Tecniche di estrazione del DNA genomico e applicazioni Successivamente si aggiunge resina e cloroformio, per poi centrifugare; si ottiene così nella parte superiore il DNA, che verrà precipitato mediante isopropanolo freddo. Il DNA ottenuto viene, quindi, solubilizzato in acqua e visualizzato tramite elettroforesi. La foglia congelata e sminuzzata viene posta nel mortaio per ridurla in polvere ed in seguito posta in un tubo da centrifuga con le soluzione I, II e RNAsi, al fine di provocare la lisi cellulare ed eliminare l’RNA. Elettroforesi del DNA L’elettroforesi su gel di agarosio è il metodo standard utilizzato per separare tramite un campo elettrico frammenti di DNA di differente lunghezza. Il DNA viene reso visibile mediante una molecola fluorescente che si intercala nella doppia elica Enzimi di restrizione Gli enzimi di restrizione tagliano, in corrispondenza di siti di restrizione (sequenze di DNA che vanno da quattro a otto nucleotidi), composti da sequenze palindromiche, ossia dotate di simmetria bilaterale nella composizione nucleotidica. Gli enzimi di restrizione sono in grado di ‘tagliare’ la doppia elica del DNA, agiscono quindi come forbici. Analisi Forense La genetica forense è la disciplina che si avvale delle scoperte genetiche per indagare sui fatti connessi con l’attività giudiziaria, politica e penale. Utilizza l’analisi delle differenze nelle lunghezze dei frammenti di restrizione, causate da perdita o guadagno di siti di restrizione nel DNA. S.C S2 S1 S3 S4 1. 2. 3. SC: scena del crimine Sn: sospettati Estrazione del DNA Digestione con enzimi di restrizione Analisi elettroforetica Colpevole Realizzato da: Giulia Foti, Flavia Pensabene (Liceo Classico Thomas More)