Sviluppo Sviluppo linfocitario linfocitario Scaricato da www.sunhope.it sviluppo linfocita T repertorio idiotipo TCR coorecettori CD4 CD3 CD8 Cellule con TCR verso le MHC autologhe: restrizione per le molecole MHC Cellule specifiche verso molecole autologhe Cellule che non sviluppano recettori Scaricato da www.sunhope.it -Indipendente dall'Antigene non-self differenziamento isotipo molecole accessori recettori per Ligandi CD2 CD28 CD154 CD45 LFA1 CD25 selezione positiva 2% selezione negativa 98% Lo sviluppo del linfocita T o B si produce in presenza degli antigeni self , propri, Lo sviluppo dei linfociti T è legato all' MHC autologo presente nel timo dipendente dall'Ag-self Scaricato da www.sunhope.it Sviluppo Sviluppo linfocitario linfocitario midollo midolloosseo osseo Cellula Cellulastaminale staminaleematopoietica ematopoietica Precursore Precursore eritro-mieloide eritro-mieloidecomune comune Precursore Precursorelinfocitario linfocitariocomune comune Monocita PERIFERIA PERIFERIA Cellula Dendritica, Macrofagi, (APC professiona li) ecc. Scaricato da www.sunhope.it Linfociti B Cellula Dendritica Timo Timo Linfociti NK Linfociti T Linfonodi Lo sviluppo embrionale 3 tasca faringea 4 endoderma fessura branchiale canale faringo brachiale ectoderma epitelio midollare Scaricato da www.sunhope.it Timo epitelio corticale canale ectobrachiale T I M O organo linfatico primario Scaricato da www.sunhope.it Lo sviluppo del Timo è necessario per lo sviluppo dei linfociti T atrofia atrofiatimica timicaooatimia atimia alterazioni nell'uomo sindrome di Di George ( 22q11del) gene per il fattore T-Box1 nel topo la distruzione del timo sperimentale in età neonatale topo nudo influenza la zona corticale paracorticale del linfonodo follicolo primario Timo dipendente capsula corticale follicolo secondario centro germinativo Scaricato da www.sunhope.it IlIltrapianto trapiantodiditimo timoinintopo toponudo nudo ripristina ripristinalolosviluppo sviluppodidilinfociti linfocitiTT Scaricato da www.sunhope.it Prime Primetappe tappeper perlalascelta sceltaverso verso lalamaturazione maturazionelinfocitaria linfocitaria T: NOCTH1 > HEB/E2A NK: NOCTH1 > ID2 pDC: HEB/E2A Scaricato da www.sunhope.it c-kit decisione B o T sviluppo stimolo dalle cellule epiteliali Scaricato da www.sunhope.it IL7 CD3 CD8 CD4 DP CD3 + CD8 + CD4 + SP CD3+ CD8+ CD3+ CD4+ Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it TREC Scaricato da www.sunhope.it IlIlgene genedelle delleregioni regionivariabili variabili del delTCR TCRèècomposto compostoda danumerosi numerositratti trattiesonici esonici Locus 5' Chr7 β V β1 L Locus α−δ 5' L Chr14 5' L L n=6 n=6 Dβ 1 J βn C β1 Dβ 2 J βn Cβ 2 n=50 Vα L Locus n>75 = Vβ n L n=3 Vδ n γ Chr7 V1 regione Variabile Scaricato da www.sunhope.it L VVα n>70 Jn Dδ n J δn C δ n=3 n=3 L n>8 = V Vn n=3 3' 3' Cα V δ4 n=2 J γn C γ1 J γn Cγ 2 regione Costante Locus 5' β L L Chr7 n=6 n=6 Dβ 1 J βn C β1 Dβ 2 J βn Cβ 2 L n>75 = Vβ n n=6 Dβ 1 J β6 C β1 Dβ 2 J βn Cβ 2 V β1 n-1=5 Dβ 1 J βn-1 5' L L n>75 = Vβ n V β1 n>75 = Vβ n Scaricato da www.sunhope.it 5' L V β1 Dβ 1 J β6 C β1 Dβ 2 J βn Cβ 2 3' DN Scaricato da www.sunhope.it topi trangenici inducono il blocco di sviluppo del recettore di tipo diverso i isegnali segnaliprovenienti provenientidalla dallasuperfice superficedel dellinfocita linfocitaproducono: producono: sopravvivenza differenziamento sopravvivenza differenziamento esclusione proliferazione esclusioneallelica allelica proliferazione molecole di adesione: CD4 4=super famiglia Link, lega acido ialuronico super famiglia Ig, integrine, selectine, addressine, recettore per Fattori di Crescita cKit Scaricato da www.sunhope.it IL7R famiglia recettori TNF pre TCR TCR Scaricato da www.sunhope.it I fattori Repressori silenziamento genico I fattori trascrizionali deacetilazione metilazione acetilazione accessibilità della polimerasi Scaricato da www.sunhope.it Selezione Selezionepositiva positiva a topo irradiato MHC cellule midollo donatore eterozigote MHCaxb a sviluppa cellule T con