Valutazione della esposizione derivante
dalla presenza di micotossine negli
alimenti per l’infanzia
Sonia Colicchia
V Congresso Nazionale
Le Micotossine nella filiera Agro-alimentare
ISS, 28-30 Settembre 2015
1
Introduzione
The Journal of Pediatrics, 2011
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
2
I
Introduzione
Esposizione derivante dalla presenza di micotossine negli
alimenti per l’infanzia
Argomento controverso
• Alimenti per bambini e per adulti
Differenti livelli massimi di
contaminazione
• Tolerable Daily Intake (TDI) valutata per adulti
• No dati di consumo ufficiali relativi a bambini di 6, 9 e 12 mesi nel database
Nazionale (INRAN)
[1] Leclercq C.. The Italian National Food Consumption Survey INRAN 2005 06: main results in terms of food consumption. Public Health
Nutrition: 12(12). 2504 –2532
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
3
A
Introduzione
I.
Valutazione dell’incidenza di contaminazione negli
alimenti per infanzia
II. Valutazione dell’esposizione dei bambini italiani alle
micotossine
344
campioni
provenienti da
supermercati
italiani
2013-2014
Introduzione
• Vaccino
• Proseguimento
• Crescita
Latte
Omogeneizzati a base di formaggio
Pasta
Biscotti
Omogeneizzati a base di carne
Metodi
Risultati
Conclusioni
4
Introduzione
• Incidenza di contaminazione e valutazione dell’esposizione
– Aflatossina M1 (AFM1)
• Latte liquido e latte in polvere
• Omogeneizzati a base di formaggio
– Deossinivalenolo (DON)
• Pasta and pastina
• Biscotti per bambini e per adulti
– Zearalenone (ZON), α-Zearalenolo (α–ZEL), β Zearalenolo (β-ZEL)
• Omogeneizzati a base di carne
• Risultati e discussioni
• Conclusioni
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
5
Aflatossina M1
• Latte liquido
• Latte in polvere
– Proseguimento
– Crescita
– Vaccino
• Omogeneizzati a
base di formaggio
– Proseguimento
– Crescita
Foodstuffs
Aflatoxins
B1
Maximum levels (µg/kg)
Sum of B1 . B2. G1
and G2
Raw milk. heat-treated milk and milk for the manufacture of milkbased products
Infant formulae and follow-on formulae, including infant milk and
follow-on milk
Introduzione
Metodi
M1
0.050
0.025
Risultati
Conclusioni
6
Aflatossina M1
• Latte liquido
• Latte in polvere
– Proseguimento
– Crescita
– Vaccino
– Proseguimento
– Crescita
• Omogeneizzati a
base di formaggio
Metodi di analisi:
Estrazione
Purificazione del campione
Immunoaffinità (EASI- EXTRACT® AFLATOXIN)
Analisi HPLC
Rilevazione fluorimetrica
Latte liquido e in polvere
UNI-EN ISO 14501
Estrazione con QuEChERs
Purificazione del campione
Immunoaffinity (EASI-EXTRACT® AFLATOXIN)
Analisi HPLC
Rilevazione fluorimetrica
Omogeneizzati a base
di formaggio
Introduzione
In-house
validation
Metodi
Risultati
Conclusioni
7
Aflatossina M1
Nessun valore
superiore al
limite di legge!
Micotossina
Alimento
Latte liquido
LOD (µg/kg)
0.0004
LOQ (µg/kg)
0.004
AFM1
Latte in polvere
0.0008
0.008
Omogenizzati formaggio
0.004
0.010
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
8
Deossinivalenolo
• Pasta
• Biscotti
– Pasta per bambini
– Pasta per adulti
– Biscotti per bambini
– Biscotti per adulti
Foodstuffs
Maximum levels (µg/kg)
Deoxynivalenol
Cereal intended for direct human consumption. cereal flour (including maize flour. maize meal and maize
grifts). bran as end product marketed for direct human consumption and germ. with the exception of
processed cereal-based food and baby food for infants and young children
Pasta (dry)
Processed cereal based foods and baby foods for infants and young children
Introduzione
Metodi
750
200
Risultati
Conclusioni
9
Deossinivalenolo
• Pasta
• Biscotti
– Pasta per bambini
– Pasta per adulti
– Biscotti per bambini
– Biscotti per adulti
Metodo di analisi
Estrazione
Purificazione del campione
Immunoaffinità (DONPREP®)
Analisi HPLC
Rilevazione fluorimetrica
Metodo validato e adoperato per analisi ufficiali
dal Laboratorio Nazionale di Riferimento
per le Micotossine (ISS)
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
10
Deossinivalenolo
Nessun valore
superiore al
limite di legge!!
Micotossina
DON
Introduzione
Alimento
LOD (µg/kg)
LOQ (µg/kg)
Pasta
14
38
Biscotti
10
15
Metodi
Risultati
Conclusioni
11
Zearalenone
• Omogeneizzati a base di carne
Foodstuffs
Maximum levels (µg/kg)
Zearalenon
Introduzione
Cereal intended for direct human consumption. cereal flour bran as end germ as end product marketed for direct
human consumption with the exception of the product listed below
75
Processed cereal based foods (excluding processed maize-based foods) and baby food for infants and young children
20
Processed maize-based foods for infants and young children
20
Metodi
Risultati
Conclusioni
12
Zearalenone
• Omogeneizzati a base di carne
–
–
–
–
–
manzo
pollo
agnello
tacchino
vitello
Metodo di analisi
Estrazione
Purificazione del campione
Immunoaffinità EASI-EXTRACT ® ZEARALENONE
Analisi HPLC
Rilevazione fluorimetrica
R-Biopharm
Application note
In-house validation
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
13
ZON, α-ZEL, β-ZEL
Nessun valore
superiore al
limite di legge!
