Biolife Italiana S.r.l. Scheda Tecnica N°4013691 B I-2 9/2003 Pagina 1 di 2 DERMATOPHYTE SELECTIVE MEDIUM BASE DERMATOPHYTE ANTIMICROBIC SUPPLEMENT DERMATOPHYTE SELECTIVE MEDIUM Terreno di base in polvere, supplemento selettivo, piastre e provette pronte all’uso per l’isolamento dei dermatofiti FORMULE TIPICHE Dermatophyte Selective Medium Base (g/l) Dermatophyte Antimicrobic Supplement (mg/fiala) Peptone di soia 11.0 Clortetraciclina HCl 50 Glucosio 10.0 Agar 15.0 Rosso fenolo 0.2 Dermatophyte Selective Medium (provette e piastre pronte) Cicloeximide 0.5 Dermatophyte Selective Medium Base 1000 ml Gentamicina solfato 0.1 mg Clortetraciclina HCl 100 mg pH 5.5 ± 0.1 PREPARAZIONE DEL TERRENO IN POLVERE Sospendere 36.8 g di polvere in 1000 ml di acqua distillata fredda. Portare ad ebollizione sotto agitazione e autoclavare a 115°C per 10 minuti. Raffreddare a circa 50°C e addizionare, con le cautele dell’asepsi, il contenuto di due fiale di Dermatophyte Antimicrobic Supplement (cat. n. 4240024) ricostituite con 5 ml di acqua distillata sterile. Mescolare accuratamente, distribuire in piastre o in provette sterili con tappo a vite e lasciar solidificare in posizione obliqua per ottenere un lungo becco di clarino. pH finale 5.5 ± 0.1. DESCRIZIONE Dermatophyte Selective Medium, preparato secondo la formula di Taplin, Zaias e Rebbell, consente l’isolamento selettivo rapido e la differenziazione dei funghi dermatofiti responsabili di lesioni della pelle, delle unghie, dei capelli (Microsporum, Trichophyton, Epidermophyton). Gli agenti selettivi del terreno (cicloeximide, gentamicina, clortetraciclina) consentono di eliminare totalmente le contaminazioni batteriche e di ridurre notevolmente le contaminazioni dei funghi saprofiti, permettendo nel contempo un elevato tasso di isolamento dei dermatofiti. Il rosso fenolo presente nel terreno permette di identificare i dermatofiti che coltivano con un viraggio dell’indicatore verso il rosso. In diversi studi effettuati su 3000 soggetti, Allen, Carrol, Taplin e coll., riportano un’accuratezza del 97100% nell’identificazione dei dermatofiti con Dermatophyte Selective Medium. Il terreno consente di effettuare una diagnosi di dermatofiti dopo almeno 48 ore di incubazione. IMPIEGO Il materiale prelevato da lesioni della pelle, dai capelli e dalle unghie, deve essere seminato sulla superficie del terreno in piastra o sul becco di clarino assicurando una buona aderenza al terreno. I campioni da esaminare possono essere conservati fino ad una settimana prima di essere inoculati. Incubare a 22-30°C per 48 ore o più. La comparsa di una colorazione rossa attorno alle colonie è indice di presenza dei dermatofiti. Per i dermatofiti a crescita rapida si ha la comparsa del colore rosso dopo 48 ore di incubazione; per i dermatofiti a crescita lenta sono necessari da 3 a 7 giorni di incubazione. Quando si è in presenza di piccole colonie, il colore rosso resta limitato all’area nelle immediate vicinanze della colonia; quando le stesse sono a crescita confluente e cospicua si ha viraggio dell’indicatore lungo tutto il terreno. I funghi saprofiti normalmente non coltivano su Dermatophyte Selective Medium tranne quando il campione ne sia pesantemente contaminato; in questo caso si hanno crescite più tardive, caratteristiche per il colore delle colonie (nere per Aspergillus niger e Cladosporium, verde per Penicillium spp.) a volte con viraggio al rosso del terreno: Candida albicans coltiva senza viraggio del colore del terreno. Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it Biolife Italiana S.r.l. Scheda Tecnica N°4013691 B I-2 9/2003 Pagina 2 di 2 CONTROLLO QUALITÀ DELL’UTILIZZATORE Controllo della produttività T.mentagrophytes ATCC 9533: crescita, il terreno diventa viola C.albicans ATCC 10231: crescita Controllo della selettività E.coli ATCC 25922: inibito A.niger ATCC 16404: inibito Incubazione: 25°C fino a 7 giorni CONSERVAZIONE Terreno in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il prodotto rimane valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Una volta aperta la confezione, conservare il prodotto mantenendo il tappo del contenitore ben chiuso. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.). Conservare il terreno di base, senza aggiunti di supplementi, per un massimo di 1 mese a 2-8°C Conservare le piastre, complete di supplemento, preparate in laboratorio per un massimo di 7 giorni a 2-8°C Supplemento selettivo: conservare fino alla data di scadenza indicata sull’etichetta, a 2 - 8°C. Terreno pronto all’uso in provetta ed in piastra: conservare a 2-8°C al riparo della luce, fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento. PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI Terreno in polvere: il preparato qui descritto contiene cicloeximide ed è classificato come T (tossico) ai sensi della legislazione vigente. Consultare la scheda di sicurezza prima dell’uso. Supplemento selettivo: il preparato qui descritto contiene clortetraciclina ed è classificato come T (tossico) ai sensi della legislazione vigente. Consultare la scheda di sicurezza prima dell’uso. Terreno pronto all’uso in provetta ed in piastra: I preparati qui descritti non sono classificati come pericolosi ai sensi della legislazione vigente né contengono sostanze pericolose in concentrazioni 1%. I prodotti qui descritti sono solo per uso diagnostico in vitro e devono essere usati in laboratorio da operatori adeguatamente addestrati, con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare le provette dopo l’uso e prima dell’eliminazione come rifiuto. BIBLIOGRAFIA • Allen A.M., Drewry R.A., Weaver R.E. (1970) Evaluation of two new color indicator media for diagnosis of dermatophytosis - Arch. Derm. 102, 68-70. • Carrol H.F. (1974) Evaluation of Dermatophyte Test Medium for diagnosis of dermatophytosis - J.A.V.M.A., 155, 192-195. • Taplin D., Zaias N., Rebbell G., Blank H. (1969) Isolation and recognition of dermatophytes on a new medium (DTM) - Arch. Derm., 99, 1969. CONFEZIONI Terreno in polvere 40136912 Dermatophyte Selective Medium Base, CODICE CND W0104030101 500 g (13.6 l) Supplemento selettivo 4240024 Dermatophyte Antimicrobic Supplement, 10 fiale liofile, ciascuna per 500 ml Il terreno è disponibile pronto per l’uso nei seguenti formati: 553691 Dermatophyte Selective Medium, 20 provette a becco di clarino 541369 491013 20 piastre diametro 90 mm 20 piastre a 2 settori CODICE CND W0104010104 CODICE CND W0104030301 Dermatophyte Selective Medium, DTM/SDA CAF CODICE CND W0104030201 IVD Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeitaliana.it