppo OH sarà importantissima per definire le proprietà dei carboidrati. Infine, i monosaccaridi possono essere classificati secondo il numero di atomi di carbonio che li compongono. Distinguiamo così: 3C = TRIOSI 6C = ESOSI 4C = TETROSI 7C = EPTOSI 5C = PENTOSI Ad esempio, il glucosio è un ALDOESOSO, il fruttosio un CHETOESOSO. Osserviamo ancora alcuni monosaccaridi: D – glucosio D – mannosio D glucosio e D mannosio sono isomeri che differiscono per la disposizione di un solo gruppo OH. Si dicono in questo caso EPIMERI. D glucosio e D mannosio sono epimeri in C 2. 6 La chimica dei principi nutritivi D glucosio D galattosio D glucosio e D galattosio sono EPIMERI in C 4. Disaccaridi Il maltosio è il disaccaride che si forma dall’idrolisi dell’amido e del glicogeno. Anche durante la germinazione dell’orzo si ha una progressiva demolizione della molecola dell’amido in maltosio, ad opera di enzimi del seme stesso. L’orzo che ha subito una germinazione controllata ed essiccamento successivo prende il nome di malto ed è usato per fare la birra. Dal punto di vista chimico il maltosio è fatto di due molecole di D–glucosio, unite da un legame tra carbonio in posizione 1 del primo α glucosio e carbonio 4 del secondo glucosio. Il legame è perciò detto “α 1-4”. Il cellobiosio non esiste in natura, ma si forma nel corso delle fermentazioni batteriche che avvengono nel rumine a carico della cellulosa. E’ formato da due glucosi di tipo D uniti anch’essi con legame 1-4; la differenza rispetto al maltosio sta nel fatto che il primo glucosio ha configurazione β. Il legame β 1-4 ha la caratteristica di non poter essere scisso dagli enzimi digestivi animali. Il lattosio è lo zucchero del latte ed è prodotto esclusivamente dalla ghiandola mammaria. Ha un potere dolcificante meno accentuato rispetto al saccarosio. E’ formato da una molecola di β – D galattosio, unita da un legame β 1-4 ad una molecola di D glucosio. 7 La chimica dei principi nutritivi Il lattosio viene fermentato da molti microrganismi, che possono ad esempio trasformare il lattosio in acido lattico (CH3 – CHOH – COOH) – come ad esempio avviene nello yogurt. Quando viene fortemente riscaldato (175°C) il lattosio caramellizza. Il saccarosio è formato da una molecola di α – D – glucosio e da una molecola di β – D – fruttosio, unite insieme da un legame α 1 β 2. Questo tipo di legame interessa entrambi i carboni anomerici delle due molecole, diversamente da quanto accadeva nei disaccaridi osservati fin qui. Il saccarosio è molto comune, presente in tutte le piante ma particolarmente nella canna da zucchero e nella barbabietola da zucchero. Scaldato a 160°C si trasforma nel cosiddetto zucchero d’orzo; a 200°C caramellizza. In tutti i monosaccaridi e in tutti i disaccaridi qui esaminati, ad eccezione del saccarosio, c’è sempre un punto della molecola particolarmente reattivo (gruppo aldeidico o chetonico). Tali gruppi, nei disaccaridi, restano reattivi quando il legame è di tipo 1-4; sono invece indisponibili se il legame, come appunto nel caso del saccarosio, è di tipo diverso (1-2). Gli zuccheri “reattivi” sono detti riducenti o riduttori, in quanto la loro reazione può comportare la propria ossidazione, con contemporanea riduzione di un’altra sostanza. Sono perciò riducenti tutti i monosaccaridi e tutti i disaccaridi, ad eccezione del saccarosio. La sostanza che viene utilizzata in laboratorio per verificare le proprietà riducenti di un composto zuccherino (e quindi a quantificarne e qualificarne la presenza) si chiama liquido di Fehling. Polisaccaridi L’amido, polimero dell’α-D-glucosio, è la sostanza che si forma nelle piante per accumulare glucosio a scopo di riserva. E’ presente in larga percentuale nei cereali, inclusi mais e riso, e nelle patate. E’ formato da due frazioni: amilosio e amilopectina. La prima frazione ha una struttura soprattutto lineare, data da legami prevalentemente α 1-4 tra i glucosi, con rari legami α 1-6. Si tratta di una frazione a maggiore solubilità e digeribilità. L’amilopectina ha una struttura più ramificata e complessa, dovuta alla presenza di numerosi legami α 1-6. A questa struttura altamente ramificata e complessa è dovuto