cellula eucariotica CITOPLASMA Citoplasma è tutta la regione compresa tra l‟Involucro Nucleare e la Membrana Plasmatica Comprende gli organelli cellulari CITOSOL Citosol è la sostanza semifluida che si trova nel citoplasma Proteine, RNA, carboidrati, acidi grassi, altri composti organici, sali minerali e acqua. NON comprende gli organelli cellulari Nel Citosol • Avvengono la maggior parte delle reazioni metaboliche: Sintesi di zuccheri, aminoacidi e acidi grassi; glicolisi, sintesi proteica. • È presente il Citoscheletro • Vi sono inclusioni prive di membrana: gocce lipidiche, depositi di glicogeno, alcuni tipi di granuli di secrezione e pigmenti. Sistema membranoso interno Reticolo Endoplasmatico Labirinto di tubuli ramificati e cisterne appiattite Reticolo endoplasmatico: Più di metà delle membrane della cellula Funzione: • Sintesi di membrane e di proteine di membrana che vengono poi smistate ad altri organelli o alla membrana plasmatica • Sintesi di proteine solubili da esportare fuori dalla cellula o da riversare all‟interno dell‟RE, Golgi o lisosomi • Deposito di Ca2+ intracellulare (ruolo nella trasmissione del segnale) • Metabolismo lipidico Due categorie morfologiche e strutturali: • Reticolo endoplasmatico rugoso • Reticolo endoplasmatico liscio Reticolo endoplasmatico: Morfologia del Reticolo Endoplasmatico Rugoso (RER) • • • • Cisterne appiattite ed impilate Particelle sulla superficie (ribosomi) Localizzazione perinucleare In continuità fisica con l‟involucro nucleare Morfologia del RER (TEM) Funzione del Reticolo Endoplasmatico Rugoso (RER) Sintesi delle proteine che devono essere secrete o entrare nelle membrane cellulari Consiste nella Traduzione degli RNA messaggeri in proteine e loro modificazioni (Presenza di RNA rende questa struttura positiva a coloranti basici. Es: ematossilina) Le proteine prodotte subiscono modificazioni posttraduzionali nel lume del RER Ribosomi Reticolo Endoplasmatico Rugoso Sintesi Proteine • 2 sub-unità Ribosomi – Maggiore e minore – Proteine e rRNA • Ribosomi liberi – Sintetizzano le proteine che rimangono nella cellula • Proteine citoplasmatiche strutturali e funzionali • Associati col RER – Sintetizzano le proteine che devono essere secrete o di membrana Struttura dei Ribosomi Genesi dei Ribosomi Sintesi proteica Sintesi proteica Un cappuccio 5„ consiste in un residuo terminale di 7-metilguanosina legato tramite un legame 5'-5'trifosfato al primo nucleotide trascritto. La sua presenza è importante per il riconoscimento da parte del ribosoma e la protezione dall'RNasi. Sintesi proteica: inizio Protagonisti: • Sub unità dei Ribosomi • mRNA • Fattori di inizio: eIF • PABP Sintesi proteica Protagonisti: • Ribosomi • mRNA • tRNA • Fattori di allungamento: EF-Tu. EF-G… • Fattori di rilascio • GTP Poliribosomi o Polisomi Poliribosomi o Polisomi rer esi ribosomi i ribosomi trovano anche “liberi” nel citosol (non solo aderenti alle membrane del reticolo) liberi Prevalenza di Ribosomi liberi • Globuli Rossi – Sintesi di Emoglobina • Cellule muscolari in differenziamento – Sintesi di Actina e Miosina • Cellule Nervose – Sintesi di Neurofilamenti (ma non per i neurotrasmettitori) • Cheratinociti della pelle – Produzione di Cheratina Come una proteina raggiunge la sua destinazione finale? Via co-traduzionale Via post-traduzionale Per entrare nel RE serve una sequenza segnale (peptide segnale) Protagonisti: • Peptide segnale • SRP: proteina che riconosce il peptide segnale • Recettori