AMPLIQUALITY
HSV 1/2
Cod. 03-75
Sistema completo per l’identificazione
contemporanea dei virus dell’Herpes
simplex di tipo 1 e 2 (gpD, gpG)
CONTROLLO DI AMPLIFICABILITA’: Amplificazione del
gene della β-globina.
RIVELAZIONE: elettroforesi su gel di agarosio.
SPECIFICITA’: L’allineamento dei primers nelle più comuni
banche dati ha rivelato l’assenza di appaiamenti aspecifici
e confermato la specificità per i due tipi virali.
SENSIBILITA’: I test di laboratorio hanno evidenziato che il
metodo è in grado di rilevare fino a 0,001 TCID50 (Tissue
culture infectiouse dose 50%) per HSV 1 e 0,01 TCID50
per HSV 2.
PROCEDURA
INTRODUZIONE
I virus dell’Herpes Simplex (HSV) appartengono alla
famiglia Herpesviridae e sono virus a DNA a simmetria
icosaedrica, provvisti di involucro pericapsidico, in grado di
replicarsi nel nucleo delle cellule epiteliali da cui si liberano
per infettare cellule contigue
Esistono due tipi di Herpes simplex virus, HSV 1 e HSV 2,
che sono causa di una grande varietà di manifestazioni
cliniche, cutanee o emolinfopoietiche.
La maggior parte delle infezioni decorre in modo
asintomatico e la gran parte della popolazione è portatrice
di uno o entrambi questi virus. L’infezione assume però
particolare significato in ospiti immunocompromessi (malati
di AIDS e trapiantati) o in soggetti esposti a radiazioni,
stress, febbre, nei quali il virus, presente in forma latente,
può subire delle riattivazioni, causando malattie
clinicamente definibili.
La diagnosi delle infezioni da Herpes virus può essere
condotta mediante isolamento del virus in coltura o
mediante ricerca degli antigeni specifici. Entrambi questi
metodi però richiedono parecchie ore e necessitano di un
materiale di partenza di quantità e qualità adeguate.
La metodica utilizzata in questo kit prevede
un’amplificazione nested multiplex.
L’amplificazione (nested) aumenta notevolmente la
sensibilità e l’efficenza dell’analisi ed è particolarmente
indicata per la ricerca di HSV. L’amplificazione è inoltre
multiplex, ossia permette la ricerca nello stesso tubo di
reazione sia di HSV 1 che di HSV 2.
DNA ESTRATTO
60 min
1A AMPLIFICAZIONE
2A AMPLIFICAZIONE
50 min
gel di agarosio
VISUALIZZAZIONE
Figura 1. Elettroforesi in gel di agarosio al 3% per
la visualizzazione degli amplificati
dell’amplificazione nested.
1
2
3
4
5
1. Marcatore di peso molecolare (MW)
2. Campione positivo per HSV 1
3. Campione positivo per HSV 2
4. Controllo positivo sia per HSV 1 che per HSV 2
5. Controllo negativo
CARATTERISTICHE TECNICHE
NUMERO DI TEST: 25 o 50 test.
STABILITA’: 6 mesi.
MATERIALE DI PARTENZA: DNA estratto da liquido
vescicolare, tamponi o raschiati prelevati dal tratto genitale,
tamponi oculari o dell’orofaringe, liquido cefalorachidiano,
biopsie cutanee e cerebrali.
INFORMAZIONI PER GLI ORDINI
Cod
03-75A
03-75R
Prod
HSV 1/2
HSV 1/2 -amplification reagents
Confez.
25/50 test
25/50 test
REFERENZE
REGIONE AMPLIFICATA: geni delle glicoproteine gpG e
gpD.
Stewart, J.A., et al., 1995 Clin. Infect. Dis., 21 (suppl. 1),
S114-S120
AMPLIFICAZIONE: amplificazione nested multiplex in
provette monodose pronte all’uso.
Cone, R.W., et al., 1991 J. Infect. Dis., 164, 757-760.
CONTROLLO POSITIVO: incluso sia per HSV 1 che per
HSV 2 (DNA plasmidico ricombinante).
Werner, J.C., 1994 Lab. Med., 25, 664-668.
SCH TEC_HSV 1-2_ R1 240106
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