il fenomeno del rigonfiamento dei granuli di amido in presenza di acqua, e della formazione di soluzioni acquose colloidali. In presenza di iodio l’amido dà una colorazione blu. 8 La chimica dei principi nutritivi Nel disegno si osserva un tratto di amilosio con legami α 1-4. Il glicogeno è un polisaccaride del glucosio a catena estremamente ramificata. Costituisce anch’esso un accumulo di glucosio a scopo di riserva, ed è specifico per gli animali ed i funghi. Poiché serve come riserva prontamente disponibile di glucosio, lo si trova in quegli organi che hanno importanti richieste di energia, come fegato e muscoli. Nei muscoli viene utilizzato anche dopo la macellazione, per tutte le trasformazioni chimiche che prendono il nome di “frollatura” e che sono indispensabili per dare una carne che risulti tenera al consumatore. La cellulosa, presente in grandi quantità nella parete dei vegetali, è un polimero del β – glucosio. Le molecole di β – glucosio che formano la cellulosa sono disposte a formare catene lineari in cui il carbonio in posizione 1 della prima molecola è legato al carbonio 4 della seconda e così via. Si parla perciò di legame β 1-4 tra le singole molecole di glucosio. Le catene sono saldate una all’altra grazie ai legami idrogeno fra i gruppi ossidrilici presenti su catene adiacenti. L’idrolisi della cellulosa avviene per opera di particolari enzimi che riconoscono il legame β 1-4. Tali enzimi, assenti negli animali, sono invece prodotti dai batteri ospitati nel rumine dei poligastrici. Grazie alla simbiosi tra batteri ruminali ed animale che li ospita, gli erbivori possono utilizzare come fonte energetica la cellulosa. Altri polisaccaridi di una certa importanza sono la chitina, sostanza che costituisce l’esoscheletro degli artropodi ed è particolarmente abbondante nei crostacei. La chitina contiene anche azoto, in quanto è il polimero di una molecola derivata da un amminozucchero, combinazione di un esoso con un gruppo amminico. E’ presente anche nei funghi e in qualche alga verde. Per la sua diffusione negli artropodi è probabilmente il polisaccaride più diffuso in natura dopo la cellulosa. 9 La chimica dei principi nutritivi La pectina è tra i componenti delle pareti delle cellule vegetali. E’ particolarmente abbondante nelle bucce di agrumi e nella polpa delle barbabietole da zucchero. Ha proprietà gelatinizzanti ed è perciò utilizzata industrialmente per la produzione di gelatine di frutta o marmellate. Le gomme sono prodotte dalle piante a scopo di proteggersi da ferite e talvolta sono prodotte normalmente dalle cortecce e dalle foglie. La “gomma arabica” si ottiene per indurimento all’aria del liquido fuoriuscito dalle incisioni praticate su varie piante (Ficus elastica, Hevea brasiliensis ecc.) ed è famosa perché la sua soluzione ha potere adesivo. Cellulosa, emicellulosa, lignina: la “fibra” dei vegetali La cellula vegetale ha come propria caratteristica il possedere una parete esterna alla membrana plasmatica. La parete cellulare è costituita da pectina, emicellulosa, cellulosa, lignina. I costituenti della parete cellulare non sono presenti nella stessa quantità in tutti i tessuti vegetali. Infatti, i tessuti che devono costituire la struttura portante della pianta (sclerenchimi) posseggono una parete molto spessa, a più strati; invece i tessuti verdi hanno pareti molto più sottili. 10 La chimica dei principi nutritivi I diversi tipi di cellule, con il loro differente contenuto di emicellulosa, cellulosa e lignina, caratterizzano le varie parti della pianta ma anche le diverse fasi di sviluppo di una stessa pianta che, mano a mano che invecchia, tende a sviluppare le parti lignificate. a – paglia di frumento; b – foglia di loiessa Nel corso delle fermentazioni batteriche, l’emicellulosa e la cellulosa vengono utilizzate dai batteri. Anche l’amido contenuto nei semi ed i glucidi solubili che si trovano nei tessuti verdi subiscono la stessa sorte. 