• Tramite questo incrocio l’ordine dei tre geni puo’ essere determinato in una singola progenie, in cui si possono riscontrare alcuni doppi ricombinanti, rendendo disponibili distanze di mappa piu’ accurate. - Nell’esempio, una coppia di cromosomi omologhi di un individuo eterozigote per tre loci (AaBbCc). - I geni si trovano in configurazione di cis, tutti gli alleli dominanti sono localizzati su un cromosoma e tutti quelli recessivi sull’altro. - Possono avvenire tre tipi di crossing-over tra i tre geni: due sono singoli e uno è Doppio. ➔ Per ciascun tipo di crossing-over, due dei cromosomi sono ricombinanti e due sono parentali ➔ Nella progenie derivante dal doppio crossing-over solo l’allele intermedio è diverso rispetto agli alleli dei parentali ➔ questa osservazione ci fornisce un Importante indizio per stabilire l’ordine dei tre geni. ➔ Per il seguente incrocio: DEF x def DEF 90 DEf 90 DeF 10 Def 10 dEF 10 dEf 10 deF 90 def 90 400 a) Determina il genotipo degli individui incrociati; b) Determina se c’è associazione tra i tre geni interessati. c) Determina la distanza di mappa d) Disegna schematicamente la mappa ➔ Per il seguente incrocio: DdEeFf x ddeeff Consideriamo i geni a due a due: DE: DdEe x ddee DE 90 + 90 = 180 De 10 + 10 = 20 dE 10 + 10 = 20 de 90 + 90 = 180 400 D e E sono associati in cis. Frequenza di ricombinazione: (20 + 20)/400 = 0,10 Distanza tra D ed E 10 um. ➔ Per il seguente incrocio: DdEeFf x ddeeff Consideriamo i geni a due a due: DF: DdFf x ddff DF 90 + 10 = 100 Df 90 + 10 = 100 dF 10 + 90 = 100 df 10 + 90 = 100 400 D e F sono indipendenti. ➔ Per il seguente incrocio: DdEeFf x ddeeff Consideriamo i geni a due a due: EF: EeFf x eeff EF 90 + 10 = 100 Ef 90 + 10 = 100 eF 10 + 90 = 100 ef 10 + 90 = 100 400 E e F sono indipendenti. ➔ Femmine di Drosophila fenotipicamewnte normali sono incrociate con maschi con corpo nero, ala curva e occhio cinabro ottenendo la seguente progenie: corpo nero 198 corpo nero occhio cinabro 205 ala curva 200 ala curva occhio cinabro 197 fenotipo selvatico 52 occhio cinabro 50 corpo nero ala curva 46 corpo nero ala curva occhio cinabro 50 998 a) Indicare il genotipo delle femmine impiegate nell’incrocio; b) Stabilire i rapporti di associazione e le distanze di mappa tra i tre geni interessati. Si possono individuare quattro classi piu’ numerose, in proporzioni uguali tra di loro, e quattro classi meno numerose, sempre in proporzioni uguali tra di loro. ➔ Femmine di Drosophila fenotipicamente normali sono incrociate con maschi con corpo nero, ala curva e occhio cinabro ottenendo la seguente progenie: +e +c +cv x ee cc cvcv Consideriamo i geni a due a due: + + 200 + 52 = 252 + c 197 + 50 = 247 e + 198 + 46 = 244 e c 205 + 50 = 255 e++ 198 ec+ 205 + + cv 200 + c cv 197 +++ 52 +c+ 50 e + cv 46 e c cv 50 = 998 corpo nero e occhio cinabro sono indipendenti ➔ Femmine di Drosophila fenotipicamente normali sono incrociate con maschi con corpo nero, ala curva e occhio cinabro ottenendo la seguente progenie: +e +c +cv x ee cc cvcv Consideriamo i geni a due a due: + + 198 + 52 = 250 + cv 200 + 46 = 246 c + 205 + 50 = 255 c cv 197 + 50 = 247 e++ 198 ec+ 205 + + cv 200 + c cv 197 +++ 52 +c+ 50 e + cv 46 e c cv 50 = 998 occhio cinabro e ala curva sono indipendenti ➔ Femmine di Drosophila fenotipicamente normali sono incrociate con maschi con corpo nero, ala curva e occhio cinabro ottenendo la seguente progenie: +e +c +cv x ee cc cvcv Consideriamo i geni a due a due: + + 52 + 50 = 102 + cv 200 + 197 = 397 e + 198 + 205 = 403 e cv 46 + 50 = 96 e++ 198 ec+ 205 + + cv 200 + c cv 197 +++ 52 +c+ 50 e + cv 46 e c cv 50 = 998 (102+96)/998= 0,198 FR= 19,8% corpo nero ed ala curva sono associati 19,8 u.m. a) Il genotipo delle femmine impiegate nell’incrocio è: e+ + cv : c + b) Tra i geni corpo nero e occhio cinabro e ala curva e occhio cinabro c’è una relazione di indipendenza; mentre tra i geni corpo nero e ala curva c’è una relazione di associazione con una distanza di 19,8 u.m. Le classi parentali sono rispettivamente: e+ : + cv e+ c corpo nero occhio cinabro c e+ + corpo nero + + cv c + cv + ala curva ala curva occhio cinabro Le classi ricombinanti sono rispettivamente: e cv e cv ++ : c + c corpo nero occhio cinabro ala curva e cv + corpo nero ala curva ++ c occhio cinabro ++ + fenotipo selvatico Risultati dell’incrocio a+a b+b x aa bb • Condizione di indipendenza: i geni sono situati su cromosomi diversi. • ➔ in F1 si ottengono 4 classi fenotipiche in proporzioni uguali: 1 a+b+ : 1 ab : 1 a+b : 1 ab+ Condizione di associazione: i geni sono situati sullo stesso cromosoma. ➔ in F1 si ottengono 2 classi fenotipiche in proporzioni maggiori (parentali) e 2 classi fenotipiche in proporzioni minori (ricombinanti). ➔ se l’eterozigote è in cis le classi parentali sono a+b+ e ab; se è in trans le classi parentali sono a+b e ab+ Risultati dell’incrocio a+a b+b c+c x aa bb cc ➔ Gameti dell’eterozigote a+a b+b c+c e classi fenotipiche in F1. • I tre geni sono indipendenti: ➔ otto classi in proporzioni uguali • I tre geni sono associati: ➔ due classi piu’ numerose, che corrispondono ai gameti parentali, due classi meno numerose che corrispondono ai doppi scambi, e quattro classi di frequenza intermedia (dipendente dalla distanza tra i geni) che corrispondono ai singoli scambi in prima o in seconda regione. • Due geni sono associati, il terzo è indipendente: ➔ quattro classi piu’ numerose, in proporzioni uguali tra di loro, e quattro classi meno numerose, sempre in proporzioni uguali tra di loro