Biolife Italiana S.r.l. Scheda Tecnica N°401685 B I- 2 04/2004 Pagina 1 di 1 MALONATE BROTH Per il test dell’utilizzo del malonato FORMULA TIPICA (g/l) Estratto di lievito Ammonio solfato Potassio fosfato Sodio cloruro Sodio malonato Blu di bromotimolo Glucosio 1.000 2.000 1.000 2.000 3.000 0.025 0.250 PREPARAZIONE Sospendere 9.3 g di polvere in 1000 ml di acqua distillata fredda, riscaldare fino a completo scioglimento del terreno, distribuire e autoclavare a 121°C per 15 minuti. La vetreria deve essere perfettamente pulita. pH finale 6.7 ± 0.1 DESCRIZIONE ED IMPIEGO Malonate Broth è un terreno impiegato per differenziare alcuni microrganismi appartenenti alla famiglia delle Enterobacteriaceae in base alla loro capacità di utilizzare il sodio malonato come fonte di carbonio per la crescita. Il terreno, preparato secondo la formula di Leifson modificata da Edwards ed Ewing, contiene il sodio malonato come unica fonte di carbonio e l’ammonio solfato come unica fonte di azoto. Il malonato inibisce, per competizione con l’acido succinico, il ciclo di Krebs, bloccando l’attività succinico deidrogenasica e il ciclo dell’acido gliossilico, per inibizione dell’enzima isocitratasi che converte l’acido isocitrico in acido gliossilico, e acido succinico. Il sodio malonato inibisce la crescita di tutti i microrganismi ad eccezione di quelli che sono in grado di utilizzarlo come fonte di carbonio. Le basse concentrazioni di estratto di lievito e glucosio stimolano la crescita dei ceppi poco reattivi. Leifson sulla scorta di questi dati ha proposto un terreno, il Malonate Broth, per la crescita e la differenziazione dei microrganismi che fermentano il malonato. I batteri che utilizzano il malonato come fonte di carbonio e allo stesso tempo l’ammonio solfato come fonte di azoto inducono un’alcalinizzazione del terreno, con viraggio del blu di bromo timolo da verde a blu di Prussia. Il terreno è indicato per differenziare Salmonella arizonae ( + ) da Salmonella spp (+) il gruppo Klebsiella-Enterobacter (+) da Escherichia coli (-) e Serratia (-) e per differenziare Klebsiella (+) da Actinobacillus (-). CONTROLLO QUALITÀ Test malonato positivo: K.pneumoniae ATCC 23357 Test malonato negativo: E.coli ATCC 25923 Incubazione a 37°C per 24 h. CONSERVAZIONE Terreno in polvere: conservare a 10-30°C al riparo della luce, in luogo asciutto. In queste condizioni il prodotto rimane valido fino alla data di scadenza indicata in etichetta. Non utilizzare oltre questa data. Eliminare se vi sono segni evidenti di deterioramento della polvere (modifiche del colore, indurimento della polvere ecc.). Conservare il terreno preparato in provetta dall’utilizzatore, per un massimo di 7 giorni a 2-8°C PRECAUZIONI E SICUREZZA DEGLI OPERATORI Il preparato contiene ammonio solfato ed è classificato come Xi (irritante) in accordo alla legislazione vigente. Consultare la scheda di sicurezza per le precauzioni da adottare durante l’uso. Solo per uso diagnostico in vitro. I prodotti qui descritti devono essere usati solo in laboratorio, da operatori adeguatamente addestrati. Operare con metodi approvati di asepsi e di sicurezza nei confronti degli agenti patogeni. Sterilizzare le provette dopo il loro uso e prima dell’eliminazione come rifiuto. Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeit.com Biolife Scheda Tecnica Italiana S.r.l. N°401685 B I- 2 04/2004 Pagina 2 di 2 BIBLIOGRAFIA • Edwards, P.R. & Ewing, W.H. (1972) - Identification of Enterobacteriaceae. 3rd edition, Minneapolis: Burgess Publishing Company. • Leifson, E. (1933) -. J. Bacteriol., 26, 329. • Mac Faddin, J. F. (1976) - Biochemical Tests for Identification of Medical Bacteria. Baltimore: The Williams & Wilkins Company. CONFEZIONE 4016852 Malonate Broth, 500 g (53.8 l) Biolife Italiana S.r.l. Viale Monza 272, 20128 Milano. Tel. n° 02-25209.1, Fax n° 02-2576428, E-mail: [email protected] ; sito Web: www.biolifeit.com