11 La chimica dei principi nutritivi Le attività di fermentazione si svolgono in tempi e quantità molto diverse, secondo la complessità della molecola utilizzata dai batteri. Nel caso esaminato in figura, l’amido dell’orzo dimostra la caratteristica di fermentare più velocemente di quello del mais; invece è evidente che le polpe, che contengono molta 12 La chimica dei principi nutritivi emicellulosa, fermentano di più e più velocemente della crusca di frumento, che contiene relativamente più cellulosa. Ancora più lentamente e in modo incompleto fermenta la paglia di frumento, che contiene più lignina. Una volta assorbiti, il glucosio e gli acidi grassi volatili (AGV) vengono utilizzati dall’animale per il proprio metabolismo energetico, secondo lo schema seguente. 13 La chimica dei principi nutritivi Lignina La lignina non è un carboidrato, ma è in stretta relazione con i carboidrati della parete cellulare vegetale in quanto anch’essa ne fa parte. In realtà, con questo termine si indica, più che una molecola, tutto un gruppo di composti di varia struttura chimica. Resiste alle attività di digestione animale ma anche alle fermentazioni ruminali; perciò la sua presenza nei vegetali, che aumenta con l’invecchiamento della pianta, riduce la digeribilità degli alimenti. 14 La chimica dei principi nutritivi 2. Lipidi I lipidi sono sostanze organiche di elevato interesse biologico, non idrosolubili. Sono invece solubili in solventi organici come il benzolo, l’etere, il cloroformio. Ciò dipende dalla loro natura, prevalentemente idrocarburica e, perciò, apolare. Anche nel caso in cui nelle loro molecole vi siano gruppi polari, questi costituiscono una parte troppo piccola per modificare le caratteristiche dell’intera molecola. I lipidi si trovano sia nei tessuti vegetali sia in quelli animali. Hanno funzione di riserva energetica, sono componenti delle membrane biologiche, servono come trasportatori di substrati e come sostanze “impermeabilizzanti”. Nei vegetali si trovano localizzati soprattutto nei cloroplasti delle cellule, nel germe dei semi, nella cuticola delle foglie. Le piante i cui semi contengono elevate quantità di trigliceridi sono dette “oleaginose”. Per esempio. Il seme di sesamo contiene il 53% di olio; il ricino 47%; l’arachide 45%; il colza e il lino 37%; il cotone 20%; il mais solo il 4,5%. I lipidi vengono classificati come si vede nella figura: 15 La chimica dei principi nutritivi a) Gliceridi I) semplici I trigliceridi sono formati da acidi grassi (AG) e glicerolo. Gli acidi grassi possono essere diversi tra loro a seconda: • del numero di atomi di carbonio da cui sono composti: AG corti o volatili (C1 - C4); AG medi (C6 - C14); AG lunghi (C16 - C22); • del numero dei doppi legami presenti nella loro catena carboniosa, vale a dire a seconda del grado di insaturazione: gli acidi linoleico, linolenico, oleico sono, ad esempio, acidi grassi insaturi All’interno dei trigliceridi distinguiamo grassi ed oli. I grassi sono tipici del mondo animale. Sono solidi a temperatura ambiente e nella loro composizione prevalgono gli acidi grassi saturi. Gli oli, invece, sono tipici del mondo vegetale. Sono liquidi a temperatura ambiente e nella loro composizione prevalgono gli acidi grassi insaturi. A parte questo, grassi e oli hanno entrambi la stessa struttura generale e le stesse proprietà chimiche. In evidenza, notiamo il legame tipico dell’estere. Con le lettere R1, R2 e R3 vengono indicati in questo caso gli acidi grassi, formati da catene idrocarburiche sature o insature. Nel caso in cui R1 = R2 = R3 il trigliceride è definito “semplice” (ad esempio, la trioleina nell’olio) Se invece R1 ≠ R2 ≠ R3, il trigliceride è detto “misto”. La sintesi di un trigliceride (per esempio per formare il grasso del latte) avviene mediante l’esterificazione di una molecola di glicerina con tre acidi grassi; si ottiene una molecola di trigliceride e tre d’acqua. + 3 R-COOH → + 3 H2O Si realizzano così tre legami esterici (alcool + acido) sulla glicerina. Per questo motivo ci si riferisce al trigliceride anche come ad un triestere della glicerina. 