Attivitàenzimatica
1 UI= 1 micromole di substrato trasformato/1 min
Dalla legge di lambert-Beer:
A= ε *c*d
da cui
c=A/ε *d
rc=rA/εd
Generalmente: milliunità internazionali riferite a 1ml
1UI = 1.000mUI
rA = variazione assorbanza
V = volume totale della miscela di reazione (ml)
1000 = conversione alle mUI
ε =coeff. Estinzione molare
d= cammino ottico
v = volume del campione (ml)
Laboratorio di Biochimica applicata
Cognome e Nome
DOSAGGIO ENZIMATICO PER LA REAZIONE :
KG+NADH+H+ + NH3 = GLU + NAD+
MIX
ml
TRIS/NH4Cl (c. f. 6
mM)
KG (c.f. 12mM)
NADH (c.f. 0.2mM)
H2O
ALLO SPETTROFOTOMETRO: 970 µl di MIX + 30 µl di enzima
Misurare a 340 nm l'assorbanza al punto zero e dopo 30"
Ricavare le unità enzimatiche del campione incognito
CAMPIONE N°:
