Liceo classico Beccaria Materiale del docente E 5 BIO 30 ottobre 2009 TITOLO LA CELLULA IN ATTIVITA’: DECOMPOSIZIONE DELL’ACQUA OSSIGENATA OBBIETTIVI -Verificare l’attività dell’enzima catalasi in diversi organismi - ricondurre i cambiamenti a una diversa attività metabolica delle cellule implicate - riconoscere la differenza tra un catalizzatore biologico e uno inorganico - conoscendo il concetto di catalisi individuare i fattori che possono influenzare l’attività enzimatica e proporre la verifica sperimentale STRUMENTI E MATERIALI -piastra riscaldante -termometro - provette e portaprovette - pipette -spatola - ferro in polvere, fegato, patata, lievito, H2O2 PROCEDIMENTO - Si preparano una serie 5 di provette contenenti la stessa quantità di acqua – 2 ml - si inseriscono nelle provette piccole quantità dei campioni: 1.ferro in polvere, 2.fegato, 3. patata, 4. lievito La provetta 5 conterrà solo H2O2 come prova di controllo Si aggiunge H2O2 (10 gocce) a ogni campione - si osserva quanto accade e si annotano le differenti attività (velocità di reazione +/++/ecc.) in TABELLA 1 - volendo verificare l’effetto del riscaldamento si può replicare la stessa serie di prove in contemporanea, dopo riscaldamento a bagnomaria dei campioni - variazioni di concentrazione dell’enzima, del substrato, del pH possono essere valutate con ulteriori prove allestite separatamente con lo stesso principio TABELLA 1 PROVE 1- ferro 2 – fegato 3 – patata 4 – lievito 5 - controllo TEMPERATURA AMBIENTE Sviluppo gas Effervescenza Sviluppo gas Sviluppo gas Nessuna trasformazione DOPO RISCADAMENTO Sviluppo gas Nulla Nulla Nulla Nulla Liceo classico Beccaria Materiale del docente E 5 BIO 30 ottobre 2009 NB L’acqua ossigenata agisce come ossidante delle molecole, è tossica per gli organismi e può essere prodotta dal metabolismo cellulare; per eliminarla le cellule sono dotate di organelli – i perossisomi – contenenti l’enzima catalasi in grado di decomporre l’acqua ossigenata in acqua e ossigeno. - L’enzima possiede un sito non proteico simile al gruppo eme contenente ferro - il suo numero di turnover a 0°C è 50.000 molecole di acqua ossigenata al secondo “ “ a 37°C è 600.000 “ “ L’ossigeno liberato dalla decomposizione dell’acqua ossigenata è responsabile dell’azione antisettica della soluzione diluita usata come disinfettante. DOMANDE per interpretare e concludere 1. Organismi e parti differenti di organismi possiedono capacità di degradare il substrato diverse, come si spiega questa osservazione? 2. Dove si trova nelle cellule l’enzima responsabile della decomposizione dell’acqua ossigenata? Quale funzione svolge? 3. Per quale ragione il ferro continua a mostrare attività di decomposizione anche dopo riscaldamento? 4. Scrivere l’equazione di reazione che descrive la decomposizione in atto 5. Quali fattori possono influenzare nel complesso l’attività enzimatica cellulare? Come si può dimostrare sperimentalmente la loro influenza ?