16 La chimica dei principi nutritivi Un modo sintetico di rappresentare il trigliceride può essere anche questo: ovvero come una specie di forchetta con tre lunghe punte. La lunghezza delle catene carboniose dipende, naturalmente, dal tipo di acidi grassi esterificati. Nel caso in cui manchino una o più catene, si parlerà di digliceridi e monogliceridi. Gli acidi grassi insaturi (con legame C = C) presenti negli acidi grassi dei trigliceridi sono tutti in forma CIS. In seguito a trattamenti termici si possono osservare fenomeni come lo slittamento dei doppi legami e la trasformazione da cis a TRANS. Forma CIS: Forma TRANS: Per esempio, se sottoposto a surriscaldamento l’acido oleico può mantenere inalterata la posizione del doppio legame e passare a forma trans, trasformandosi in acido elaidinico; oppure può far slittare il doppio legame ai due carboni successivi, diventando acido vaccinico. L’idrolisi di un trigliceride è il processo con cui, da un trigliceride, in presenza di tre molecole d’acqua e di solito per l’azione di un enzima (lipasi), si ottengono nuovamente tre acidi grassi e un glicerolo. Questa reazione avviene normalmente durante la digestione, per azione delle lipasi pancreatica ed enterica; ma avviene anche ad opera di batteri e muffe, provocando allora un’alterazione dei grassi nota comunemente come irrancidimento idrolitico o lipolitico. La maggior parte degli acidi grassi che si distacca è inodore e insapore, ma in alcuni casi si liberano invece acidi grassi dal sapore e odore sgradevoli, che rendono il grasso, nel caso di un alimento, immangiabile. Se l’idrolisi avviene in ambiente alcalino, essa porta alla formazione di glicerolo e tre sali di acidi grassi. Se i sali (esempio: R-COO‾Na+) hanno catene lunghe, cioè con C≥12, sono detti SAPONI. Essi possiedono una lunga coda idrofoba e una testa idrofila. Un altro importante fenomeno che riguarda i grassi è rappresentato dall’ossidazione. In questo caso la molecola degli acidi grassi si rompe nel sito in cui vi è il doppio legame degli acidi grassi insaturi, o per sostituzione di due idrogeni con un ossigeno negli acidi grassi saturi. Si crea una catena di reazioni, particolarmente favorite dalla presenza di ossigeno, radiazione luminosa, temperatura elevata, ioni metallici. L’alterazione dell’odore e del sapore è anche in questo caso importante, e si usa il termine di irrancidimento ossidativi o chimico. Infine l’idrogenazione è un processo con cui, in condizioni di forte pressione ed elevata temperatura, gli acidi grassi insaturi si trasformano in saturi, cambiando il proprio stato fisico da liquido a solido. E’ il processo con cui viene ad esempio prodotta la margarina, grasso fisicamente simile al burro, a partire da oli vegetali. 17 La chimica dei principi nutritivi II) complessi Tra i gliceridi vanno ancora ricordati i fosfolipidi, componenti della membrana cellulare, costituenti della guaina mielinica e con funzioni di trasporto nel sangue di oli e grassi; e i glicolipidi, anch’essi associati a strutture biologiche soprattutto, negli animali, a livello di nervi e materia cerebrale. b) Non gliceridi Le cere sono miscele di esteri derivati da alcoli e acidi organici, entrambi caratterizzati da lunghe catene carboniose sature. Vediamone un esempio: C15H31COOH + C31H63OH → C15H31COOC31H63 + H2O Acido palmitico + alcool miricilico→ miricil-palmitato (cera d’api). Possono essere vegetali, con funzioni di riduzione delle perdite d’acqua da traspirazione fogliare; animali, con funzione di impermeabilizzazione di peli, lana e piume, come la lanolina; montane, da ligniti fossili; artificiali, prodotte in laboratorio. I terpeni sono composti di unità di isoprene ed hanno spesso struttura ciclica. Hanno odori intensi e si trovano come componenti degli oli essenziali, ad esempio di canfora, di geranio, di limone. Sono dei terpeni anche le vitamine A, E e K ed i carotenoidi. CH2=C(CH3)-CH=CH2 isoprene terpene Sono steroidi alcuni composti di grande importanza biologica, come il colesterolo, gli acidi biliari, diversi ormoni (estrogeni, progesterone, testosterone, ormoni della corteccia surrenale). Sono dei lipidi non gliceridi infine anche le prostaglandine, sostanze con diverse attività biologiche come la stimolazione della muscolatura liscia e l’abbassamento della pressione del sangue o il riassorbimento del corpo luteo (PG – F 2α). 