ALTERNANZA
SCUOLA
LAVORO
DIPARTIMENTO SAFE - UNIFG
FONDAMENTI DI BIOLOGIA MOLECOLARE
PCR E APPLICAZIONI
DOTT. LUCIANO BENEDUCE
[email protected]
BIOLOGIA
MOLECOLARE
Dal DNA alla proteina, molecole ed
informazioni
I «ferri del mestiere» della biologia molecolare
fotocopiatrice (la PCR)
forbici e colla (gli enzimi di restrizione)
DAL DNA ALLA
PROTEINA
COME AVVIENE LA
DUPLICAZIONE DEL DNA
LA DNA POLIMERASI
ENZIMI DI RESTRIZIONE
PLAY
LA PCR
storia
Importanza nella diagnostica molecolare
Come funziona
BIOLOGIA MOLECOLARE
AL LAVORO
Video PCR
PLAY
Video
elettroforesi
PLAY
POSSIBILI GENI
TARGET
• Salmonella spp. : gene InvA
• E. coli O157:H7: geni Stx1 ed Stx2 , gene Eae
• Listeria monocytogenes: gene Hly
• LAB produttori di amine biogene: geni Tdc, Hdc
• Batteri ammonio-ossidanti: gene AmoA
APPLICAZIONI DELLA
PCR NELLA SICUREZZA
ALIMENTARE
La ricerca di microrganismi patogeni
La determinazione di ogm negli alimenti
Valutazione di possibile presenza di
allergeni
PCR QUANTITATIVA
(REAL TIME PCR)
• E' un metodo che abbina una normale PCR ad un
sistema di lettura in tempo reale della fluorescenza
emessa durante l'accumulo di prodotti PCR marcati
• Si utilizzano delle chimiche che permettono di
misurare la PCR in tempo reale
• Si ottengono curve che, opportunamente analizzate,
permettono di risalire alla concentraizone di DNA o
RNA di partenza.
COME FUNZIONA LA
QPCR
Video pcr quantitativa
PLAY
RICERCA DI
ALLERGENI
Multiplex pcr per la ricera di tracce di DNA di nocciole, noci,
arachidi
RICERCA DI
MICRORGANISMI
PATOGENI
Salmonella negli alimenti e nelle acque
RICERCA DI OGM
NEGLI ALIMENTI
Ricerca di geni del mais Bt in farine o alimenti
COME QUANTIFICARE
I PRODOTTI PCR
GRAZIE PER L’ATTENZIONE
