INTRAOPERATIVE ANALYSIS OF SENTINEL NODE IN
BREAST CANCER BY OSNA (ONE STEP NUCLEIC ACID
AMPLIFICATION).
R. Scamarcio*, C. Caporusso*, G. Ingravallo*, G. Arborea*,
T. Montrone*, G. Opinto*, A. Cirilli°, G.Rubini^ , A.M.Guerrieri”,
C. Giardina*
*Anatomia Patologica Universitaria - Policlinico di Bari
^U.O. Medicina Nucleare - Policlinico di Bari
°Chirurgia Generale Balestrazzi - Policlinico di Bari
“SARIS - Policlinico di Bari
Il test OSNA (Sysmex) è una indagine molecolare che
permette l’esame intraoperatorio di tutto il linfonodo
sentinella (LS) nelle pazienti con carcinoma della mammella.
La diagnosi, introperatoria, si basa sulla valutazione
quantitativa delle copie di mRNA della citocheratina-19
(CK19) usualmente assente nei linfonodi normali
E’ una analisi rapida (circa 30’), con sensibilità del 95.3% e
specificità del 94% altamente standardizzata rispetto alla
procedura classica istologica, che consente di distinguere in
base a stretti criteri quantitativi le micrometastasi dalle
macrometastasi e di concludere la fase chirurgica in
un’unica seduta.
Refertazione dei LNS esaminati con OSNA
Negativi per metastasi:
numero di copie di mRNA di CK 19 < a 250;
Positivi per micrometastasi:
numero di copie compreso tra 250 e 5000
Positivi per metastasi:numero di copie >di 5000
SCOPO DELLO STUDIO
Da Settembre 2012 presso l’Anatomia Patologica del
Policlinico di Bari i LS delle pazienti con carcinoma mammario
sono stati analizzati in toto mediante test OSNA.
In precedenza dal 1999 al 2012 i LS erano stati esaminati
applicando il protocollo IEO ai LS, effettuando sezioni
subseriate dopo inclusione in paraffina
Obiettivo del nostro studio è di:
-correlare i risultati del test OSNA con lo stato dei linfonodi
ascellari e con le caratteristiche del tumore, in particolare con il
diametro (T)
- confrontare il test OSNA con il metodo istologico usato in
precedenza
CASISTICA (settembre 2012-giugno 2013)
METODICA OSNA
Pazienti:152
LNS: 225
Media:1.4 LNS/paziente
ESAMI PREOPERATORI
Core Biopsy:107.
FNAC: 29
ESAME INTRAOPERATORIO: 16
ISTOTIPO
Duttale infiltrante 118
Lobulare infiltrante 15
Duttale + Lobulare inf. 3
Duttale in situ 15
ADH 3
In 2 pz. lesione bilaterale
ETA’ MEDIA:
56 anni (29 -78)
CASISTICA (settembre 2012-giugno 2013)
Tutte le pazienti erano clinicamente N0
In tutti i casi i LS sono stati identificati
mediante iniezione di radiocolloide
La ricerca IIC della CK19 fatta su agobiopsia o
sul tumore dopo intervento, è sempre risultata
positiva.
In ogni caso è stata effettuata una citologia da
apposizione
del
linfonodo
sentinella
esaminato con metodica OSNA, non a scopo
diagnostico ma medico legale.
Risultati
LNS positivi per metastasi 59/225 (26%)
Riscontrati in 52/152 pz (34%)
Micrometastasi:
29/225
LNS(12.8%)
27 PZ(17.7%)
Macrometastasi:
28/225
LNS(12.4%)
25 pz (16.4%);
Correlazione tra “T” e metastasi nel LNS
Micro M. Macro M. LS neg.
TOT.
Tis
1(3.7%)
14 (9%)
15
T1a-b
10(6.5%) 2 (1.3%)
47(31%)
59
T1c
11(7.2%) 17(11%)
29(19%)
57
T2
5 (3%)
10(6.5%) 21
TOT
pz.
27(18%) 25(16%)
-
6 (4%)
100(66%) 152
RISULTATI
La percentuale di pazienti con metastasi nel gruppo
OSNA è stato il 34% contro il 21.5% delle paziente
studiate con metodo tradizionale.