18 La chimica dei principi nutritivi 3. Proteine Le proteine sono composti organici molto complessi. Contengono carbonio, idrogeno, ossigeno, azoto e anche piccole quantità di zolfo. Sono molecole di natura colloidale. Le proteine sono presenti in tutti gli esseri viventi in una grandissima quantità di tipi diversi. Ogni tessuto ha proteine “speciali”, ogni specie ha proteine caratteristiche, addirittura ogni essere vivente ha qualche piccola differenza proteica rispetto agli altri esseri della sua stessa specie e razza. La grandissima varietà di proteine è dovuta alle enormi possibilità di combinazione dei loro costituenti fondamentali, gli aminoacidi. Come con sole 10 cifre (da 0 a 9) si possono scrivere infiniti numeri, e con 26 lettere si possono scrivere milioni di libri diversi uno dall’altro, così con soli 20 aminoacidi (quelli comunemente presenti nelle proteine) si possono avere milioni di proteine diverse. Aminoacidi Dall’idrolisi delle proteine si ottengono gli aminoacidi. In natura ne esistono più di 170 tipi diversi, ma, come si è detto, sono solo 20 quelli che compongono le proteine animali ed umane: Glicina Alanina Valina Leucina Isoleucina Serina Treonina Cisteina Metionina Prolina Fenilalanina Tiroxina Triptofano Acido aspartico Acido glutammico Asparagina Glutammina Lisina Arginina Istidina Gli aminoacidi vengono indicati con una sigla di tre lettere, di cui la prima maiuscola: ad esempio, per l'aminoacido alanina si usa la sigla Ala; per l'aminoacido serina si usa la sigla Ser; eccetera. La loro formula generale è la seguente: R è diverso a seconda dell’aminoacido: può essere un semplice atomo di idrogeno, ma anche un radicale anche particolarmente complesso. La presenza di un gruppo amminico –NH2 (basico) e di un gruppo carbossilico –COOH (acido), chimicamente reattivi, determina la formazione della reale struttura di un aa, detta forma dipolare: 19 La chimica dei principi nutritivi forma neutra forma salinica o zwitterionica dipolare A causa di questa caratteristica, gli aminoacidi possono comportarsi sia da acidi (in ambiente basico) sia da basi (in ambiente acido). Perciò vengono definiti composti anfoteri, dalla radice greca amphi che significa “entrambi”. Questa loro caratteristica permette di esporre cariche differenti in diverse condizioni di pH. a pH molto acido a pH intermedio a pH molto alcalino Se la soluzione è acida, l’aminoacido è presente soprattutto nella forma cationica; nella soluzione basica è presente soprattutto come anione. Per esempio, la caseina nel latte manifesta carica negativa (pH = 6,7) e nel vino positiva (pH = 3). Il valore di pH a cui un dato aminoacido si presenta come elettricamente scarico è detto punto isoelettrico. In teoria possono esistere aminoacidi L e D, a seconda della posizione del gruppo amminico. Tuttavia gli aminoacidi presenti nelle proteine hanno tutti configurazione L. L - aminoacido D - aminoacido Gli aminoacidi sono uniti tra loro mediante il legame peptidico (ammidico) che si stabilisce tra il gruppo amminico e il gruppo carbossilico di due aminoacidi adiacenti con liberazione di una molecola d'acqua. Per questo le proteine sono anche dette polipeptidi. Ecco un esempio di catena polipeptidica: 20 La chimica dei principi nutritivi aa N - terminale aa C - terminale Ricorda che tutte le proteine sono polipeptidi, ma non tutti i polipeptidi sono proteine. Le piante riescono a sintetizzare aminoacidi e proteine a partire da sostanze azotate più semplici (ad esempio i nitrati presenti nel terreno o forniti con la concimazione). Anche i microrganismi riescono ad elaborare sostanze azotate semplici in proteine complesse. Gli animali, invece, per costruire le proprie proteine devono alimentarsi con fonti di aminoacidi. Devono poi trasformare gli aminoacidi alimentari in aminoacidi corporei. In alcuni casi non possiedono gli enzimi per farlo e devono necessariamente assumere tali aminoacidi dall’esterno, attraverso il cibo. Gli aminoacidi che gli animali non riescono a sintetizzare sono perciò detti essenziali. Ad esempio, nel caso del maiale gli aminoacidi essenziali sono questi: isoleucina fenilalanina leucina treonina lisina triptofano metionina valina I ruminanti hanno caratteristiche del tutto particolari riguardo agli aminoacidi: