Romane 1 15-10-2008 13:06 Pagina v Indice Prefazione all’edizione americana x Gli autori xii Prefazione all’edizione italiana xiii La mappa dei contenuti xiv Presentazione di questo volume xvii Guida al testo xix Volume 1 Microbiologia generale 1 4.6 L’assunzione di nutrienti da parte della cellula 79 4.7 Terreni di coltura 84 ■ Nota storica 4.1: La scoperta dell’agar come agente solidificante e della tecnica per isolare colture pure 85 4.8 L’isolamento di colture pure 86 ■ Tecniche e applicazioni 4.2: Arricchimento e isolamento di colture pure 88 Storia e scopo della microbiologia 1 1.1 La scoperta dei microrganismi 2 1.2 La disputa sulla generazione spontanea 2 1.3 Il ruolo dei microrganismi nelle malattie 6 ■ Tecniche e applicazioni 1.1: Il metodo scientifico 7 ■ Malattie 1.2: I postulati di Koch in chiave molecolare 8 1.4 Microbiologia industriale ed ecologia microbica 9 1.5 I membri del mondo microbico 10 1.6 Scopo e importanza della microbiologia 11 1.7 Il futuro della microbiologia 13 2 Lo studio della struttura microbica: le tecniche di microscopia e l’allestimento dei campioni biologici 15 2.1 2.2 2.3 2.4 2.5 Le lenti e la deviazione della luce 15 Il microscopio ottico 16 Preparazione e colorazione dei campioni 23 Microscopia elettronica 26 Nuove tecniche di microscopia 31 3 Struttura e funzione della cellula procariotica 35 3.1 La struttura della cellula procariotica: quadro generale 35 ■ Diversità ed ecologia microbica 3.1: Microbi mostruosamente grandi 38 3.2 Le membrane cellulari dei procarioti 40 3.3 La matrice citoplasmatica 44 ■ Diversità ed ecologia microbica 3.2: Magneti viventi 48 3.4 Il nucleoide 49 3.5 I plasmidi 50 3.6 La parete cellulare batterica 51 3.7 Pareti cellulari degli Archea 59 3.8 Secrezione proteica nei procarioti 60 3.9 Componenti esterni alla parete cellulare 62 3.10 La chemiotassi 69 3.11 L’endospora batterica 71 4 La nutrizione microbica 75 4.1 4.2 4.3 4.4 4.5 Le richieste nutrizionali comuni 75 Le richieste di carbonio, idrogeno e ossigeno 76 Tipi nutrizionali dei microrganismi 76 Le richieste di azoto, fosforo e zolfo 78 I fattori di crescita 78 5 La crescita microbica 91 5.1 5.2 5.3 5.4 5.5 5.6 Il ciclo cellulare degli organismi procarioti 91 La curva di crescita 95 Misurazione della crescita microbica 100 La coltura continua di microrganismi 103 Influenza dei fattori ambientali sulla crescita microbica 104 La crescita microbica negli ambienti naturali 115 6 Controllo dei microrganismi mediante agenti fisici e chimici 123 6.1 Definizione di termini usati di frequente 123 ■ Tecniche e applicazioni 6.1: La sicurezza nel laboratorio di microbiologia 124 6.2 La curva di mortalità microbica 125 6.3 Le condizioni che influenzano l’efficacia di un agente antimicrobico 126 6.4 Metodi di controllo fisici 126 6.5 Agenti di controllo chimici 132 ■ Tecniche e applicazioni 6.2: Norme precauzionali valide per i laboratori di microbiologia 132 6.6 Valutazione dell’efficacia degli agenti antimicrobici 137 7 Il metabolismo: rilascio e conservazione dell’energia 139 7.1 Una visione d’insieme del metabolismo 139 7.2 La degradazione del glucosio ad acido piruvico 142 7.3 Le fermentazioni 146 ■ Nota storica 7.1: La