X° CICLO DI CONFERENZE
Professione Biologo
“Biologo della Fecondazione Assistita”
Giovedì 27 settembre 2012
Alessandro Miceli
Promea S.p.A. - Torino
[email protected]
Dipartimento di Biologia Animale e dell’Uomo
Via Accademia
Albertina,
13
- TorinoAssistita
Fisiopatologia
della araiproduzione
Umana e Tecniche
di Riproduzione
CARIOTIPO UMANO
I cromosomi sessuali X e Y (la loro denominazione è riferibile
all'aspetto che assumono alla meiosi che li rende simili
rispettivamente a una x e a una y) sono differenti per
dimensioni e forma, e ciò riflette il differente contenuto
genetico.
Il cromosoma Y è un cromosoma sui generis, è molto più
piccolo, infatti è grande circa 1/3 del cromosoma X, contiene
pochissimi geni (solo quelli necessari per la determinazione
del sesso maschile) geni quindi meno numerosi e differenti da
quelli portati dal cromosoma X ed ha un elevato numero di
sequenze ripetitive.
DETERMINAZIONE DEL SESSO
LA FUNZIONE RIPRODUTTIVA
ASSE IPOTALAMO - IPOFISI - GONADI
IPOTALAMO ghiandola che, integrando segnali endocrini e
segnali neurologici, secerne neuropeptidi che stimolano
l’ipofisi a produrre tropine. In particolare produce GNRH Gonadotropin Releasing Factor.
IPOFISI ghiandola il cui afflusso ematico deriva
completamente dall’ipotalamo, attraverso il sistema portale
ipotalamo-ipofisario, suddivisa in Adenoipofisi anteriore che
produce tropine fra cui le gonadotropine (FSH - Follicle
Stimulating Hormone ed LH Luteinizing Hormone) e
Neuroipofisi
posteriore che
secerne
Ossitocina
e
Vasopressina.
GONADI organi bersaglio delle gonadotropine con funzione
steroidogenica (androgeni ed estrogeni) e gametogenica.
APPARATO RIPRODUTTIVO MASCHILE
Testicoli, Prostata, Vescichette Seminali,
Ghiandole Bulbo-Uretrali, Pene
APPARATO RIPRODUTTIVO FEMMINILE
Ovaie, Tube di Falloppio, Utero, Vagina
CICLO MESTRUALE
Il ciclo mestruale è il periodo compreso
tra una mestruazione e la successiva.
Accompagna la donna dalla prima
mestruazione (menarca) fino all'ultima
mestruazione (menopausa).
Il ciclo mestruale è regolato da diversi
ormoni che attraverso il circolo ematico
raggiungono vari organi dove svolgono la
loro azione specifica.
Il centro regolatore è rappresentato
dall'ipofisi, che produce due ormoni
(gonadotropine): follicolostimolante FSH
e luteinizzante LH.
Questi
ormoni
ipofisari
agiscono
sull'ovaio promuovendo la maturazione
della cellula uovo con la sua liberazione
durante l'ovulazione e la produzione di
due ormoni, estrogeni e progesterone.
Gli ormoni ovarici agiscono soprattutto
sull'utero stimolando la proliferazione
dell’endometrio
(estrogeni)
e
preparandolo
ad
una
gravidanza
(progesterone).
NELL’UOMO, COME IN TUTTI GLI ANIMALI, I
GAMETI
VENGONO
PRODOTTI
DA
ORGANI
SPECIALIZZATI, LE GONADI
GONADE
GONADE
MASCHILE
FEMMINILE
TESTICOLO
OVAIO
Struttura dello spermatozoo umano
400 x
campione colorato
200 x
campione a fresco
Struttura dell’ovocita umano
Ovaio
Follicolo di Graaf
Ovocita
Ovocita
denudato
(decoronizzato)
Ovocita con
cumulo ooforo
e corona radiata
La Fecondazione Naturale
Fecondazione
Reazione
Acrosomiale
La reazione acrosomiale comporta una fusione tra la
membrana plasmatica dello spermatozoo e quella acrosomiale
nella regione anteriore con una specie di vescicolazione che
permette la secrezione di enzimi litici acrosomali che
digeriscono il cumulo ooforo e la zona pellucida.
Dalla fusione di due gameti si costituirà quindi un'unica
cellula
con
un
patrimonio
genetico
completo
che
suddividendosi in maniera corretta darà origine ad un
nuovo individuo.
Ma . . . . quando il figlio non arriva ?
???
Centro di Medicina della Riproduzione
VALUTAZIONE E PREPARAZIONE DEL LIQUIDO SEMINALE
MONITORAGGIO ECOGRAFICO DELL’OVULAZIONE
Immagine ecografica di un’ovaia durante
farmacologica dell’ovulazione.
la induzione
Sono visibili vari follicoli che appaiono come aree nere.
I punti colorati evidenziano un follicolo maturo di 17 mm di
diametro.
IUI - INTRAUTERINE INSEMINATION
Quando due o tre follicoli hanno
raggiunto la misura idonea, viene indotta
l’ovulazione con una ulteriore iniezione di
ormone (gonadotropina corionica umana o
hCG).
In periodo periovulatorio, un campione di
seme fresco viene preparato e posto nel
fondo dell’utero della partner mediante
un sottile tubicino (catetere).
Nella IUI, come nelle altre tecniche di riproduzione assistita,
dopo l’entrata in vigore della legge 40/2004, si utilizza
esclusivamente
il
campione
seminale
del
partner
(inseminazione omologa).
FIVET - FERTILIZATION IN VITRO END EMBRYO TRANSFER
ICSI - INTRACITOPLASMATIC SPERM INJECTION
Sonda ecografica endovaginale
Termoblock
Pompa di aspirazione a vuoto
Provette
PICK-UP OVOCITARIO
Durante
fluido
il
pick-up
follicolare
aspirato
provette.
il
viene
all’interno
di
Il fluido follicolare, riversato in piastre di coltura, viene
esaminato allo stereomicroscopio per la ricerca degli ovociti.
ICSI
FIVET
FIVET
ICSI
Ovocita maturo con cumulo ooforo chiaro ed espanso
Ovocita immaturo, con cumulo ooforo scuro e compattato
Ovocita immaturo, con cumulo ooforo scuro e compattato
Ovocita molto immaturo - “Vescicola Germinale” (Profase I)
Ovocita immaturo ”Metafase I”
Ovocita maturo ”Metafase II”
Vescicola germinale
Metafase I
Metafase II
Ovocita di bassa qualità, con vacuoli e globulo polare irregolare
Ovocita con zona pellucida fratturata (Fractured Zone) ed
ooplasma in estrusione
Zigote diploide, 2 pronuclei
(46 cromosomi)
Zigote triploide, 3 pronuclei anziché 2
(69 cromosomi anziché 46)
Zigote poliploide
DAY 2
DAY 2
DAY 3
DAY 5
Hatching
Embrionario
Assisted Hatching
Soluzione Acida di Tyrode
Laser
Crioconservazione
Spermatozoi
Ovociti
Embrioni
Transfer embrionario
Catetere con embrioni
Immagine ecografica di un transfer
Linea rossa: limiti del collo dell’utero
Linea blu: limiti dell’intero utero
Linea verde: limiti della cavità uterina
Linea gialla tratteggiata: catetere che contiene gli embrioni
Grazie
per
l’attenzione!