Programma di “Diagnostica Batteriologica e Antibiotico Sensibilità” Introduzione alla diagnostica di laboratorio microbiologico Isolamento ed identificazioni dei principali microrganismi: generalità. Diagnosi batteriologica- diagnosi diretta- raccolta del materiale biologico, invio del campione, esame batterioscopico diretto, le colorazioni. Esame colturale: emocultura, coltura del liquor, coltura dell’espettorato, urino cultura, copro cultura. Tecniche di identificazione dei microrganismi: osservazione macroscopica, osservazione microscopica; valutazione dei caratteri fisiologici e metabolici nelle colture microbiche, identificazione mediante gallerie API. Diagnostica immunologica Identificazione dei microrganismi sulla base del genotipo: estrazione e purificazione degli acidi nucleici Tecniche di amplificazione in vitro: principi della PCR, identificazione mediante 16S rRNA. Tecniche elettroforetiche: per la separazione e degli acidi nucleici, per la separazione di proteine, per lo studio dei frammenti di macrorestrizione genomica, e per la separazione degli amplimeri di PCR. Valutazione della sensibilità agli antibiotici: generalità sugli antibiotici, MIC, MBC, Etest e antibiogrammi, metodi di esecuzione dei test e criteri interpretativi (EUCAST e CLSI). Ricerca dei geni responsabili della resistenza mediante PCR Le principali Classi di microrganismi: Esempi di valutazione di un caso: urinocoltura; tampone faringeo/ coltura dell’espettorato, emocultura.