microbiologia e la I Guerra Mondiale 148 7.4 Il ciclo degli acidi tricarbossilici 148 7.5 Il trasporto degli elettroni e la fosforilazione ossidativa 150 7.6 La respirazione anaerobica 156 7.7 Il catabolismo dei carboidrati e i polimeri di riserva intracellulari 157 7.8 Il catabolismo dei lipidi 158 7.9 Il catabolismo delle proteine e degli aminoacidi 158 7.10 L’ossidazione delle molecole inorganiche 159 7.11 La fotosintesi 160 ■ Diversità ed ecologia microbica 7.2: Gli scarichi acidi delle miniere 161 Romane 1 15-10-2008 vi 13:06 Pagina vi Indice ■ Nota storica 13.1: Prime fasi della colonizzazione americana e diffusione di malattie 302 13.2 Proprietà generali dei virus 303 13.3 Coltivazione dei virus 303 13.4 Purificazione dei virus e metodi di saggio 305 13.5 Struttura dei virus 308 13.6 Principi di tassonomia virale 317 ■ Recenti sviluppi della microbiologia 13.2: Origine dei virus 317 8 Il metabolismo: l’utilizzo dell’energia nelle biosintesi 169 8.1 I principi che governano le biosintesi 170 ■ Tecniche e applicazioni 8.1: L’identificazione delle vie anaboliche 171 8.2 La fissazione fotosintetica di CO2 172 8.3 La sintesi di zuccheri e polisaccaridi 173 8.4 L’assimilazione di azoto, fosforo e zolfo inorganici 174 8.5 La sintesi degli aminoacidi 178 8.6 Le reazioni anaplerotiche 180 8.7 La sintesi di purine, pirimidine e nucleotidi 181 8.8 La sintesi dei lipidi 182 8.9 Sintesi del peptidoglicano 184 8.10 I meccanismi di formazione della parete cellulare 187 9 Espressione genica 189 9.1 La trascrizione del DNA ossia la sintesi dell’RNA 189 ■ Recenti sviluppi della microbiologia 9.1: L’RNA catalitico (i ribozimi) 196 9.2 La sintesi proteica 197 10 La genetica dei microbi: la regolazione dell’espressione genica 211 10.1 I livelli di regolazione dell’espressione genica 212 10.2 La regolazione dell’inizio della trascrizione 213 ■ Nota storica 10.1: La scoperta della regolazione genica 214 10.3 La regolazione dell’allungamento della trascrizione 223 10.4 La regolazione a livello della traduzione 226 10.5 I sistemi di regolazione globale 227 10.6 La regolazione dell’espressione genica in Eucarya e Erchaea 234 11 Genetica microbica: meccanismi di alterazione genetica 237 11.1 11.2 11.3 11.4 11.5 11.6 11.7 11.8 11.9 11.10 11.11 12 Genomica microbica 12.1 12.2 12.3 12.4 12.5 12.6 12.7 12.8 13 Le mutazioni e la loro base chimica 237 Riconoscimento e isolamento dei mutanti 244 Riparazione del DNA 247 Come si origina la variabilità genetica 250 Elementi trasponibili 253 Plasmidi batterici 257 Coniugazione batterica 263 Trasformazione del DNA 268 Trasduzione 271 Mappatura del genoma 276 Ricombinazione e mappatura dei genomi virali 279 283 Introduzione 283 Determinazione delle sequenze di DNA 284 “Whole-genome shotgun sequencing” 285 Bioinformatica 286 Caratteristiche generali dei genomi microbici 287 Genomica funzionale 292 Il futuro della genomica 297 Genomica ambientale 297 Virus: introduzione e caratteristiche generali 301 13.1 Origine della virologia 302 14 Virus: i batteriofagi 319 14.1 Classificazione dei batteriofagi 319 ■ Diversità ed ecologia microbica 14.1: Un mare di virus 320 14.2 Riproduzione dei fagi dotati di DNA a doppio filamento: il ciclo