Fondazione CARIPLO
Bandi 2007
le preproposte dovranno essere
inviate entro e non oltre le ore 16:00
del 19 aprile 2007 a
[email protected]
PRE-PROPOSTA PER IL BANDO
“PROMUOVERE LA RICERCA SCIENTIFICA E TECNOLOGICA
IN TEMA DI SALUTE E SCIENZE DELLA VITA”
TEMA DI RICERCA:
genomica e proteomica per la prevenzione, la diagnosi precoce e la cura
delle malattie
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studi sperimentali che prevedano l’utilizzo delle cellule staminali, escluse
quelle embrionali umane, in relazione alla riparazione tissutale
TITOLO DEL PROGETTO: RUOLO DEL FATTORE WILLEBRAND NEI MECCANISMI
DI ADESIONE CELLULARE DALLE CELLULE STAMINALI ED ENDOTELIALI AI
MEGACARIOCITI E PIASTRINE: DALL’EMATOPOIESI NORMALE AL TRATTAMENTO
DELLA MALATTIA DI VON WILLEBRAND
AREA DISCIPLINARE DEL PROGETTO:
Area 7: Scienze Mediche - Area 5 : Scienze Biologiche
RESPONSABILE SCIENTIFICO: AUGUSTO B. FEDERICI (MED15)
Dipartimento di Medicina Interna
ALTRI PARTECIPANTI UNIMI (nome e struttura di appartenenza):
- ARMANDO NEGRI (BIO10) e GABRIELLA TEDESCHI (BIO10)
Dipartimento Patologia Animale, Igiene e Sanità Pubblica Veterinaria
- IRENE CETIN (MED40) Istituto di Clinica Ostetrica Ginecologica I
- FABIO MOSCA (MED38) Istituto di Pediatria e Neonatologia
- ROSANNA ASSELTA (BIO11) Dipartimento di Biologia e Genetica
PARTECIPANTI DI ALTRI ENTI (nome e struttura di appartenenza):
-
PAOLO REBULLA Fondazione IRCCS Ospedale Maggiore Policlinico
DURATA DEL PROGETTO: DUE ANNI
COSTO COMPLESSIVO DEL PROGETTO1: 500.000 EURO
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IMPORTO RICHIESTO ALLA FONDAZIONE1: 250.000 EURO
IMPORTO RESO DISPONIBILE DALLA STRUTTURA PER IL COFINANZIAMENTO1:
Personale 150.000 + Finanziamento BAYER 2007-2009 = 100.000 = 250.000 EURO
PUBBLICAZIONI RECENTI DEL GRUPPO DI RICERCA (max 5):
1.
2.
3.
4.
5.
Schneppenheim R. Castaman G, Federici AB, Kreuz W, Marschalek R, Oldemburg J, Oyen F,
Budde U. A common 253kb deletion involving VWF and TMEM16B in Gerrman and Italian
patients with severe VWD. J.Thromb Haemost 2007; 5:722-8
Baronciani L, Federici AB, Cozzi G, Canciani MT, Mannucci PM. Biochemical
characterization of a recombinant von Willebrand factor (VWF) with combined type 2B and
type 1 defects in the VWF gene in two patients with a type 2A phenotype of von Willebrand
disease. J Thromb Haemost. 2007; 5:282-288
Baronciani L, Federici AB, Cozzi G, Canciani MT, Mannucci PM. von Willebrand factor
collagen binding assay in von Willebrand disease type 2A, 2B, and 2M.
J Thromb
Haemost. 2006 Sep;4(9):2088-90
De Cristofaro R, Peyvandy F, Baronciani L, Palla R, Lavoretano S, Lombardi R, Di Stasio E,
Federici AB. Molecular mapping of the chloride binding site in von Willebrand factor
(VWF): Energetics and conformational effects on the VWF/ADAMTS-13 interaction. J Biol
Chem. 2006 Aug 9
Ruggeri ZM,Orje JN, Habermann R, Federci AB, Reininger AJ. Activation-independent
platelet adhesion and aggregation under elevated shear stress. Blood. 2006 108(6):1903-10.
