Metodica - Delta Chemie Logo

MDMA (ECSTASY)
METODO EIA IN FASE OMOGENEA
REF ML011 IVD
CONT 100 DET.
USO PREVISTO
Per la determinazione semiquantitativa
dell’Ecstasy nelle urine umane.
CONFEZIONE: Conservazione e stabilità
e
Conservare a 2-8°C
Stabile fino alla data di scadenza riportata sulla confezione.
Dopo apertura e prelievo del reattivo, richiudere
immediatamente i flaconi al fine di evitare la contaminazione
batterica, luce diretta, evaporazione.
quantitativa
MDMA è l’abbreviazione del composto chimico metilene
diossimetamfetamina. E’ anche chiamato Ecstasy, X, XTC, E,
Love Doves, Clarity, Adam, Disco Biscuite e Shamrocks.
MDMA è uno stimolante con tendenze allucinogene, è
descritto come empatogeno. E’ capace di rilasciare nel
cervello sostanze che producono sentimenti di amore e
amicizia. E’ una droga di classe A, stessa categoria di eroina
e cocaina Gli effetti collaterali dell’uso di MDMA prevedeno
aumenti della pressione sanguigna, ipertermia, ansia,
paranoia e insonnia. L’overdose di MDMA può essere fatale
per infarto o colpo di calore. L’MDMA appartiene alla famiglia
delle
droghe
artificiali.
Suoi
simili
sono
MDA
(methylenedioxyamphetamine), droga madre dell’MDMA e
MDEA (methylenedioxyethylamphetamine), nota anche come
EVE. Hanno tutte gli stessi effetti delle amfetamine L’ MDMA
si somministra per via orale o intravenosa Le compresse di
MDMA vengono prodotte in diverse misure e colori. La sua
dose clinica è di 50-100mg; la dose soglia di tossicità è di
500mg. Gli effetti dell’MDMA iniziano 30 minuti dopo la sua
assunzione. Raggiungono il picco massimo dopo un ora e
durano per 2-3 ore. Il 65% di MDMA lo si ritrova inalterato
nelle urine ed è rilevabile per circa tre giorni dopo l’uso.
.
CAMPIONE
Urine.
I campioni possono essere tenuti a temperatura ambiente
(15-30°C) per 8 ore, in frigorifero a 2-8°C fino a 3 giorni
oppure per periodi prolungati a -20°C.
PREPARAZIONE DEI REATTIVI
I reattivi sono pronti per l’uso e non necessitano di
preparazione
STABILITA’ DEI REATTIVI
I reattivi sono stabili fino alla data di scadenza indicata sulla
confezione, se correttamente conservati. I reattivi aperti sono
stabili 30 gg a
2-8°C
MATERIALI NECESSARI NON FORNITI
Strumentazione e attrezzatura generale da laboratorio.
PRINCIPIO
Quello proposto è un test EIA in fase omogenea che utilizza
due reattivi liquidi pronti per l’uso. La determinazione si basa
sulla competizione tra la droga contenuta nel campione e
quella legata all’enzima G6PDH, per i siti di legame con gli
anticorpi. La riduzione dell’attività dell’enzima con formazione
di NADH è misurata fotometricamente a 340 nm.
PROCEDIMENTO ANALITICO
REAGENTI
PIPETTARE IN PROVETTA:
LUNGHEZZA D’ONDA PRIMARIA: 340 nm
LUNGHEZZA D’ONDA SECONDARIA: 405 nm.
TEMPERATURA DI REAZIONE: 37°C.
LETTURA: Contro acqua distillata.
REAZIONE: End Point.
REATTIVO 1 : 1X20 ml Liquido pronto per l’uso
Anticorpo monoclonale anti-MDMA
G6PDH
NAD
REATTIVO 1
CAMPIONE
CALIBRATORE
REATTIVO 2 : 1X7,5 ml Liquido pronto per l’uso
TAMPONE
MDMA - G6PDH
CAMP.
0,200 ml
0,020 ml
---
ST.
0,200 ml
--0,020 ml
Miscelare, attendere 2 minuti quindi aggiungere:
REATTIVO 2
0,075 ml
0,075 ml
CALIBRATORE: MDMA
(Cod. ML011S non compreso nel kit)
Miscelare, attendere 2 minuti quindi leggere le assorbanze.I
volumi possono essere variati proporzionalmente, il calcolo
resta immutato.
1
La presente metodica descrive l’utilizzo del kit in manuale e
può
variare
anche
significativamente
in
funzione
dell’analizzatore utilizzato
Specificità
Cross-reactant
TECNICA QUALITATIVA:
Utilizzando un calibratore con una concentrazione
corrispondente ad un cut-off di 500 ng/ml, sono da
considerarsi positivi tutti i campioni con un'assorbanza
maggiore o uguale al calibratore.
TECNICA SEMI-QUANTITATIVA:
Utilizzando un calibratore a concentrazione alta, effettuare
delle diluizioni scalari dello stesso calibratore.
Calcolare le assorbanze delle diluizioni effettuate e costruire
una curva di calibrazione che, sarà di riferimento per la
determinazione dell’Amfetamina nel campione.