di SRP • Traslocone • Chaperoni • ATP Sintesi e localizzazione di proteine di membrana tipo I (peptide segnale iniziale + sequenza idrofobica interna) Sintesi e localizzazione di proteine di membrana tipo II (peptide segnale idrofobico interno) Sintesi e localizzazione di proteine di membrana legate al GPI Eventi che avvengono contemporaneamente o successivamente alla sintesi delle proteine - Formazione del corretto ripiegamento tridimensionale - Assemblaggio in proteine multimeriche - Modificazioni post-traduzionali: • Formazione di ponti disolfuro • N-glicosilazione Modificazioni post-traduzionali di proteine prodotte nel RE: Protagonisti: • Tre tipi di zuccheri: NAC, Mannosio e Glucosio • Asparagina (N-X-S/T) • Dolicolo (lipide) • Glicosil-trasferasi • Chaperoni che controllano la conformazione e mediano la rimozione dei glucosi e di un mannosio N-glicosilazione Prevalenza di Ribosomi associati al RER • In tutte le cellule è presente il RER – Mantenimento della membrana plasmatica e matrice extracellulare • Più abbondante in tutte le cellule in cui vi è attiva sintesi di proteine • Prevalentemente cellule secretorie Neuroni • Producono molte proteine da secernere – Neurotrasmettitori • Presentano strutture basofile nel citoplasma evidenziate dalla colorazione di Nissl (violetto di cresile) • Sono definite zolle di Nissl o sostanza tigroide • Rivela l‟RNA del RER Cellule Principali dello stomaco • Producono pepsinogeno, precursore della pepsina – Enzima proteolitico • Strutture basofile dovute ad abbondante RER Cellule Acinari Pancreatiche • Producono gli enzimi digestivi. • Organizzate in gruppi, detti Acini • La Secrezione Esocrina avviene al centro dell‟acino Acino Cellule Acinari Pancreatiche Plasma cellule • Linfociti B attivati • Producono anticorpi circolanti Fibroblasti • Principale costituente del Tessuto Connettivo Osteoblasti • Cellule costituenti il tessuto osseo • Intensa basofilia Reticolo endoplasmatico liscio (REL) • Privo di Ribosomi • Canali anastomizzati (interconnessi) piuttosto che cisterne impilate Il REL è in continuità con il RER Funzioni del REL • Detossificazione – Aumenta negli epatociti dopo somministrazione di farmaci – Converte i farmaci lipo-solubili in prodotti di scarto idro-solubili, che vengono eliminati dai reni – Idrolasi, Ossidasi, – Metilasi (l‟aggiunta di metili aiuta la loro secrezione, Es.: Arsenico) Funzioni del REL • Sintesi di Fosfolipidi per tutte le membrane cellulari • Produzione di Steroidi – Ghiandole Surrenali, Gonadi – Utilizzano il Colesterolo come molecola di partenza – Estrogeni, Testosterone, Cortisolo, Progesterone Intestino Tenue • Sintesi dei trigliceridi • Lipidi presenti nel cibo migrano lateralmente allo spazio extracellulare • Assorbiti e integrati nel REL Corticale del Surrene • Cellule secernenti cortisolo • Steroidi secreti per diffusione – No granuli Funzioni del REL • Metabolismo del Glicogeno • Interviene nella scissione del glicogeno (glucosio-6-fosfatasi) • Probabile partecipazione attiva anche nei processi di deposizione – Negli Epatociti • Regola la distribuzione intra-cellulare degli ioni Ca2+ – Nelle cellule muscolari, regola la contrazione – Reticolo Sarcoplasmatico – ATPasi calcio dipendenti Epatociti (cellule fegato) • Detossificazione • Metabolismo del Glicogeno Reticolo Sarcoplasmatico • SER nel muscolo scheletrico • Rilascio di ioni calcio che stimolano la contrazione Flusso di vescicole da Reticolo Endoplasmatico all‟apparato di Golgi