DESCRIZIONE DEL PROGETTO2 (analisi del bisogno, obiettivi scientifici, piano di
intervento, piano finanziario, organizzazione; max 3000 caratteri spazi inclusi, possono
essere usati anche grafici):
Background: L’emostasi e la trombosi sono due aspetti della stessa funzione, cioè la risposta
biologica al danno vascolare. In entrambe le situazioni, vengono coinvolte le cellule endoteliali,
(EC) le piastrine (PLT) e le glicoproteine adesive (GP). Queste componenti quindi possono essere
modulate. Il fattore von Willebrand (VWF) gioca un ruolo determinante in questi meccanismi
poiché la sua principale attività biologica è quella di promuovere l’adesione e l’aggregazione delle
piastrine in circolo. E’ inoltre la proteina vettrice del fattore VIII, la proteina che è assente o alterata
nell’emofilia A. Il VWF é sintetizzato dalle EC e dai megacariociti (MK), originati da un comune
progenitore staminale (CD34). Il VWF si trova inoltre all’interno dei granuli alfa delle PLT, nel
sottoendotelio ed in circolo dove interagisce con specifici recettori delle piastrine, quali la
glicoproteina Ib (GpIb) ed il complesso molecolare IIb-IIIa, ed inoltre con trombospondina e
collageno tipo I, III e VI. Pertanto il VWF può essere usato come marcatore del sistema emostatico,
dalla CD34 alle EC e dal MK alle PLT. Il gene del VWF é molto esteso (178 kb) ed é localizzato
sul cromosoma 12, posizione p13.31. Nonostante il gene sia stato isolato nel 1985, non sono ancora
oggi chiare alcune informazioni sulla regolazione del promotore nelle EC e nei MK. Studi recenti
hanno dimostrato anomalie dell’ematopoiesi e apoptosi dei MK nei pazienti con difetti ereditari di
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GpIb e VWF. Quando il gene del VWF è ipoespresso oppure è mutato si manifestano quadri
emorragici noti come malattia di Willebrand (VWD), mentre quando il gene è iperespresso o
sono alterati i meccanismi di regolazione si manifestano quadri trombotici come la porpora
trombotica trombocitopenica (TTP).
Analisi del Bisogno, Obiettivi scientifici, Piano di intervento, Organizzazione
I sei laboratori coinvolti in questo progetto hanno la necessità di ottenere un finanziamento mirato a
promuovere uno studio coordinato sulla genomica e proteomica delle interazioni VWF-GpIb dai
CD34 e EC, MK e PLT nelle varie fasi della vita dei soggetti normali e con VWD. Pertanto tutti i
sei laboratori hanno un ruolo determinante nel progetto poiché contribuiscono in maniera specifica
alla sua realizzazione: a) diagnosi fenotipica, genotipica di VWD ed espressione di VWF mutanti
(P1, Federici); b) VWF e GpIb nella unità feto-placentare e neonato sano ed immaturo (P2, Cetin,
P3, Mosca); c) isolamento, conservazione ed espansione di CD34, EC, MK (P4, Rebulla); d)
Espressione del RNA dei principali di regolazione del VWF e GpIb (P5, Asselta); e) Analisi
proteomiche sul VWF ed altre GP adesive (P6, Negri, Tedeschi)
Obiettivi : 1. Costituire una banca di sangue da cordone sano e patologico per l’analisi genomiche e
proteomiche del VWF e GpIb in CD34, EC, MK, PLT. 2. Genomica e proteomica dei principali
fattori di regolazione del VWF e GpIb. 3. Miglioramento della diagnosi e del trattamento di VWD
e TTP
Piano di Intervento e Organizzazione: Il finanziamento sarà destinato unicamente
all’arruolamento di personale dedicato alla ricerca ed ai reagenti e materiali per lo studio.
SPIEGARE LA METODOLOGIA DELLA RICERCA E IL PIANO DI VALUTAZIONE
DEI RISCHI PER GARANTIRE IL SUCCESSO DELL’INIZIATIVA2 (max 1000
caratteri spazi inclusi, possono essere usati anche grafici)
Le procedure per l’isolamento delle CD34 e delle EC da cordone (Human Umbelical Vein
Endothelial Cells, HUVEC) sono quelle in uso presso la Cell Factory. L’immunofenotipo di tutte le
CD34 effettuato mediante FACS Cytometer dopo aver esposto le cellule a specifici anticorpi
fluoroscinati contro antigeni di membrana cellulari e contro il VWF. I MK in cultura verranno
ottenuti da CD34pos/CD38low di soggetti normali e di pazienti con VWD utilizzando specifiche
citokine e fattori di crescita secondo il metodo descritto da Shim et al. Dalle CE e dai MK verrà
isolato il mRNA per gli valutare il promotore del VWF gene. Gli studi proteomici saranno condotti
mediante cromatografia di affinità, elettroforesi, spettrometria di massa e sequenza. Poiché queste
metodiche sono in gran parte già disponibili nei laboratori che partecipano allo studio, il progetto
presenta ottime possibilità di realizzazione
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SPECIFICARE SE IL PROGETTO È STATO GIÀ PRESENTATO ALLA
FONDAZIONE CARIPLO NEGLI ANNI PRECEDENTI E NON FINANZIATO (IN
CASO POSITIVO INDICARE ANNO DI PRESENTAZIONE, TITOLO PROGETTO,
NOME RESPONSABILE SCIENTIFICO)3:
Un progetto simile è stato presentato l’anno precedente con lo stesso gruppo di ricerca ma non ha
ricevuto il finanziamento. Dopo l’incontro con il responsabile dell’Area Progetti di ricerca della
Fondazione CARIPLO in cui si sono potuti discutere gli aspetti critici del progetto 2006, si è deciso
di riproporre la presentazione del progetto con una più mirata richiesta di finanziamento e
dopo aver meglio identificato gli obiettivi e le ricadute di questa ricerca.