Micotossina
Alimento
LOD (µg/kg)
LOQ (µg/kg)
ZON
α-ZEL
Β-ZEL
Omogeneizzato a base di carne
Omogeneizzato a base di carne
Omogeneizzato a base di carne
1.5
1.5
4.47
6.0
6.0
44.0
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
14
Esposizione
L’esposizione di bambini appartenenti a fasce di età diverse (6. 9
e 12 mesi) è stata calcolata tramite un approccio deterministico
(consumi [g] · contaminazione [ng/g]) / (peso corporeo [kg])
• Nei database ufficiali non sono disponibili dati di consumo ad hoc per
le fasce di età di nostro interesse.
• Database dell’ Istituto Nazionale per la Ricerca degli Alimenti e
Nutrizione (INRAN).
–
Dati di consumo relativi a bambini di età compresa tra 0 e 2.9 anni
• La differenziazione in base all’età è stata fatta utilizzando i pesi
corporei medi tabulati dall’Organizzazione Mondiale della Sanità.
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
15
Esposizione
L’esposizione di bambini appartenenti a fasce di età diverse (6. 9
e 12 mesi) è stata calcolata tramite un approccio deterministico
(consumi [g] · contaminazione [ng/g]) / (peso corporeo [kg])
 I dati di consumo corrispondenti al 50°, 95° e 99° percentile sono stati
incrociati con i valori medi di contaminazione e con i pesi corporei medi
relativi alle tre fasce di età considerate
Introduzione
Age (months)
Body weight (kg)
6
7.9
9
8.9
12
9.6
Metodi
Risultati
Conclusioni
16
Esposizione
Tolerable daily intake (TDI)
DON: 1 µg/kg b.w
ZON: 0.25 µg/kg b.w
AFM1: no official TDI
Considerando l’alta tossicità dell’ AFM1*, è stato considerato il
principio del “più basso ragionevolmente raggiungibileˮ (ALARA As Low As Reasonably Achievable)
*AFM1 è classificata dallo IARC come Possibile Cancerogeno per l’uomo
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
17
Esposizione
• Valutazione dell’esposizione – 6 mesi
Micotossina
Alimento
Consumi* (g/day)
Contaminazione
(ng/g)
Valore medio
Latte vaccino
AFM1
Latte di
proseguimento
Valutazione
dell’esposizione
(ng/kg bw/day)
50° perc
107
95° perc
280
99° perc
280
1.176
50° perc
7.09
0.009
95° perc
15.9
99° perc
15.9
0.450
0.0042
0.0013**
1.176
0.021
0.021
• Dati di consumo estrapolati da EFSA sulla base del Database INRAN.
• ** Media pesata tra latte liquido e latte in polvere
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
18
Esposizione
• Valutazione dell’esposizione – 9 mesi
Micotoxina
Alimento
Consumi* (g/day)
Contaminazione (ng/g)
Valutazione
dell’esposizione (ng/kg
bw/day)
Valore medio
Latte vaccino
AFM1
Latte di
proseguimento
Omogeneizzati
di formaggio
DON
Pasta per
bambini
50° perc
95° perc
99° perc
50° perc
95° perc
99° perc
50° perc
95° perc
99° perc
50° perc
95° perc
99° perc
107
280
280
7.09
15.90
15.90
8.47
18.95
18.95
3.56
6.63
9.27
0.0042
0.0013**
0.0060
45.3
0.450
1.176
1.176
0.009
0.021
0.021
0.051
0.114
0.114
161.465
300.467
420.071
• Dati di consumo estrapolati da EFSA sulla base del Database INRAN.
• ** Media pesata tra latte liquido e latte in polvere
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
19
Esposizione
• Valutazione dell’esposizione – 12 mesi
Micotoxina
Alimento
Latte vaccino
50t° perc
95° perc
99° perc
50t° perc
AFM1
Latte di crescita
Omogeneizzati di
formaggio
Pasta
Pasta per bambini
DON
Biscotti per bambini
Biscotti
Contaminazione (ng/g)
Consumi (g/day)
23.86
70.65
75.76
12.28
95° perc
14.56
99° perc
50t° perc
95° perc
99° perc
50t° perc
95° perc
99° perc
50t° perc
95° perc
99° perc
50t° perc
95° perc
99° perc
50t° perc
95° perc
99° perc
14.56
1.69
3.08
3.08
3.56
6.63
9.27
3.56
6.63
9.27
2.00
4.00
8.00
2.00
4.00
8.00
Mean value
0.0042
0.0061**
Exposure Assessment (ng/kg bw*/day)
0.100
0.297
0.318
0.075
0.089
0.0060
64.7
45.3
13
80.8
0.089
0.010
0.018
0.018
230.613
429.143
599.969
161.465
300.467
420.071
26.000
52.000
104.000
161.600
323.200
646.400
• Dati di consumo estrapolati da EFSA sulla base del Database INRAN.
• ** Media pesata tra latte liquido e latte in polvere
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
20
Conclusioni
• Livello di micotossine inferiore al limite di legge in tutti i
campioni analizzati
– (i) alimenti specifici per bambini
– (ii) alimenti per adulti
• L’esposizione risulta essere significativamente inferiore per gli
alimenti per l’infanzia rispetto agli alimenti per adulti
Introduzione
Metodi
Risultati
Conclusioni
Grazie a..
… Istituto Superiore di Sanità,
Roma
… AIIPA – Associazione Italiana
Industrie Prodotti Alimentari,
Milano
Carlo Brera
Barbara De Santis
Francesca Debegnach
Emanuela Gregori
Gabriele Moracci
…per l’attenzione!
21