Le pazienti con macrometastasi, sottoposte a
dissezione ascellare, sono state il 16.4% nella
casistica OSNA contro il 15 % nella casistica
tradizionale.
Le pazienti con micrometastasi sono state il 18%
nella casistica OSNA contro il 6.5% nella casistica
tradizionale.
RISULTATI
LNS vs DISSEZIONE ASCELLARE
LS
MACROMETASTASI:
Dissezione ascellare in 25/25 pazienti
Metastasi in NSL (Non Sentinel Lymphnodes): 11/25 (44%)
LS
MICROMETASTASI:
Dissezione in 22/27 pazienti
Delle 22 pazienti in 4 pz. solo asportazione 1 o 2 linfonodi
Metastasi in NSL in: 4/27 (14.8%)
Confronto tra stato dei linfonodi
ascellari nelle due metodiche
DISSEZIONE ASCELLARE
Pazienti con micrometastasi nel LNS:
Casistica OSNA: metastasi nel 14. 8% dei NSL
Casistica tradizionale: metastasi nel 23% dei NSL
Pazienti con macrometastasi nel LNS:
Casistica OSNA: metastasi nel 44% dei NSL
Casistica tradizionale: metastasi nel 59% dei NSL
Discussione
Questo studio costituisce una conferma alla validità della
metodica biomolecolare OSNA per la diagnosi del LS nel
carcinoma mammario
Ci è sembrato più corretto confrontare i risultati ottenuti
applicando le due metodiche su due casistiche simili piuttosto
che applicarle entrambe allo stesso linfonodo.
Noi abbiamo confrontato un gruppo di casi (260) studiati nel
periodo precedente il 2012 con i casi sottoposti alla metodica
OSNA (152).
Le due casistiche erano simili per caratteristiche delle pazienti
e dei tumori.
Discussione
Lo studio del LS con il metodo Osna ha confermato la
correlazione diretta tra T e incidenza delle micro e delle
macrometastasi.
-la percentuale di metastatizzazione del LNS nel gruppo OSNA
(34%) è risultata superiore a quella riscontrata nella casistica
tradizionale (21.5%).
Mentre erano molto vicine le percentuali di macrometastasi
riscontrate con le due metodiche, le micrometastasi con Osna
erano circa 3 volte superiori a quelle riscontrate con il metodo
tradizionale.
La metodica OSNA quindi dimostra una sensibilità maggiore
nella identificazione delle metastasi linfonodali rispetto alla
metodica istologica, soprattutto nel riconoscimento della
micrometastasi come già segnalato da altri AA (Castellano I.
2011)
Discussione
La valutazione degli altri linfonodi ascellari ha evidenziato
una maggiore incidenza di metastatizzazione nei casi studiati
con la metodica tradizionale
E’ probabile che con la metodica tradizionale molte metastasi
siano state sottostimate e considerate come micrometastasi
spesso poi associate a coinvolgimento ascellare
D’altra parte la metodica OSNA mostra una maggiore
sensibilità nel rilevare anche piccoli depositi di cellule epiteliali
nel LNS facendo innalzare la percentuale di micrometastasi.
A ciò sicuramente si aggiunge, almeno per il gruppo delle
micrometastasi il maggior numero di dissezioni
ascellari effettuato in precedenza rispetto alla tendenza
attuale che tende a risparmiare i linfonodi ascellari
Discussione
Nel caso del CDIS con micrometastasi (420 copie) questa
potrebbe essere una pseudometastasi, causata da
disseminazione attraverso i linfatici di cellule epiteliali dopo la
core-biopsy. Questo meccanismo è ovviamente possibile
anche nei casi di carcinomi invasivi.
In tutti questi casi il chirurgo deve considerare il valore della
micrometastasi unitamente alle caratteristiche del tumore e al
dato di una precedente biopsia per decidere se asportare o
meno altri linfonodi ed evitare un overtreatment.
La metodica OSNA dimostra una indiscutibile affidabilità da
un punto di vista diagnostico oltre ad offrire un indubbio
vantaggio per la paziente (unico tempo operatorio) ed anche
un grosso risparmio di tempo per il laboratorio e per il
patologo.
