S-2222 Substrato cromogenico selettivo per il fattore Xa. Il substrato

S-2222
Substrato cromogenico selettivo per il fattore Xa. Il substrato S-2222 è molto
sensibile anche alla tripsina.
I substrati cromogenici sono costituiti da un piccolo oligopeptide a cui è legata, nella
parte carbossiterminale di arginina o lisina, una molecole di paranitroanilina (pNA)
come gruppo cromoforo dosabile con i comuni spettrofotometri. Le proteasi scindono il
legame peptidico liberando pNA (colorata di giallo) proporzionalmente all’attività
proteasica.
La composizione e la sequenza aminoacidica del substrato sintetico è simile a quella
del sito attivo del substrato “naturale” di cui si vuole determinare l’attività o la
concentrazione.
Formula: Bz-Ile-Glu-(γ-OR)-Gly-Arg-pNA•HCl
R=H (50%) and R=CH3 (50%)
Peso molecolare: 741.3
Principio:
enzima
Bz-lle-Glu-Gly-Arg-pNA
→ Bz-lle-Glu-Gly-Arg-OH + pNA
La reazione tra enzima e substrato cromogenico dà luogo a separazione di pNA dal
substrato. Il metodo per determinare l’attività si basa sulla differenza in assorbanza
(diversa densità ottica alla formazione del colore giallo) tra la pNA formata e il
substrato originale. Il tasso di formazione di pNA, misurato come aumento di
assorbanza a 405 nm, è proporzionale all’attività dell’enzima ed è facilmente
determinabile con un fotometro.
Il kit S-2222 è composto da:
•
Substrato cromogenico: 1 fiala da 25 mg di substrato S-2222 e mannitolo come
eccipiente (120 mg)
Conservazione e stabilità del reagente:
Il substrato cromogenico liofilizzato è stabile a 25°C per 3 anni. Il componente è
igroscopico, conservare in ambiente secco.
La soluzione 4 mmol/L in acqua sterile è stabile a 2-8°C per 6 mesi. Contaminazioni
da microrganismi possono causare idrolisi del substrato.
Codice
00082031639
Codice nominale
Asta