K I T D I C O N F E R M A D E L L ’ A B U SO C R O N IC O A L C O O L IC O (C DT) CDT (Carbohydrate deficent transferrin) è un importante marker dell’abuso cronico di alcool. Essa indica un gruppo di isoforme della Transferrina sierica, la principale glicoproteina trasportatrice di Fe3+, che può contenere da 0 fino 8 residui di acido sialico. La maggior isoforma, tetrasialo-tf (>90%), contiene 4 residui di acido sialico e dopo completa saturazione con Fe3+ presenta un p.I. = 5,4. Come conseguenza di un abuso alcolico, si ha l’incremento di alcune isoforme meno glicosilate con p.I. = 5,9 (asialo-tf) e 5,7 (Dsialo-tf) che sono comunemente indicate come CDT. L’esatto meccanismo di tale fenomeno, non è stato ancora chiarito, ma si pensa che l’inibizione dell’enzima di glicosilazione, ad opera dell’acetaldeide (il principale metabolita dell’etanolo), giochi un ruolo cruciale. In letteratura è riportato come un consumo giornaliero di 50-80 g di alcool per 1-2 settimane, porti ad un abnorme incremento della CDT che è un eccellente parametro utilizzato nella medicina forense per la sua elevata specificità: incrementi di CDT sono stati segnalati solo in gravidanza, in pazienti affetti da cirrosi o da sindrome di deficienza glicoproteica (CDG sindrome). Al contrario i saggi immunoenzimatici, impiegati oggi, presentano una chiara interferenza ad opera della trisialo-tf, causa di molti falsi positivi. GD 503 MEDICINA FORENSE ONNFF KIT P/AACCEE CDT CCO gENEDIA La profonda conoscenza di una tecnica quale l’Elettroforesi Capillare, unita all’identificazione di un problema analitico di crescente attualita’ e per buona parte irrisolto, ha quantitativo suggerito a GeneDia lo sv iluppo di un metodo di analisi e di relativ o k it applicativ o in grado di superare i v istosi limiti della tecnica attualmente impiegata. A LC UNE DELLE SUE C A RA T T ERIST IC H E : • • • ••• Nessuna preparazione del campione A nalisi Diretta Separazione e v isualizzazione delle singole isoforme Facile interpretazione dei risultati • Completa automazione DA CUI NE DERIVA UNA ESTREMA SEMPLICITÀ E RA PIDITÀ DI A NA LISI SP EC IFIC H E T EC NIC H E A PPLICABILITA’: VOLUME DEL CAMPIONE: NUMERO DI TEST: T EMPI DI ESECUZIONE: C ONTENUTO DEL KIT: MATERIALI RICHIESTI: non forniti nel kit STRUMENTI RICHIESTI su campioni di siero. da 100 µl di campione 24 Determinazioni 30 minuti di incubazione, 12 minuti per la determinazione. 24 tubi per preparazione campione pronti all'uso. Soluzioni Elettrolite Soluzione Rigenerante Cartuccia con capillare per disialo transferrina A cqua distillata Micropipetta 10 –100 µl Membrane filtanti da 0.45 um INTERPRETA ZIONE DEI RISULTA TI: L’alta sensibilità unita all’elev ato potere risolutiv o di questo k it consente una rapida separazione e riv elazione delle singole frazioni della sialo-trasferrina presenti nel siero. A l termine della separazione v iene stampato un report dov e sono riportate le aree delle singole frazioni della suddetta proteina. Eseguendo un calcolo percentuale del contenuto di Disialo- transferrina rispetto alla Tetrasialo-transferrina si ottiene una stima di consumo alcolico cronico. I limiti della CDT per la definizione di abuso alcolico cronico, dev ono essere stabiliti dopo uno studio su una popolazione idonea di controllo presso il proprio laboratorio. A rea Disialo Esempio di calcolo: % Disialo= ------------------- x 100 A rea Tetrasialo p/ACE CDT conf kit GD 503 Non è detto che un problema complesso non abbia una soluzione estremamente semplice e rapida Elettrof erogramma di siero con presenza di: Disialo,Trisialo,Tetrasialo e Pentasialo, Transferrina Rev 1 11-01 GENE DIA SRL : VIA L OMBARDA, 169/ A – 55013 L AMMARI (LU) – TEL./ FAX 0583962672 – E MAIL: [email protected] L AB. R ICERCA E S VILUPPO: TRAV. P IETRAVALLE ,11– 80100 NAPOLI – TEL./ FAX 0815465026 – E MAIL: [email protected]