BIOCHIMICA DEL SANGUE Università di Cassino A.A. 2010-11 PROTEINE PLASMATICHE • Funzionalmente distinguibili in: 1.Immunoglobuline con funzione anticorpale 2.Proteine di trasporto(alb.,transf,aptogl.,emopessina TBG,SHBG,transcortina,RbP,etc.) 3.Fattori del complemento( C3,etc. ) 4.Inibitori delle proteasi (alfa-1 antitripsina, etc.) 5.Proteine della fase acuta e della fase anti-acuta (CRP,etc.) 6.Fattori della coagulazione (fibrinogeno,etc.) 7.Lipoproteine (HDL,VLDL,LDL) PROTEINE PLASMATICHE Sul tracciato elettroforetico sono evidenziabili 7 frazioni più o meno eterogenee (in ordine dall’anodo al catodo): 1. Prealbumina 2. Albumina (35-50g/l) 3. Alfa-1 :alfa-1antitripsina,alfa-1glicoproteina acida,alfalipoproteine (HDL) (1-4 g/l) 4. Alfa-2 :alfa-2macroglobulina,aptoglobina,ceruloplasmina,pre-betalipoproteine (VLDL) (5-9g/l) 5. Beta-1 :transferrina,betalipoproteine (LDL) 6. Beta-2 :C3 del complemento,CRP (6-11 g/l) 7. Gamma : immunoglobuline (6-15 g/l) ALBUMINA • • 1. 2. 3. • E’ la principale proteina del siero (60% delle plasmaproteine) Funzioni principali: Trasporto di NEFA, bilirubina,ormoni,farmaci,ioni Regolazione della pressione colloido-osmotica (80%) Sistema tampone del pH del sangue Diminuzione di concentrazione: Epatopatie e malnutrizione (ridotta sintesi),ustioni,malattie renali,etc. (aumento delle perdite) Alterazione dell’equilibrio fra le pressioni colloido-osmotica ed idrostatica ed edema Elettroforesi proteine del siero Migrazione elettroforetica Proteine Funzione Pre-albumina Pre-albumina Indicatore nutrizionale Lega retinolo e ormoni tiroidei Albumina Albumina Maggiore contributo alla pressione oncotica (6g/100ml) Trasporta bilirubina, steroidi, ac.grassi 1-globuline 1-antitripsina (90% del totale!) Inibitore proteasi. Aumenta nell’infiammaz.; deficit congenito causa cirrosi e enfisema giovanili 1-lipoproteine (HDL) Trasporto lipidi (colesterolo) 1-antichimotripsina Inibisce serin-proteasi. Aumenta nell’infiammaz. 1-glicoproteina acida Fase acuta infiammaz. Aptoglobine Legano emoglobina. Aumentano nell’infiammaz. Ceruloplasmina Inibitore perossidasi 2-macroglobulina Inibitore trombina, pepsina, tripsina. Aumenta nella nefrosi. 2-globuline -globuline -globuline Pre- lipoproteine (VLDL) Trasporto lipidi (trigliceridi) Transferrina Trasporto ferro. Aumenta nell’anemia sideropenica. Emopexina Lega l’eme. Diminuisce nelle anemie emolitiche. -lipoproteine (LDL) Trasporto lipidi (colesterolo) 2-microglobulina Componente antigene HLA I. Aumenta nell’infiammaz. e diminuita clearance renale fibrinogeno Precursore fibrina Complemento (C1,3,4) Risposta immune. Aumenta nell’infiammaz. Proteina C reattiva (CRP) Norm. assente, compare in fase acuta infiammaz. Opsonizza batteri e funghi, chemoattrattore. Ig G-A-M-D-E Anticorpi. Picco monoclonale nel mieloma. Aumento policlonale nelle infezioni/infiammaz. croniche Alcuni profili elettroforetici tipici Principali enzimi di interesse diagnostico presenti nel siero Enzima Fosfatasi acida (ACP) pH 5 Patologia Valori di riferimento Carcinoma prostatico (ACP 2.5-12 U/L (m) 0.2-5 T.S. tartrato-sensibile) 0.3-9 U/L (f) Alanina transaminasi (ALT o Danno epatocellulare GPT) (+ specif. della AST) enzima citosolico 5-35 U/L Fosfatasi alcalina (ALP) pH 9-10 Danno epatobiliare ostruttivo, danno osseo (riparaz. fratture, accrescimento, osteosarcoma) 30-90 U/L Amilasi (AMS) Pancreatite acuta; parotite 90-280 U/L Aspartico transaminasi (AST Danno epatocellulare o o GOT) muscolare (cardiaco!); enzima mitocondriale 5-35 U/L AST/ALT<1 epatite acuta AST/ALT>1 cirrosi (alcolica) Creatina cinasi (CK) Isoenzimi: CK-MM, -MB, BB Danno muscolare 15-160 U/L (trauma, distrofia)/miocardio/cereb rale -glutamil transferasi (GGT) Patologie epatobiliari ostruttive; alcolismo; pancreatite 5-30 U/L Lattico deidrogenasi (LDH) Isoenzimi: LDH-1 5 Infarto miocardio, danno epatocellulare, carcinoma L P 100-225 U/L P L 80-280 U/L Lipasi (LPS) Pancreatite acuta 0-1 U/L Isoenzimi di interesse diagnostico Isoenzima Tessuto Patologia CK-MM Cuore e muscolo schel. Infarto mioc.; traumi muscol CK-MB Cuore e muscolo schel. Infarto mioc.; distrofia muscol CK-BB Separaz. Elettroforetica; RIA Cervello Accidenti cerebrovascolari, shock, tumori cerebrali LDH-1 Cuore; RBC (emolisi rende campione inidoneo!) Infarto mioc.; emolisi (LD1>LD2) LDH-2 (norm. maggioritario) Rene Infarto renale LDH-3 Polmone, linfociti, pancreas Danno polmonare (embolia, polmonite), linfocitosi, pancreatite LDH-4 e -5 Separaz. Elettroforetica Fegato e muscolo Danno epatocell./muscolare