AB RQ MIX PCR Real Time (2x)

AB RQ MIX PCR Real Time (2x)
cod. 06-15
Descrizione:
AB RQ MIX PCR Real Time (2x) è una mix pronta all’uso validata ed ottimizzata
per Real Time PCR.
La mix, in concentrazione 2x, contiene la Taq DNA polimerasi, il buffer di
reazione, MgCl2, dNTP e dUTP.
La DNA Polimerasi inclusa è un enzima che permette un hot start automatico,
grazie alla presenza in soluzione di anticorpi monoclonali anti-Taq DNA
polimerasi. Gli anticorpi bloccano efficientemente l’attività polimerasica
dell’enzima a temperatura ambiente (20-22°C), durante l’allestimento della
reazione di amplificazione.
Il dUTP presente nella mix permette di prevenire le contaminazioni mediante
un trattamento opzionale con UDG, che rimuove i residui di uracile incorporati
in molecole di DNA a singola o doppia elica.
PCR Base Line Substracted RFU
L’utilizzo opzionale del ROX come internal passive reference permette di
compensare eventuali errori di pipettamento o di evaporazione del campione.
Cycle
Composizione:
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Taq DNA polimerasi ricombinante;
Anticorpi anti-Taq DNA polimerasi in concentrazione tale da inibire
l’attività polimerasica a temperature inferiori ai 70°C. L’inibizione
dell’enzima è completamente reversibile a temperature superiori ai
70°C;
32 mM (NH4)2SO4;
130 mM Tris-HCl (pH 8.8 a 25°C);
0.02% Tween-20;
11 mM MgCl2;
dATP, dCTP, dTTP, dGTP ognuno alla concentrazione di 0.4 mM;
dUTP 1.2 mM.
AB ANALITICA srl – PADOVA - Tel +39 049 761698 - Fax +39 049 8709510
www.abanalitica.it - [email protected]
06-15_250 e M25_Datasheet_AB RQ MIX PCR Real Time (2x)_130912
Test di prestazione e purezza:
AB RQ MIX PCR Real Time (2x) viene testata per l’assenza di endodeossiribonucleasi ed eso-deossiribonucleasi.
Le prestazioni di AB RQ Mix vengono valutate mediante Real Time PCR
quantitativa nell’amplificazione di un gene a singola copia del DNA genomico di
topo.
Presenza di Endo-deossiribonucleasi:
Dopo incubazione di 25 μl di AB RQ MIX PCR Real Time (2x) con 1 μg di pUC19
DNA per 4 ore a 37° e 70°C, non è stata osservata alcuna apprezzabile
conversione di DNA circolare in DNA lineare.
Protocollo:
L’allestimento della reazione di amplificazione può essere eseguito a temperatura
ambiente data l’inibizione della polimerasi da parte degli anticorpi anti-Taq DNA
polimerasi.
Per ciascun test di reazione miscelare:
Componente
AB RQ MIX PCR Real Time (2x)
Primer senso
Primer antisenso
DNA target
ROX (opzionale)
UDG (opzionale)
Acqua sterile
Reazione di 20 uL
Volume
10 µL
variabile
variabile
Variabile
1 µL
variabile
fino a 20 µL
Conc. finale
1X
01-1 µM
01-1 µM
10 pg-1 µg
Si consiglia uno step di attivazione della Taq DNA polimerasi a 95°C per 3
minuti.
Nel caso si decida di utilizzare l’UDG per la prevenzione delle contaminazioni, è
necessario un ciclo iniziale di 2 minuti a 50°C.
Condizioni di conservazione:
La temperatura di conservazione raccomandata è di – 20°C.
CODICE
06-15-250
06-15-M25
DESCRIZIONE
AB RQ MIX PCR Real
Time (2x)
(250 reazioni/20 µl)
AB RQ MIX PCR Real
Time (2x)
(1.250 reazioni/20 µl)
CONFEZIONE
2 x 1.25 ml
10 x 1.25 ml
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DESCRIZIONE
AB Uracil-DNA Glycosilase (UDG, 10 U/µl)
AB Uracil-DNA Glycosilase (UDG, 10 U/µl)
CONFEZIONE
200 U
1.000 U
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