litico 320 14.3 Riproduzione dei fagi dotati di DNA a singolo filamento 327 14.4 Riproduzione dei fagi a RNA 327 14.5 Batteriofagi temperati e lisogenia 328 15 I virus: rilascio e conservazione dell’energia 337 15.1 Classificazione dei virus animali 337 15.2 Riproduzione dei virus animali 338 ■ Tecniche e applicazioni 15.1: Costruzione di un virus 346 15.3 Infezioni citocide e danno cellulare 348 15.4 Infezioni virali persistenti, latenti e lente 349 15.5 Virus e cancro 350 15.6 Virus vegetali 351 15.7 Virus dei funghi, delle alghe e dei protozoi 354 15.8 Virus degli insetti 354 15.9 Viroidi e prioni 355 Appendice A-1 Tassonomia e filogenesi dei microrganismi Bibliografia Glossario Crediti B-1 G-1 C-1 Indice analitico I-1 Volume 2 Microbiologia sistematica, ecologica, industriale 16 Tassonomia e filogenesi dei microrganismi 1 16.1 Introduzione generale e uno sguardo d’insieme 1 16.2 Evoluzione e diversità dei microrganismi 2 16.3 Categorie tassonomiche (Taxa) 4 16.4 Sistemi di classificazione 5 16.5 Principali caratteri impiegati nella tassonomia 8 16.6 Valutazione della filogenesi dei microrganismi 12 16.7 Le principali divisioni degli organismi viventi 15 16.8 Il Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology 18 ■ Diversità ed ecologia microbica 16.1: Liste “ufficiali” di nomenclatura: una lettera dal Bergey’s 20 16.9 Uno sguardo d’insieme alla filogenesi e alla diversità dei procarioti 23 Romane 1 15-10-2008 13:06 Pagina vii Indice 17 Gli Archebatteri 22.6 Classificazione dei protisti 123 ■ Malattie 22.1: Fioriture algali tossiche (Harmful Algal Blooms HABs) 133 ■ Tecniche e applicazioni 22.2: L’importanza pratica delle diatomee 137 27 17.1 Introduzione agli archebatteri 27 17.2 Il phylum dei Crenarcheoti 31 17.3 Il phylum dei Euriarcheoti 34 ■ Diversità ed ecologia microbica 17.1: La filogenesi degli archebatteri: molto più che Crenarcheoti ed Euriarcheoti? 35 ■ Diversità ed ecologia microbica 17.2: Archebatteri Metanotrofici 37 23 I funghi (Eumycota) 23.1 23.2 23.3 23.4 23.5 23.6 18 I batteri: i deinococchi e i Gram-negativi non-proteobatteri 43 18.1 Aquificae e Thermotogae 43 18.2 Deinococcus-thermus 44 18.3 I batteri fotosintetici 45 ■ Diversità ed ecologia microbica 18.1: Il meccanismo della motilità strisciante 50 18.4 Il phylum Planctomycetes 52 18.5 Il phylum Clamydiae 53 18.6 Il phylum Spirochaetes 55 18.7 Il phylum Bacteroidetes 56 24 20.1 Introduzione generale 89 20.2 La classe Mollicutes (i micoplasmi) 90 20.3 Struttura del peptidoglicano e delle endospore 92 ■ Diversità ed ecologia microbica 20.1: Spore nello spazio 94 20.4 La classe Clostridia 94 20.5 La classe Bacilli 96 21 I batteri: i Gram-positivi con alto G + C 105 21.1 21.2 21.3 21.4 21.5 21.6 21.7 21.8 21.9 21.10 Caratteristiche generali degli attinomiceti Il sottordine Actinomycineae 109 Il sottordine Micrococcineae 110 Il sottordine Corynebacterineae 111 Il sottordine Micromonosporineae 113 Il sottordine Propionibacterinea 113 Il sottordine Streptomycineae 113 Il sottordine Streptosporangineae 116 Il sottordine Frankineae 117 L’ordine Bifidobacteriales 117 22 I protisti 22.1 22.2 22.3 22.4 22.5 119 Distribuzione 119 Nutrizione 120 Morfologia 121 