infatti i microrganismi che vivono nel rumine riescono a fornire loro anche gli aminoacidi essenziali, a partire da sostanze azotate anche molto semplici come l’urea o l’ammoniaca. Quando le produzioni sono molto elevate, però, la produzione di aminoacidi essenziali da parte dei batteri non basta. Allora anche ai ruminanti sarà necessario fornire aminoacidi essenziali alimentari. Nel caso degli esseri umani, sulla base delle più recenti ricerche, si è stabilito che soltanto treonina e lisina sono realmente in aminoacidi essenziali, in altre parole non possono essere sintetizzati dell'uomo e devono essere assunti con la dieta. Classificazione delle proteine Le proteine possono essere classificate in: 1) Semplici, se costituite solo da aminoacidi 21 La chimica dei principi nutritivi 2) coniugate, se ad esse è legato un gruppo non proteico, organico o inorganico, indicato con il termine di gruppo prostetico (cioè "messo davanti"). Ad esempio nelle glicoproteine il gruppo prostetico è uno zucchero, nelle fosfoproteine è l'acido fosforico. Livelli di organizzazione strutturale delle proteine Alla grande varietà di funzioni delle proteine corrisponde anche una grande varietà di strutture tridimensionali. Ogni proteina presenta diversi livelli di organizzazione: Struttura primaria: é data da numero, tipo e sequenza degli aminoacidi nella catena polipeptidica. Esempio: un pezzo della sequenza dell'insulina Gly- Ile – Val – Glu – Gln – Cys – Cys – Ala – Ser – Val – Cys – Ser – … Struttura secondaria: è data dei legami idrogeno che si instaurano fra i vari aminoacidi. Determina una disposizione regolare ripetitiva nello spazio. Le due principali struttura secondaria sono l'alfa-elica e la struttura a foglietto beta alfa - elica 22 La chimica dei principi nutritivi foglietto beta Nella struttura ad alfa-elica i gruppi NH e CO di un segmento polipeptidico formano legami H originando un giro destrorso di circa quattro aminoacidi. Nel foglietto beta diversi segmenti della catena polipeptidica, che hanno una disposizione distesa, sono paralleli tra loro. La struttura è stabilizzata dal legame idrogeno tra gruppi NH e CO di segmenti adiacenti. L'affiancamento di diversi segmenti della catena polipeptidica dà origine a strutture indicate con il termine di foglietti beta (beta sheet) ondulati a causa degli angoli di legame. Struttura terziaria: è la conformazione spaziale dovuta legami (ponti disolfuro S-S) che si stabiliscono tra catene laterali di cisteina, aminoacido contenente gruppi sulfidrile (-SH). In questo modo le proteine acquistano una conformazione tridimensionale caratteristica. La funzione di una proteina è sempre correlata alla sua conformazione tridimensionale. Nelle cheratine, ad esempio, i ponti disolfuro si formano tra catene di alfa eliche intrecciate. Ciò consente flessibilità ed estensibilità. Negli enzimi, la particolare struttura "a gomitolo" è dovuta ad anse presenti nella catena formate da ponti disolfuro; ciò consente facilmente il movimento in mezzi acquosi. Struttura quaternaria: è data dal modo in cui sono disposte o raggruppate nello spazio più catene polipeptidiche (subunità). Per esempio l'emoglobina è un tetramero formato da quattro subunità. 23 La chimica dei principi nutritivi La proteina completa dell'emoglobina è formata cioè da quattro catene polipeptidiche ripiegate (i gruppi prostetici eme sono legati alle catene polipeptidiche e contengono atomi di ferro che servono a trasportare ossigeno e anidride carbonica. Dal punto di vista della loro struttura, le proteine vengono classificate in: Fibrose o strutturali, a forma di lunghe catene. Sono generalmente insolubili in acqua. Vi appartengono le cheratine (pelle, capelli, unghie), il collagene (cartilagini, vasi sanguigni, pelle) e le sete. Globulari, a forma sferica. Sono solubili in acqua in quanto contengono molti gruppi polari o ionici. Vi appartengono enzimi, alcuni ormoni, proteine di trasporto, deposito e riserva. Funzioni delle proteine La funzione di una proteina, strettamente legata alla sua conformazione tridimensionale, dipende dall’interazione con altre molecole: per esempio gli anticorpi si legano a virus o batteri. La sostanza che si lega alla proteina è detta ligando e la regione specifica della proteina che aderisce ad esso si chiama sito di legame. Le interazioni tra sito di legame e ligando sono interazioni tra forme complementari e sono dovute a legami deboli (legami idrogeno, forze di Van der Waals). È evidente che variazioni, anche minime, nella struttura primaria di una proteina alterano la sua forma tridimensionale (in quanto modificano le interazioni tra aminoacidi) compromettendone la funzionalità. 