SPECIFICARE SE IL GRUPPO DI RICERCA CHE PROPONE IL PROGETTO HA
SITUAZIONI APERTE CON CARIPLO SU PROGETTI PRECEDENTEMENTE
FINANZIATI (ES. report da consegnare, rendicontazioni da completare):
Nessuno dei partecipanti ha situazioni aperte con CARIPLO su progetti precedentemente
finanziati
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NOTE SPECIFICHE PREVISTE DAL BANDO
DELLA FONDAZIONE CARIPLO
NOTA 1) Per essere considerati ammissibili alla valutazione, i progetti
dovranno presentare un piano finanziario coerente con le indicazioni
riportate di seguito:
Prevedere una richiesta di contributo non inferiore a 100.000 euro e non superiore
al 50% del costo totale;
Prevedere il reclutamento di nuovo personale (borsisti, assegnisti, dottorandi o
collaboratori);
Rispettare, nel caso di costi relativi al personale strutturato, un massimale del 30%
del costo totale del progetto; con riferimento a queste spese nel progetto di dettaglio
dovrà essere fornita ai referee dimostrazione dell’effettiva attinenza al piano di
ricerca;
Rispettare nel caso di “altri costi di gestione, missioni e pubblicazioni” un
massimale del 5% del costo totale (se il progetto necessita di costi più elevati,
dettagliare adeguatamente);
Imputare, se necessario, le quote di ammortamento relative ad attrezzature o
software di nuovo acquisto esclusivamente per quanto concerne la percentuale di
utilizzo inerente allo svolgimento del piano di attività del progetto (tali costi
saranno imputabili unicamente alla quota di co-finanziamento dell’ente
richiedente);
Non imputare nei costi di progetto spese correnti/generali;
Il contributo della Fondazione dovrà essere riferito unicamente alle spese
addizionali in cui l’ente incorre per la realizzazione dell’iniziativa proposta.
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NOTA 2) I progetti saranno valutati in base:
alla qualità scientifica;
alla chiarezza della formulazione degli obiettivi e delle strategie adottate;
ai risultati attesi e all’impatto previsto sul contesto scientifico, economico e sociale;
all’originalità ed innovatività della ricerca proposta;
all’autorevolezza della leadership scientifica individuale e/o collettiva dei
Proponenti;
al curriculum del responsabile scientifico (Principal Investigator - PI) e del team di
ricerca coinvolto;
alla capacità di attrarre giovani talenti e quindi investire sul capitale umano della
ricerca scientifica;
alla collaborazione tra centri di ricerca e allo sviluppo di reti e forme di partnership;
alla sostenibilità finanziaria dell’intervento ed alla destinazione del contributo;
all’esperienza maturata nell’ambito specifico di ricerca e alla coerenza del progetto
con le strategie di sviluppo dell’organizzazione;
al livello ed alle forme di disseminazione dei risultati e di comunicazione scientifica.
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NOTA 3) Progetti non ammissibili
Saranno ritenuti inammissibili alla valutazione, i progetti che presenteranno le seguenti
caratteristiche:
Orientamento del piano di ricerca ad attività di ricerca clinica;
Richiesta di finanziamento per attività ordinarie dei centri e delle strutture di
ricerca;
Richiesta di finanziamento per creazione di nuovi centri di ricerca;
Richiesta di finanziamento per allestimento di laboratori;
Richiesta di finanziamento per allestimento di stabulari;
Richiesta di finanziamento per acquisto e ristrutturazione di immobili.
Per ulteriori informazioni sulle regole di partecipaizone
consultare il bando al seguente indirizzo
www.fondazionecariplo.it
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