Incistamento ed excistamento Riproduzione 122 122 105 I cicli biogeochimici. Introduzione all’ecologia microbica 147 155 Fondamenti di diversità e di ecologia microbica 155 ■ Diversità ed ecologia microbica 24.1: L’ecologia microbica in confronto alla microbiologia ambientale 156 24.2 I cicli biogeochimici 156 24.3 L’ambiente fisico 166 24.4 L’ecologia microbica e i suoi metodi: una panoramica 170 25 20 I batteri: i Gram-positivi con basso G + C 89 141 Distribuzione 141 Importanza 142 Struttura 143 Nutrizione e metabolismo 145 Riproduzione 145 Caratteristiche delle divisioni fungine 24.1 19 I batteri: i proteobatteri 61 19.1 La classe Alphaproteobacteria 62 19.2 La classe Betaproteobacteria 69 19.3 La classe Gammaproteobacteria 72 ■ Diversità ed ecologia microbica 19.1: Bioluminescenza batterica 79 19.4 La classe Deltaproteobacteria 82 19.5 La classe Epsilonproteobacteria 87 vii I microrganismi negli ambienti marini e di acqua dolce 177 25.1 Gli ambienti marini e di acqua dolce 177 ■ Malattie 25.1: Nuovi agenti in medicina. Il mare come nuova frontiera 178 25.2 Gli adattamenti microbici agli ambienti marini e di acqua dolce 181 25.3 I microrganismi negli ambienti marini 183 25.4 Microrganismi negli ambienti di acqua dolce 192 26 Le comunità microbiche negli ambienti terrestri 197 26.1 I suoli come ambiente per i microrganismi 197 26.2 Suoli, piante e nutrienti 199 ■ Recenti sviluppi della microbiologia 26.1: Un esperimento casuale sull’azoto su scala globale 201 26.3 I microrganismi nell’ambiente suolo 202 26.4 I microrganismi e la formazione di diversi tipi di suolo 203 26.5 Associazioni dei microrganismi del suolo con le piante vascolari 206 ■ Diversità ed ecologia microbica 26.2: Le micorrize e l’evoluzione delle piante vascolari 208 26.6 I microrganismi nel suolo e nell’atmosfera 218 ■ Diversità ed ecologia microbica 26.3: Suoli, termiti, microrganismi intestinali e metano atmosferico 219 ■ Tecniche e applicazioni 26.4: Come mantenere salubre l’aria degli ambienti interni con i microrganismi del suolo 220 26.7 La biosfera sotterranea 221 26.8 Microrganismi del suolo e salute umana 223 Romane 1 15-10-2008 viii 13:06 Pagina viii Indice 27 Interazioni microbiche Crediti 225 27.1 Interazioni microbiche 225 ■ Diversità ed ecologia microbica 27.1: Wolbachia pipientis: il microrganismo più infettivo del mondo? 228 ■ Diversità ed ecologia microbica 27.2: Coevoluzione di animali e delle comunità microbiche del loro tratto intestinale 233 27.2 Interazioni uomo-microrganismo 241 27.3 Microbioti normali del corpo umano 242 ■ Tecniche e applicazioni 27.3: Probiotici per uomini e animali 246 28 Microbiologia degli alimenti 249 28.1 Proliferazione microbica negli alimenti 250 28.2 Crescita microbica e deterioramento alimentare 252 28.3 Controllo del deterioramento alimentare 254 ■ Nota storica 28.1: Un esercito in marcia visto dal suo stomaco 256 28.4 Malattie a trasmissione alimentare 258 ■ Nota storica 28.2: Febbre tifoide e carne in scatola 259 28.5 Identificazione dei microrganismi patogeni trasmessi per via alimentare 261 28.6 Microbiologia degli alimenti fermentati 262 ■ Tecniche e applicazioni 28.3: Colture starter, infezioni da batteriofagi e plasmidi 