24 La chimica dei principi nutritivi Tra le principali funzioni delle proteine vanno ricordate: - catalisi enzimatica: gli enzimi aumentano fino a 1020 volte la velocità delle reazioni biochimiche - riserva: albumina dell'uovo, caseina del latte, zeina del mais - trasporto: emoglobina, mioglobina - struttura: cheratina, collagene, seta - ormoni: insulina, ormone della crescita, ossitocina - anticorpi: immunoglobuline - tossine: veleni dei serpenti, tossina del Clostridium botulinum - contrazione: miosina dei muscoli Denaturazione proteica L'esposizione delle proteine ad eccessi di pH o di temperatura (superiore ai 60°C) provoca un cambiamento della struttura con relativa perdita della funzionalità. Nelle proteine globulari, ad esempio, la denaturazione provoca un dispiegamento della catena che si avvolge a caso e con irregolarità. Un classico esempio di denaturazione proteica è la cottura dell'albume. Utilizzazione delle proteine negli animali domestici Le proteine presentano due diversi tipi di utilizzazione, a seconda che si tratti di un animale monogastrico o poligastrico. Il monogastrico digerisce la proteina grazie agli enzimi gastrici, pancreatici, enterici. La sequenza degli enzimi è la seguente: pepsina; tripsina, chimotripsina, carbossipeptidasi; erepsina. Alla fine del processo digestivo si ottengono aminoacidi che vengono assorbiti dall’intestino ed utilizzati dall’animale per le sue produzioni (accrescimento; latte per i piccoli; feti; uova; pelo o piume…) e per il rinnovo dei tessuti corporei (muscolo, scheletro, epiteli, connettivi, cartilagini, sangue…). I tessuti corporei vengono continuamente demoliti e ricostruiti; nel corso di queste attività una parte degli aminoacidi viene definitivamente persa e deve essere reintrodotta con l‘alimentazione. E’ fondamentale che l’alimento apporti gli aminoacidi essenziali, senza i quali il monogastrico non può ricostruire le proprie proteine. 25 La chimica dei principi nutritivi Nel corso delle attività di mantenimento e produzione, il monogastrico elimina una certa quantità di sostanze azotate, sia attraverso le feci che attraverso le urine. Nell’azoto fecale si ritrovano le sostanze azotate che non sono state digerite, e proteina proveniente dalle desquamazioni dell’epitelio intestinale o dai batteri che popolano l‘intestino; nell’azoto urinario è compresa l’urea che deriva dai processi di rinnovamento dei tessuti e dagli eventuali eccessi di aminoacidi provenienti dall’alimentazione rispetto al fabbisogno dell’animale. Per diminuire le perdite di azoto (che vanno a finire nei reflui, con effetti di inquinamento dell’ambiente) si può agire utilizzando proteine molto digeribili e fornendo miscele ottimali di aminoacidi essenziali rispetto alle necessità dell’animale (è il concetto della proteina ideale). Il poligastrico, invece, prima di digerire le proteine nell’intestino le vede trasformare in gran parte (70-80%) per azione dei batteri ruminali, secondo lo schema seguente: Anche il ruminante presenta nelle feci e nelle urine una certa quantità di sostanze proteiche. Per diminuirne la quantità si possono scegliere alimenti più digeribili. Non ha senso, invece, il concetto di proteina ideale, in quanto gli aminoacidi essenziali vengono prodotti dai batteri secondo le proprie necessità, con le quali no è possibile interferire. Invece, è possibile fare in modo che i batteri lavorino al meglio delle loro possibilità, • garantendo quantitativi corretti di proteina alimentare (non eccedere né dare meno del necessario), • fornendo ai batteri anche l’energia necessaria per le loro sintesi, • mantenendo il pH del rumine al giusto livello (6,2 – 6,8). 26