DEFINIRE IL PROBLEMA ANALITICO
Qual è lo scopo dell’analisi?
Quale matrice?
Stato fisico, composizione, deperibilità
Quale analita?
Struttura chimica, polarità, deperibilità
Che tipo di risultati analitici? Qualitativi, quantitativi, entrambi
Quali risorse sono disponibili?
Strumentazione, personale
Quanti campioni da analizzare?
L’analisi è stata già eseguita da altri? Letteratura, metodi ufficiali
Brueghel il vecchio “ Alchimista al lavoro” metà del 16° secolo
LA MISURA
Se un metodo:
♦ è nuovo
♦ deve essere aggiornato
♦ deve essere verificato
♦ deve essere impiegato in altre condizioni
NUMERO
UNITA’ DI MISURA
INCERTEZZA
…. deve essere validato !
MISURA ANALITICA
ERRORI
VALORE VERO
MISURA
µ
x
METODO ANALITICO
GROSSOLANI
Scarsa organizzazione
SISTEMATICI
Calibrazione, uso del
metodo, personale
CASUALI
Fluttuazioni della
misura
1
VALIDAZIONE DI UN
METODO ANALITICO
AFFIDABILITA’ DI UN METODO ANALITICO
ACCURATEZZA
4 PRECISIONE
4 SENSIBILITA’
4 SELETTIVITA’
4
Fornire l’evidenza oggettiva delle
performances un certo metodo analitico
ACCURATEZZA
(Prova di recupero)
ACCURATEZZA
Misura della concordanza della media dei dati sperimentali ed
il valore vero.
Quindi misura la capacità del metodo analitico di fornire
valori di concentrazione dell’analita vicini a quelli reali.
Media delle misure
µ
x
Valore vero
a=
ANALISI
x-µ .
100
µ
IL VALORE E’ MIGLIORE QUANTO PIU’
SI AVVICIVA ALLO ZERO
PRECISIONE
MATRICE
+
ANALITA
(in quantità nota)
MISURA
% Recupero =
x
µ
. 100
PRECISIONE
Misura della concordanza tra risultati di prova indipendenti
Ripetibilità
La precisione ci permette di capire se l’analisi è stata eseguita
in modo corretto (cioè nello stesso modo).
Si calcola con la deviazione standard:
Riproducibilità
Σ ( xi - x )
n
xi = valore misurato
x = media delle misure
n = numero misurazioni
2
SENSIBILITA’
ACCURATEZZA
Risposta
∆ risp.
PRECISIONE
∆ conc.
SENSIBILITA’
SELETTIVITA’ o SPECIFICITA’
∆ risp.
S=
∆ conc.
Rappresenta la capacità di un sistema analitico di discriminare
fra i vari componenti di una miscela
A
Risposta
Conc. analita
B
∆ risp.A
C
∆ risp.B
∆ risp.C
∆ conc.
Conc. analita
ALTRI PARAMETRI
Campo di misura
4 Limiti di rilevabilità e quantificazione
4 Linearità
4
CAMPO DI MISURA
Intervallo di concentrazioni in cui il metodo ha le caratteristiche
di accuratezza e precisione dichiarate
3
LIMITE DI RILEVABILITA’
LIMITE DI QUANTIFICAZIONE
E’ la concentrazione più bassa dell’analita che può essere rilevata
ma non quantificata correttamente
E’ la concentrazione più bassa dell’analita che può essere
quantificata correttamente nelle condizioni di accuratezza
e precisione dichiarate
LINEARITA’
RETTA DI TARATURA
Risposta
Fornire risultati direttamente proporzionali alla concentrazione
dell’analita in un determinato intervallo
y= ax + b
R2= 0,999
RETTA DI TARATURA
1
2
3
4
5
Conc. analita
Risposta
y= ax + b
R2= 0,999
R?=y
I valori di validazione ottenuti sono da riferirsi a
un ben determinato analita in una ben determinata matrice
Conc.?=x
1
2
3
4
5
Conc. analita
4