263 28.7 Microrganismi come alimenti e integratori alimentari 269 29 Microbiologia e biotecnologie industriali 273 29.1 Potabilizzazione e analisi microbiologica dell’acqua 274 ■ Tecniche e applicazioni 29.1: Malattie di origine idrica, forniture idriche e filtrazione lenta a sabbia 275 29.2 Trattamento delle acque reflue 278 29.3 Selezione dei microrganismi adatti per la microbiologia e le biotecnologie industriali 284 ■ Tecniche e applicazioni 29.2: Le potenzialità degli archeobatteri termofili nelle biotecnologie 285 29.4 Crescita dei microrganismi in ambienti controllati 291 29.5 Principali prodotti della microbiologia industriale 294 29.6 La crescita microbica in ambienti naturali complessi 299 ■ Diversità ed ecologia microbica 29.3: I metanogeni: un nuovo ruolo per un gruppo microbico unico 302 ■ Diversità ed ecologia microbica 29.4: Un fungo dall’appetito insaziabile 305 29.7 Applicazioni di biotecnologia 306 ■ Tecniche e applicazioni 29.5: Biotecnologia e legame streptavidina-biotina 307 29.8 Effetti delle biotecnologie microbiche 309 Appendice A Classificazione dei procarioti secondo il Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, seconda edizione A-1 Appendice B Classificazione dei virus Bibliografia Glossario B-1 G-1 A-12 C-1 Indice analitico I-1 Volume 3 Microbiologia medica 30 Immunità aspecifica (innata) 1 30.1 30.2 30.3 30.4 30.5 30.6 Stato di resistenza dell’ospite: visione d’insieme 1 Cellule, tessuti e organi del sistema immunitario 2 Fagocitosi 9 Infiammazione 13 Barriere fisiche nella resistenza aspecifica (innata) 15 Mediatori chimici nella resistenza aspecifica (innata) 20 31 Immunità specifica (acquisita) 31 31.1 Immunità specifica (acquisita): visione d’insieme 32 31.2 Antigeni 32 31.3 Forme di immunità specifica (adattativa) 35 31.4 Riconoscimento di materiale estraneo 36 ■ Tecniche e applicazioni 31.1: Selezione di donatori per trapianti d’organo e di tessuto 37 31.5 Biologia dei linfociti T 39 31.6 Biologia dei linfociti B 45 31.7 Anticorpi 48 31.8 Funzione degli anticorpi 58 ■ Tecniche e applicazioni 31.2: Anticorpi monoclonali 59 31.9 Sintesi: il ruolo degli anticorpi e dei linfociti nella difesa immunitaria 61 31.10 Immunotolleranza acquisita 62 31.11 Disordini immunitari 62 32 Patogenicità dei microrganismi 73 32.1 Relazioni ospite-parassita 73 32.2 Patogenesi delle malattie virali 76 32.3 Patogenesi delle malattie batteriche 78 32.4 Difese antimicrobiche dell’ospite 88 ■ Tecniche e applicazioni 32.1: Rilevazione e rimozione delle endotossine 32.5 Meccanismi microbici per sfuggire alle difese dell’ospite 90 33 Chemioterapia antimicrobica 89 93 33.1 Lo sviluppo della chemioterapia 93 33.2 Caratteristiche generali dei farmaci antimicrobici 94 ■ Tecniche e applicazioni 33.1: Utilizzo degli antibiotici nella ricerca microbiologica 95 33.3 Determinazione del livello di attività antimicrobica 96 33.4 Meccanismi di azione degli agenti antimicrobici 99 33.5 Fattori che influenzano l’efficacia dei farmaci antimicrobici 100 33.6 I farmaci antibatterici 100 33.7 La farmacoresistenza 107 ■ Malattie 33.2: Uso scorretto degli antibiotici e farmacoresistenza 108 33.8 I farmaci antifungini 110 33.9 I farmaci