basali forma

PROGETTI A CONCORSO 2009-2010 - VINCITORI
PROGETTO N. 8
CDR / 160/03
RESPONSABILE PROGETTO: PAOLA BIANCHI
FINANZIAMENTO: € 50.000,00
Titolo del progetto: Espressione genica di Toll-like receptors (TLRs) nella leucemia linfatica
cronica: relazione con l’andamento clinico e la sopravvivenza della malattia.
Sinossi del progetto
I Toll-like receptors (TLRs) sono molecole costimolatorie espresse dalle cellule del sistema
immunitario, la cui importanza nel riconoscimento dei patogeni e attivazione dell’immunità innata e
specifica, ha recentemente suscitato un grande interesse. La principale funzione dei TLRs è quella
di attivare direttamente il sistema immunitario in risposta ad agenti microbici e virali, inducendo la
produzione di diverse citochine e chemochine, che costituiscono la risposta infiammatoria acuta
all’infezione. Inoltre, alcune recenti evidenze della letteratura suggeriscono che i TLRs sono
coinvolti nel riconoscimento di antigeni del self e quindi nella genesi dei fenomeni autoimmuni.
La leucemia linfatica cronica (LLC) è la forma più frequente di emopatia maligna nei paesi
occidentali. Da un punto di vista biologico è caratterizzata da un deficit dell’apoptosi con
conseguente accumulo di B linfociti in uno stato pre-apoptotico. Clinicamente, si osservano
frequenti fenomeni autoimmuni ed un immunodeficit responsabile di infezioni anche letali. La LLC
ha un decorso estremamente variabile e negli ultimi anni sono stati studiati diversi possibili
predittori di prognosi (stato mutazionale delle regioni VH delle Ig, CD38, ZAP70, alterazioni
citogenetiche). Tuttavia, la sopravvivenza dei pazienti con LLC sembra più direttamente correlata
alle complicanze infettive che non alla progressione di malattia.
L’obiettivo del progetto è lo studio dell’espressione genica dei TLRs nei pazienti con LLC,
correlando tale espressione con noti predittori di prognosi, nonché con l’andamento clinico della
malattia.
Tutte le neodiagnosi di LLC e i pazienti attualmente in carico e non trattati afferenti al Dipartimento
di Ematologia verranno arruolati prospetticamente nello studio. I pazienti verranno seguiti dal
Dipartimento di Ematologia, con particolare riferimento ad episodi infettivi e terapie eseguite.
L’espressione dei TLRs verrà studiata in colture di linfociti B in condizioni basali e dopo stimoli
che mimino infezioni batteriche e virali (lipopolisaccaride, flagellina derivata da salmonella
typhimurium, oligonucleotidi contenenti CpG). Verranno valutati i TLRs maggiormente espressi dai
linfociti B, che sono anche le cellule patologicamente accumulate nella LLC, in particolare TLR 4,
TLR 9 e TLR 10. L’espressione genica dei TLR verrà valutata mediante quantizzazione dell’RNA
specifico (real time-PCR). Inoltre, i TLRs verranno valutati in citofluorimetria utilizzando specifici
anticorpi monoclonali disponibili in commercio. Infine, per evidenziare una eventuale associazione
con la suscettibilità a determinate infezioni, si valuterà la presenza di polimorfismi di un singolo
U. O. EMATOLOGIA 2 - Direttore: Prof. Alberto Zanella.- Via F. Sforza, 35 – 20122 Milano
Tel. 02 55033425-26; Fax 02 55033439; e-mail: [email protected]
nucleotide (SNPs) all’interno dei geni codificanti i TLRs, mediante PCR e sequenziamento diretto
del gene.
Ci sono attualmente in follow-up più di 300 pazienti con LLC (Ematologia 1 + Ematologia 2), di
cui circa la metà non è mai stato trattato ed è seguito da più di 5 anni. Il numero di
neodiagnosi/anno è di circa 30-40 pazienti.
La diagnosi di LLC è divenuta più frequente e precoce negli ultimi anni grazie alla medicina
preventiva. La prognosi di questa malattia è molto variabile, con forme indolenti che non
richiederanno alcuna terapia e forme a rapida evoluzione che richiedono terapie aggressive, dove la
prognosi quoad vitam è legata anche alla gravità delle infezioni, secondarie o non alla terapia.
Pertanto, accanto agli attuali indicatori prognostici (stato mutazionale delle regioni VH delle Ig,
CD38, ZAP70, alterazioni citogenetiche), appare rilevante anche una valutazione della “capacità di
risposta” del sistema immunitario alle infezioni. Ciò potrebbe contribuire ad una valutazione più
attenta delle opzioni terapeutiche aggressive, soprattutto nei pazienti immunocompromessi.
Richieste finanziarie
Funzionamento
Spese per borse / collab.
Totale
Costo totale
(max € 50.000,00)
10.000,00
40.000,00
50.000,00
Richiesto alla Fondazione Eventuali cofinanziamenti
10.000,00
40.000,00
50.000,00
Milano, 25 settembre 2008
Dott.ssa Paola Bianchi
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