Con riferimento alle attuali normative in vigore per la medicina
del lavoro, sono da considerarsi negativi i campioni con una
concentrazione inferiore a 500 ng/ml
SMALTIMENTO RIFIUTI
Non disperdere nell’ambiente.
Applicare le norme di cui al D.L. 22/97 e successive modifiche
(Rifiuti speciali e speciali pericolosi con relativo codice CER)
CONTROLLO DI QUALITA’
E’ necessario eseguire i controlli ad ogni utilizzo del kit e
verificare che i valori ottenuti siano inclusi nell’intervallo di
riferimento riportato nelle istruzioni d’uso. A tale scopo si
consiglia l'uso del
CONTROLLO MULTIPARAMETRICO
(Cod. ML090C 1+1X1 ml) non compreso nel kit)
PRESTAZIONI DEL METODO
Le prestazioni sono state ottenute utilizzando un analizzatore
Synchron CX4CE
SENSIBILITA’: 50 ng/ml
PRECISIONE TRA LA SERIE n=12
LIVELLO BASSO: M= 375 ng/ml
LIVELLO MEDIO: M= 500 ng/ml
LIVELLO ALTO: M= 1.000 ng/ml
CV= 0,8%
CV= 0,8%
CV= 0,7%
Found
(ng/ml)
55.0
114.3
215.4
378.2
458.9
547.4
644.1
767.2
904.1
%
Recovery
110.0
91.5
93.6
102.2
102.0
99.5
99.1
98.4
98.3
Positive
Positive
Positive
Positive
Positive
Positive
Positive
(υg/ml)
1000
1000
1000
1000
1000
100
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
1000
100,000
1000
1000
1000
1000
800
50
1000
1000
1000
1000
1000
1000
300
1000
1000
1000
1000
1000
1000
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
Negative
BIBLIOGRAFIA
1. Urine Testing for Drug of Abuse, National Institute on Drug
Abuse (NIDA) Research
Monograph 73, 1986.
2. Mandatory Guidelines for Federal Workplace Drug Testing
Program, National Institute
on Drug Abuse, Federal Register, vol. 53, No. 69, pp11970
(1988)
3. Contemporary Practice in Clinical Toxicology, Leslie M.
Shaw, editor-in-chief. AACC (2000)
4. Julien, R.M. A primer of Drug Action. 6th ed. New York,
N.Y. WH Freeman & Co. 1992
5. Cox, T.C., et al, Drugs and Drug Abuse, Addiction
Research Foundation, pp. 153-156, 1983.
6. Leshner, A.L. Club Drugs, Community Drug Alert Bulletin,
www.clubdrugs.org. NIDA’s
Community Epidermiology Work Group. 2001.
7.Rubenstein, K.E., R.S. Schneider, and E.F. Ullman,
Homogeneous Enzyme Immunoassay: A New
Immunochemical Technique, Biochem Biophys Res
Commun, 47, 846 (1972)
Recupero
Target Conc.
(ng/ml)
50
125
230
370
450
550
650
780
920
500
500
1,000
1,200
1,400
2,000
4,000
Acetaminophen
Acetylsalicylic acid
Amitriptyline
Amobarbital
d-Amphetamine
l-Amphetamine
Benzoylecgonine
Bupropion
Caffeine
Chlorpheniramine
Chlorpromazine
Cocaine
Codeine
Dextromethorphan
Ecgonine
Ephedrine
HMMA*
Imipramine
Lidocaine
Meperidine
Methadone
d-Methamphetamine
l-Methamphetamine
Methaqualone
Morphine
Nortriptyline
Oxazepam
Phencyclidine
Phenobarbital
Phentermine
d,l-Phenylpropanola.
Promethazine
Propoxyphene
Ranitidine
Secobarbital
Valproic Acid
VALORI NORMALI
CV= 0,8%
CV= 0,8%
CV= 0,7%
X- reactivity
MDMA
MDEA
MDA
d,l-BDB*
PMMA*
MBDB*
PMA*
CALCOLO
PRECISIONE NELLA SERIE n=21
LIVELLO BASSO: M= 375 ng/ml
LIVELLO MEDIO: M= 500 ng/ml
LIVELLO ALTO: M= 1.000 ng/ml
Conc. (ng/ml)
%CV
8.1
1.5
1.6
1.0
2.3
5.7
3.6
6.2
4.1
2
Prodotto conforme alla direttiva 98/79 CE
Rev. 2011.06
SIMBOLOGIA USATA IN METODICA E SULLE ETICHETTE
Limiti di Temperatura
Utilizzare entro ( ultimo
giorno del mese)
YYYY-MM
Codice del lotto
Dispositivo medicodiagnostico in vitro
Fabbricante
Numero di Catalogo
Contenuto sufficiente per < n >
prove
Consultare le istruzioni
per l’ uso
Solo per valutazione prestazioni
IVD
Non riutilizzare
Attenzione : consultare i
documenti di accompagnamento
Marchio CE
Delta Chemie Biotechnology SaS
Via Nuova Poggioreale, 157 – 80143 NA
TEL/FAX: +39 081 787 1577
E-MAIL: [email protected]
WWW.deltachemie.it
3