DMK02-20 V02 Juillet 2008
JAK2 V617F MutaScreenTM Kit
PROFILING LEUKEMIA
Rilevazione della mutazione JAK2 V617F su DNA genomico isolato da sangue
periferico di pazienti.
JAK2 e Neoplasie Mieloproliferative
I disordini mieloproliferativi (MPD) ora chiamati
Neoplasie Mieloproliferative (MPN), secondo la
classificazione WHO revisionata nel 2008 [2]
comprendono un ampio spettro di malattie
ematologiche maligne che alterano le cellule
staminali ematopoietiche multipotenti.
Policitemia Vera (PV), Trombocitemia Essenziale
(ET) e Mielofibrosi Idiopatica (IMF) sono malattie
caratterizzate da produzione cronica e iperattiva
di cellule del sangue causata dalla ipersensibilità
alle citochine. I disordini mieloproliferativi possono
portare a trombosi o emorragie e possono evolvere
in leucemia mieloide acuta.
Nel 2005 è stata identificata una mutazione della
Janus Tyrosin Chinasi 2 (JAK2 V617F) dal gruppo
INSERM del Dr. Vainchenker presso l’Institut
Gustave Roussy di Parigi [1]. Questa mutazione
è stata rilevata in una grande percentuale di
pazienti con PV, ET e meno frequentemente in
pazienti con IMF. Questa mutazione acquisita
riguarda il dominio pseudochinasi di JAK2 nelle
cellule ematopoietiche ed è responsabile
dell’attivazione costitutiva di vie metaboliche
che portano alla proliferazione incontrollata delle
cellule nei MPN.
Questa scoperta costituisce un passo in avanti
nella comprensione dello sviluppo dei MPN a livello
molecolare e contribuisce alla formazione di un
nuovo strumento molecolare di classificazione dei
MPN e di miglioramento allo screening
diagnostico2. Inoltre questo nuovo specifico
marcatore molecolare potrebbe condurre allo
sviluppo di nuove terapie mirate per pazienti con
MPN negativi per BCR-ABL.
Per quanto riguarda i pazienti sospetti di PV,
l’individuazione della mutazione di JAK2 in quasi
tutti i pazienti con PV, rende la misurazione della
massa delle cellule rosse inutile ai fini
dell’individuazione delle PV dalle policitemie
secondarie o apparenti.
Lo screening della mutazione V617F di JAK2 nel
sangue periferico è perciò preferito come primo test
per la valutazione di un paziente sospetto di PV3.
Poichè la mutazione JAK2V617F si riscontra in
circa il 50% dei pazienti sia con ET che con IMF,
il pannello WHO propone in una recente
pubblicazione2 di includere lo screening della
mutazione nello schema diagnostico dei MPN
e considera la presenza di JAK2V617F uno dei
maggiori criteri per la diagnosi di MPN3.
Saggio per la Rilevazione della Mutazione
Accurato e Sensibile
La tecnologia MutaScreenTM si basa su
un’amplificazione in PCR a partire da DNA
genomico con analisi specifica e sensibile della
mutazione JAK2 V617F.
Dopo l’estrazione del DNA da sangue periferico,
il frammento che contiene al suo interno il sito
della mutazione viene amplificato in Real Time PCR
utilizzando una miscela di primer e probe specifici
e ottimizzati. La rilevazione precisa e riproducibile
della mutazione è possibile mediante un’unica
reazione per campione, con una sola miscela di
primer e probe.
Il saggio JAK2 MutaScreenTM è significativamente
migliore rispetto al sequenziamento, in termini di
sensibilità, semplicità d’uso e tempo necessario
per il completamento del test.
Sono prodotti intesi per uso diagnostico in vitro.
Identificazione del sito
mutazionale di JAK2.
Vantaggi Clinici
• Diagnosi semplice di MPN
• Criterio diagnostico maggiore per la diagnosi
MPN in accordo con la classificazione WHO
2008
• Kit pronti all’uso marchiati CE per utilizzo IVD
• Tecnologia standardizzata validata da studi
internazionali
Vantaggi di laboratorio
• Kit completo di enzimi e controlli per l’analisi in
Real Time PCR (504MSPP01EZCE)
• Rilevazione sensibile e altamente specifica della
mutazione V617F di JAK2
• Utilizzo di DNA genomico da campione di
sangue periferico
• Test rapido in un’unica reazione, meno di 3 ore
di tempo di lavoro
• Cut-off di positività
(campione cut-off = 2% di allele mutato)
• Compatibilità multipiattaforma
• Stima del carico mutazionale dell’allele
JAK2V617F con il kit 504MSPP03
• Sito di produzione e reagenti conformi
all’ISO13485:2003
Ciascun MutaScreen™ Kit contiene:
• 1 provetta con la miscela di primer e probe
specifici per la rilevazione degli alleli di JAK2
sia mutato sia wild type
• 1 provetta di DNA genomico JAK2 mutato come
controllo positivo (100% dell’allele JAK2 V617F)
• 1 provetta di DNA genomico JAK2 wild type
come controllo negativo (0% dell’allele JAK2
V617F)
• 1 provetta di campione di riferimento usato come
soglia per la discriminazione tra campione
negativo e a bassa positività ( 2% JAK2V617F).
• il kit 504MSPP03CE contiene una serie di
diluizioni di DNA genomico da utilizzare come
scala di riferimento che forniscono una soluzione
ideale per una rilevazione semiquantitativa della
% di JAK2V617F (5%, 12,5%, 31%, 50%, 78%
JAK2V617F)
• il kit 504MSPP01EZCE contiene la master mix
con Taq polimerasi per real time PCR
Informazioni per gli ordini:
Descrizione
Bibliografia
1. James C. et al. A unique clonal JAK2 mutation leading to constitutive signalling
causes Polycythaemia Vera. Nature (2005) 434: 1144-1148.
2. Tefferi A. et al. Classification and diagnosis of myeloproliferative
neoplasms: The 2008 World Health Organization criteria and point-ofcare
diagnostic algorithms. Leukemia (2008) 22: 14-22.
3. Patnaik MM. et al.The complete evaluation of erythrocytosis:
congenital and acquired. Leukemia (2009) 1-11.
Numero di campioni
testati in duplicato
Numero d’ordine
JAK2MutaScreen™
EZ Kit
24* °
504MSPP01EZCE
JAK2MutaScreen™
Kit
24*
504MSPP01CE
JAK2MutaScreen™
Mini Kit
6*
504MSPP02CE
JAK2MutaScreen™
Kit
+ Reference Scale
14-20*
504MSPP03CE
* dipende dello strumento di Real Time PCR utilizzato
° comprensivo di master mix con Taq polimerasi per real time PCR
Ipsogen MutaScreen Kit è un marchio registrato Ipsogen.
I nostri prodotti e le nostre tecnologie sono coperti da brevetti.
Per maggiori informazioni visitate il sito :
www.ipsogen.com/leukemia-products/healthcare-professionnals/product-portfolio/
IPSOGEN SA,
MARSEILLE, FRANCE Tel: +33 (0)4 91 29 30 90 -Fax:+33 (0)4 91 29 30 99 - e-mail: [email protected]
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