Determinare il tropismo virale
Test TROFILE™ (Monogram Biosciences)
TrofileTM: Virus R5
CD4 CCR5
Vettore di espressione
(luciferasi)
gag
pol
env
gag
pol
luc
Library del vettore
di espressione env
Infezione
CD4 CXCR4
Transfezione
R5
X4
R5/X4 (duplice)
Aggiunta di inibitori
di entrata per
confermare
il tropismo
Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007;51:566-575
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Risultato del test TrofileTM che indica un virus R5
CD4 CCR5
one
Risultato del tropotipo
R5
Infezione
CD4 CXCR4
D/M
X4
Il virus utilizza i co-recettori
CCR5 per entrare
nella cellula CD4+
R5
Aggiunta di inibitori
di entrata per
confermare
il tropismo
È prevista
attività
CCR5 antagonista?
SI
NO
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TrofileTM: virus a tropismo misto
CD4 CCR5
Vettore di espressione
(luciferasi)
gag
pol
env
gag
pol
luc
Library del vettore
di espressione env
Infezione
CD4 CXCR4
Transfezione
R5
X4
R5/X4 ((duplice)
Aggiunta di inibitori
di entrata per
confermare
il tropismo
Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007;51:566-575
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Risultato del test TrofileTM che indica un virus a tropismo
duplice/misto
CD4 CCR5
Risultato del tropotipo
R5
one
Infezione
CD4 CXCR4
D/M
X4
La popolazione virale doppia/mista
può usare i co-recettori CXCR4 e/o
CCR5 per entrare nella cellula CD4+.
Infettività da X4 vicina al limite di
rilevamento. I risultati del tropismo
determinati vicini al limite del
rilevamento possono essere variabili
su test successivi
del campione.
D/M
Aggiunta di inibitori
di entrata per
confermare
il tropismo
Attività
dell’antagonista
CCR5
prevista?
SI
NO
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Riassunto delle caratteristiche del test TrofileTM
Caratteristiche del test
Prestazione
Tempo totale richiesto1
Da 3 a 4 settimane (2 per il test, più circa
1-2 settimane per il trasporto e i risultati)
Sensibilità del test in base
alla carica virale*
≥1.000 copie/mL (95,4%; n= 104/109)2
Campioni esaminati fino ad oggi
Oltre 23.000
* Proporzione dei campioni con risultati in termini di tropismo al dato livello di HIV-1 RNA; n: campioni positivi (numeratore)
e valutati (denominatore).
1. Whitcomb J, et al. Antimicrob Agents Chemother 2007;51:566-575
2. CHMP Assessment Report for Celsentri (International Nonproprietary Name: maraviroc);
Procedure No. EMEA/H/C/000811. London, 17 July 2007, Doc. Ref.: EMEA/CHMP/143949/2007
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Sintesi (1)
● CCR5 e CXCR4 sono i principali co-recettori delle chemochine che l’HIV
utilizza per entrare nelle cellule CD4.
– Di conseguenza, il tropismo virale viene descritto come R5, X4 (per i virus in grado di
sfruttare sia uno che l’altro o entrambi i co-recettori) oppure come D/M
(duplice/misto).
● I dati recenti che dimostrano l’utilità clinica dei CCR5 antagonisti,
insieme alla disponibilità del test TrofileTM, che può determinare il
tropismo virale (tropotipo) di un paziente con infezione da HIV-1,
possono ampliare e incrementare le possibilità del medico di costruire
dei regimi antiretrovirali ottimali.
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Sintesi (2)
● Il test TrofileTM è facile da somministrare e da interpretare.
– Il test ha un tempo di “turn-around” di 2-3 settimane.
– Il referto fornisce al medico una semplice risposta “sì” o “no” circa la probabile efficacia
di un CCR5 antagonista, stimata in base al tropotipo del paziente.
● Nei pazienti già trattati con ARV e infettati solo con ceppi HIV R5, gli studi
clinici hanno dimostrato, con l’aggiunta di un CCR5 antagonista alla OBT,
un miglioramento statisticamente significativo del controllo virale e un
aumento della conta delle cellule CD4 a 24 settimane rispetto a OBT +
placebo.
– Nei pazienti con HIV D/M, non è attesa una riduzione significativa della carica virale da
parte dei CCR5 antagonisti; tuttavia, in questi pazienti è stato osservato un aumento
delle cellule CD4-positive dopo 24 settimane.
● L’analisi dei pazienti arruolati negli studi clinici, che sono stati condotti su
pazienti già trattati con ARV, ha dimostrato che la maggior parte di questi
pazienti evidenziava solo virus R5 al momento dello screening per lo studio.
– Dei restanti pazienti, quasi tutti evidenziavano la presenza di ceppi virali D/M, mentre
quelli con soli ceppi virali X4 non superavano il 2-4%.
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