LABORATORIO DI BIOLOGIA : ESPERIENZA N° 2 DATA.................................... TITOLO: Attività enzimatica FASE 1 : enzima catalasi Il perossido d'idrogeno H2O2 è un prodotto del metabolismo che risulta dannoso per i tessuti e viene opportunamente eliminato dall'enzima catalasi secondo la seguente reazione: 2H2O2 → 2H2O + O2↑ Materiale occorrente 2 vetri orologio, 1 porta provette, 8 provette, pinze, 1 paletta, 1 bottiglia acqua distillata, 1 bottiglia perossido d'idrogeno, becker. Biossido di manganese, campioni freschi di tessuti animali (fegato) e vegetali (patata, mela) crudi e cotti. Procedimento: • Introdurre nelle provette circa 3 cc di perossido d'idrogeno. • Introdurre in ciascuna provetta in successione le seguenti sostanze: o biossido di manganese (piccola quantità) o fegato crudo a pezzi o fegato crudo in poltiglia o fegato cotto o mela cruda o mela cotta o patata cruda o patata cotta • Osservare e descrivere gli effetti FASE 2 : enzima bromelina L’ananas, a differenza dell’arancia e di altri frutti, contiene un enzima proteolitico chiamato bromelina che impedisce la solidificazione della colla di pesce, gelatina di origine animale. In presenza di ammoniaca tale enzima viene denaturato e non agisce. L’azione proteolitica è paragonabile a quella che avviene nello stomaco ad opera della pepsina. Altri tipi di frutta contengono enzimi proteolitici come la papaina nella papaia che a livello industriale vengono utilizzati come inteneritori della carne. Materiale occorrente 4 capsule di Petri, una vaschetta rettangolare, un vassoio per il raffreddamento, una bacchetta di vetro, un mestolo, 2 coltelli, forbici. Arancia, ananas, colla di pesce in fogli, ghiaccio, ammoniaca Procedimento: • immergere un foglio di gelatina nella vaschetta rettangolare con acqua fredda • tagliare a cubetti l’arancia e matterla in una capsule di Petri • tagliare a cubetti l’ananas e metterla in due capsule di Petri, in una delle due aggiungere 10 gocce di ammoniaca (ph basico) • trasferire i fogli di gelatina strizzati in 50 ml di acqua bollente, mescolare fino a completa solubilizzazione e versare in 4 capsule di Petri (3 con la frutta e una in bianco) • appoggiare le capsule sul vassoio con acqua e ghiaccio per velocizzare il raffreddamento • attendere 30 minuti • Osservare e descrivere gli effetti