Elementi di Genetica Vegetale Roberto Tuberosa Dipartimento di Scienze agrarie Viale Fanin 44 Tel. 051-2096646 [email protected] www.distagenomics.unibo.it Elementi di Genetica Vegetale Genetica Agraria F. Lorenzetti, S. Ceccarelli, F. Veronesi Editore: Patron, Bologna Vecchia Edizione Genetica Agraria Genetica e biotecnologie per l'agricoltura F. Lorenzetti, S. Ceccarelli, D. Rosellini Editore: Pàtron Bologna SBN: 8855531239 Nuona Edizione Elementi di Genetica Vegetale Titolo: Genetica e genomica Autori: Barcaccia Gianni, Falcinelli Mario Editore: Liguori Volume 1, 2, 3 ISBN: 8820737426 ISBN-13: 9788820737429 Data pubblicazione: 2005 -2007 Produzione globale di cereali 4500 Target 4000 Current trend 3500 Climate change 3000 2500 2000 1500 1000 500 0 1961 1965 1969 1973 1977 1981 1985 1989 1993 1997 2001 2005 2009 2013 2017 2021 2025 2029 2033 2037 2041 2045 2049 Million Tonnes Scorte mondiali di cereali NEL 2000 BASTAVANO AD ALIMENTARE L’UMANITÀ PER 115 GIORNI Scorte mondiali di cereali NEL 2008 BASTAVANO PER 57 GIORNI Nuove piante ad usi non alimentari … cattive notizie … • Eccessivo utilizzo di fertilizzanti e fitofarmaci • Aumento dell’uso di combustibili fossili • Aumento dell’erosione dei suoli • Ogni anno, 1% di superficie irrigua è persa • Le risorse irrigue stanno diminuendo • 2.5 miliardi di persone in più nel 2050 • Raddoppio della domanda di alimenti entro il 2050 • Superficie coltivata disponibile pro-capita: – 0,45 ha. in 1966 – 0,25 ha. in 1998 – 0,15 ha. in 2050 Febbraio 2006 Agosto 2008 Variazioni nella resa previste per il 2080. Ewert et al. 2005. Variazione in resa (%) +70% -70% < 10% di terreni arabili Resa (t ha-1) Produttività del mais (t ha-1) negli USA ’93 ’88 L’incremento produttivo dovuto al miglioramento genetico è imputabile per lo più ad un aumentata resistenza agli stress abiotici (Duvick, 1999). Fattori limitanti della produzione e della qualità del prodotto Ozono Caldo Freddo Stress abiotici Siccità Eccesso idrico Metalli pesanti Salinità Elementi nutritivi La rivoluzione del gene: un nuovo paradigma • Sequenziare l’intero genoma di una specie • Valutare l’espressione dei geni • Selezionare sulla base di profili molecolari • Isolare singoli geni • Ingegneria genetica Il contributo delle biotecnologie • Techniche di colture in vitro: - micropropagazione - produzione di doppi aploidi - criopreservazione • Tecnologie di processo • Genomica - profili molecolari - mappatura del genoma - selezione assistita - genomica funzionale - clonaggio di geni/QTL • Ingegneria genetica Dimensione del genoma • Arabidopsis 130.000.000 paia di basi • Riso 440.000.000 “ • Pomodoro 900.000.000 “ 2.500.000.000 “ 16.000.000.000 “ 3.000.000.000 “ • Mais • Frumento • Homo sapiens Caratteri monogenici e poligenici Poligenici • Caratteri “Mendeliani” • Variazione discontinua • Nullo o scarso l’effetto dell’ambiente • Caratteri quantitativi • Variazione continua • Notevole l’effetto dell’ambiente Frequenza Monogenici Altezza pianta GENETICA QUANTITATIVA Analisi di caratteri la cui variabilità è determinata sia dai geni che dai fattori ambientali Geni Ambiente Apporto idrico, fertilizzanti, temperatura, ecc. Genotipo Fenotipo Per caratteri quantitativi il fenotipo è scarsamente informativo circa il genotipo che lo determina Miglioramento genetico delle colture agrarie SELEZIONE BASATA SUL FENOTIPO: • Si seleziona sulla base della variabilità osservata a livello fenotipico. • Agisce sul fenotipo in toto. SELEZIONE BASATA SUL GENOTIPO: • Si seleziona tramite il profilo molecolare (DNA) a loci associati ai geni preposti al controllo dei caratteri di interesse agronomico. • Agisce su regioni precise del genoma. Sviluppo di una nuova varietà tramite selezione assistita con marcatori molecolari Parentale resistente Parentale suscettibile X Reincrocio assistito con marcatori Gene Selezione assistita con marcatori (MAS) • La MAS viene utilizzata in molti programmi di selezione – Riduce i tempi per costituire nuove varietà migliorate – Va integrata con metodiche tradizionali • Le strategie genomiche aumentano l’efficacia della selezione e richiedono estese conoscenze molecolari e fisiologiche Courtesy of Jonathan Lynch Courtesy of Jonathan Lynch Quantitative Trait Loci for root architecture traits correlated with drought tolerance and phosphorus acquisition in common bean Beebe et al. (2006). Crop Science 46: 413–423 Selezione assistita per tolleranza a fusariosi in frumento duro Collaborazione: DipSA-UniBO Società Produttori Sementi Spa Bologna SSSSSRSSSSSSSSSSSRS Piante che portano l’allele di resistenza alla fusariosi 530 530 530 Profili AFLP di cultivar di frumento duro 500 500 500 495 495 495 460 460 460 400 400 364 364 364 350 350 350 300 300 255 255 204 204 204 200 200 200 145 145 100 100 50 50 530 500 495 460 400 400 364 350 300 300 255 255 204 200 145 145 100 100 50 50 Courtesy of Enrico Noli & colleagues, LARAS, DISTA Mappe genetiche: le autostrade della genomica Profilo valore LOD LOD Profilo valore LOD LOD QTL GENOMICA X Genotipo Sequenza Geni QTL Fenotipo Mappa genetica (cM) Mappa fisica (kb) Sequenza DNA Annotazione DNA Varshney R. and Tuberosa R. (2007). Genomics-Assisted Crop Improvement, Springer. Dal QTL al gene … alla ricerca dell’ago nel pagliaio … Resistenza alla siccità Precocità di fioritura “escape” (fuggire) Profondità radice “avoidance” (evitare) Vegetative to generative transition 1 (Vgt1) Gaspé Flint N28E Salvi et al., 2007. Proc. Nat. Acad. Sci. 104: 11376 N28 N28E N28 Attività di MAS per i maggiori stress abiotici Tipo di stress QTL QTL maggiori clonato MAS in atto Rilascio di cvs. Siccità + Sì + No Sommersione +++ Sì +++ Sì Salinità +++ Sì +++ No Basso N ++ Sì +++ No Basso P ++ Sì ++ No Alluminio ++ Sì +++ Sì Boro +++ Sì +++ Sì Freddo ++ Sì + No Nuove linee Sub1 dopo 17 giorni di sommersione IR64-Sub1 Samba-Sub1 Samba IR49830 (Sub1) Samba IR64 IR42 IR42 IR64 IR49830 (Sub1) IR49830 (Sub1) IR64-Sub1 IR64 Samba Samba-Sub1 IR64-Sub1 IR42 IR49830 (Sub1) IR42 IR64-Sub1 Samba IR49830 (Sub1) SambaSub1 IR64 Courtesy of David Mackill, IRRI