TCR ristretto MHC rispondono solo verso antigeni su APC MHCa topo nudo MHCaxb trapiantato con timo MHCa rispondono solo verso antigeni su APC MHCa Selezione Selezione dovuta dovuta aa cellule cellule del del TIMO TIMO Scaricato da www.sunhope.it Restrizione Restrizioneper perMHC MHCavviene avvienenello nellosviluppo sviluppotimico timico trapianto di cellule midollo MHCa b MHC in topi non avranno una risposta corretta verso le APC le APC derivano dal midollo APCa selezione positiva = restrizione per MHC coincidono nello sviluppo timico Scaricato da www.sunhope.it topo MHCa topo MHCaxb midollo MHCaxb topo MHC a Le Lecellule cellulederivate derivatedal dalmidollo midollo sono sono capaci capaci didi promuovere promuovere lala selezione selezionenegativa negativa topo MHCaxb topo MHCb trapianto cute topo MHCa APC MHCaxb topo MHCaxb topo MHCb trapianto tollerato topo MHCa APC MHCaxb Scaricato da www.sunhope.it lelecellule celluletimiche timichepromuovono promuovonolalaselezione selezionenegativa negativadei deiLinfociti LinfocitiCD4+ CD4+ Deossiguanosina Deossiguanosina Uccide Uccidecellule celluleoriginate originate del midollo osseo del midollo osseo Scaricato da www.sunhope.it restrizione restrizioneper perclasse classeMHC MHCdovuta dovutaaacellule celluledel delTIMO TIMO InIncoltura coltura cellule timiche anti-CD8 T CD4 CD8 T linf.CD4&CD8 InIncoltura coltura cellule timiche anti-CD4 T CD8 CD4 T linf.CD4&CD8 A Kruisbeck Scaricato da www.sunhope.it TOPI TOPIKNOCKOUT KNOCKOUT MHCI MHCII WT H-2d H-2k CD8- 4CD8+ 4+ CD8+ CD4+ TOPO TOPOTRANSGENICO TRANSGENICO TCR H-2k CD8+ 4+ CD8+ Scaricato da www.sunhope.it H von Boehemer & P Kisielow, Science, 1990 Scaricato da www.sunhope.it ipotesi ipotesidell'avidità dell'avidità ipotesi ipotesidel delsegnale segnalediverso diverso culture cultured'organo d'organotimico timicofetale fetale +peptidi +peptidi timo da topi con difetti TAP TCR pept A MHC pept A TCR pept A MHC pept B in eccesso TCR pept A MHC solo Scaricato da www.sunhope.it TCR CD4/ PEPTIDE CD8 MHC Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Una via per il differenziamento B-cell e i fattori microambientali richiesti nel midollo osseo Haematopoietic stem cells (HSCs) haematopoietic multipotential progenitors (MPPs) Lymphoid-primed multipotential progenitors (LMPPs) Scaricato da www.sunhope.it CD44 Ac. Ialuronico Scaricato da www.sunhope.it CXCL12 (also known as SDF1 and PBSF) CXCL12 is CXC-chemokine receptor 4 (CXCR4) Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it Scaricato da www.sunhope.it feto proliferazione linfociti B CD5+ CD72 neonato linfociti B CD5- adulto NFkB MHC II DR MHC II DR CD 10, CD40, CD38 Scaricato da www.sunhope.it NFkB NFkB MHC II DR MHC II DR CD 10, CD40, CD40, CD38, CD20 CD38, CD20, CD21 CD40, CD38, CD20, CD21 linfociti B convenzionali proprietà B-1 B-2 Inizio produzione feto Dopo la nascita Flessibilità giunzionale tipo N poche estesa Repertorio V ristretto vario localizzazione Cavità(Peritoneo,pleura ) Organi linfoidi rinnovo auto-rigenerazione Dal midollo Produzione spontanea di Alta Ig Bassa Isotipi di Ig secreti IgM >>>IgG IgG IgA IgE > IgM Risposta ai polisaccaridi Sì non certa Agli antigeni proteici Non certa Sì Cooperazione con i T linfociti No Sì Ipermutazione somatica Assente o bassa Alta Memoria Assente o bassa Sì Scaricato da www.sunhope.it Esclusione Esclusioneallelica allelica-idiotipica -idiotipica Editing Editingrecettore recettorecoinvolge coinvolgeiitratti trattidelle dellecatene cateneKappa Kappaee Lambda Lambda Evasione Evasionealle alledelezione delezioneclonale clonale Scaricato da www.sunhope.it Locus 5' L H box promotore n>200 = V1 P L P Vn box intensificatore n>6 n>20 Jn D1 Dn 3' C E 3' C espressione espressione proteine proteine regolatrici regolatrici 5' L n>20 P P D1 Dn P V1 P L Vn mRNA riaggiamento riaggiamento DJ DJ P 5' L V1 P L Vn mRNA riaggiamento riaggiamento V-DJ V-DJ P 5' L V1 P Scaricato da www.sunhope.it L Jn mRNA E P P D1J2 Jn mRNA Vn D1J2 Jn mRNA E C C 3' Scaricato da www.sunhope.it