antivirali 112 33.10 I farmaci antiprotozoari 113 Romane 1 15-10-2008 13:06 Pagina ix Indice 34 Microbiologia e immunologia clinica 117 34.1 Campioni 117 ■ Tecniche e applicazioni 34.1: Regole pratiche standard per laboratori di microbiologia clinica 119 34.2 Identificazione dei microrganismi all’interno dei campioni 122 ■ Diversità ed ecologia microbica 34.2: Biosensori: il futuro è ora 123 34.3 Immunologia clinica 134 ■ Tecniche e applicazioni 34.3: Storia e importanza della sierotipizzazione 135 34.4 Analisi di sensibilità 141 34.5 L’informatica in microbiologia clinica 141 35 L’epidemiologia delle malattie infettive ■ 143 Nota storica 35.1: John Snow: il primo epidemiologo 144 35.1 Terminologia epidemiologica 144 35.2 Indici di frequenza: gli strumenti a disposizione degli epidemiologi 145 35.3 Riconoscimento di una malattia infettiva all’interno di una popolazione 146 35.4 Riconoscimento di un’epidemia 147 ■ Nota storica 35.2: ”Mary tifoide“ 147 35.5 Il ciclo infettivo: storia di una malattia 149 ■ Nota storica 35.3: Le prime segnalazioni di diffusione di una malattia infettiva da persona a persona 154 35.6 Virulenza e modalità di trasmissione 155 35.7 Malattie infettive e patogeni emergenti e riemergenti 156 35.8 Controllo delle epidemie 159 ■ Nota storica 35.4: Le prime immunizzazioni 160 35.9 Biodifesa: lotta e strategie contro il bioterrorismo 163 ■ Nota storica 35.5: 1346: la prima documentazione storica di un attentato terroristico biologico 164 35.10 Viaggi transcontinentali e considerazioni di salute pubblica 166 35.11 Infezioni nosocomiali 167 36 Patologie umane causate da virus e prioni ix 171 36.1 Malattie a trasmissione aerea 171 ■ Malattie 36.1: La sindrome di Reye e di Guillain-Barré 175 36.2 Malattie trasmesse da artropodi 182 ■ Malattie 36.2: Febbri emorragiche virali: una lezione di storia della microbiologia 183 36.3 Malattie trasmesse per contatto diretto 186 36.4 Malattie trasmesse per via alimentare e idrica 198 ■ Nota storica 36.3: Breve storia della poliomielite 200 36.5 Zoonosi 201 36.6 Malattie da prioni 203 37 Patologie umane causate da batteri 207 37.1 Malattie a trasmissione aerea 208 37.2 Malattie trasmesse da artropodi 219 ■ Nota storica 37.1: I rischi della ricerca microbiologica 222 37.3 Malattie trasmesse per contatto diretto 225 ■ Malattie 37.2: Biofilm 229 ■ Malattie 37.3: Stafilococchi antibiotico-resistenti 232 ■ Malattie 37.4: Breve storia della sifilide 232 37.4 Malattie trasmesse per via alimentare e idrica 238 ■ Tecniche e applicazioni 37.5: Le tossine dei clostridi come agenti terapeutici. I benefici derivanti dalle proteine più tossiche presenti in natura 242 37.5 Sepsi e shock settico 247 37.6 Zoonosi 249 37.7 Infezioni dentali 252 38 Patologie umane causate da funghi e protozoi 257 38.1 Funghi e protozoi patogeni 257 38.2 Malattie trasmesse per via aerea 260 38.3 Malattie trasmesse da artropodi vettori 262 ■ Malattie 38.1: Breve storia della malaria 263 38.4 Malattie trasmesse per contatto diretto 267 38.5 Malattie trasmesse per via alimentare e idrica 269 38.6 Malattie opportunistiche 274 ■ Malattie 38.2: L’emergenza candidosi 275 Bibliografia Glossario Crediti B-1 G-1 C-1 Indice analitico I-1