La seta: temi di ricerca Giornata di studio e condivisione delle attività CNR-ISMAC Biella, 8 Marzo 2017 Zoccola Marina CNR-ISMAC Biella La seta La farfalla del baco da seta depone circa 500 uova. Le larve si FARFALLA BOMBIX MORI nutrono di foglie di gelso, poi si imbozzolano. Se l’animale riesce a sopravvivere uscirà dal bozzolo come farfalla forandolo con 500 UOVA enzimi proteolitici, rovinando la seta. Per prevenire questo, i bozzoli vengono bolliti in acqua: la larva muore. Viene poi dipanato LARVA (BACO DA SETA) dal bozzolo il filo continuo di seta. BOZZOLO DIPANATURA FILAMENTO 2000-3000 m per bozzolo Seta greggia : 75% fibroina 25% sericina FIBROINA (filamento fibroso) •350 KDa •-ala-gly-ser ( 3:2:1)rapporto molare •-(ala-gly)n- motivi ripetuti •-sheet SERICINA (proteina gommosa) •(40-400) KDa • Sericin I, II, III, and IV •Serina (da 16 a 38 moli%) •Random coil- sheet Applicazioni nel settore biomedicale Miscele di cheratina/fibroina CaCl2/EtOH/H2O Dialisi/H2O 1/2/8 Fibroina/H2O Casting Film di fibroina Estrazione della fibroina M-bisulphite [0.6M]; Urea [8M]; SDS [0.02M]; pH 6.5 Dialisi /H2O Casting Estrazione della cheratina Cheratina/H2O Miscele di cheratina/fibroina Fibroina 15% w/w sciolta in acido formico Percentuale Fibroina/cheratina 100/0 90/10 70/30 50/50 30/70 10/90 0/100 Cheratina 15% w/w sciolta in acido formico Film rigenerati da acido formico Elettrofilatura Condizioni di elettrofilatura per ogni blend Campioni (numero) Concentrazion del polimero in acido formico (w/w%) Diametro interno dell’ago (mm) Distanza di lavoro (cm) Flusso (ml/min) Differenza di potenziale (kV) 68 15% 0.2 10 0.001-0.005-0.01 20-25-30 Migliori condizioni di elettrofilatura Flusso : 0.005 ml/min Differenza di potenziale: 30kV Diametri delle nanofibre vs. quantità di cheratina 1600 diameter (nm) 1400 1200 1000 800 fibroina C/F 10/90 C/F 30/70 C/F 50/50 600 400 200 0 -10 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 keratin (%) C/F 70/30 C/F 90/10 cheratina Caratterizzazione strutturale di nanofibre e films Fibroina random coil α helix random coil α helix β sheet Fibroin film 1650 Cheratina Fibroin nanofibres Amide I β sheet Film e nanofibre di miscele cheratina-fibroina - M. Zoccola, A. Aluigi, C. Vineis, F. Ferrero, M. Piacentino, C. Tonin, "Study on nanofibrous membranes made from keratin/fibroin blends", Biomacromolecules 9(10) (2008) 2819–2825. Sgommatura della seta Materiale: tessuto crespo di seta Metodi: Rapporto bagno (soluzione tampone) 1/200 Condizioni operative: leggera agitazione Attività Concentrazione enzima (U/g tessuto) 55.9 U/g 0.05-2 5-240 44.7 U/ml 10 65 (7-12) (40-65) 0.05-2 5-240 58.3 U/g 0.05-2 5-240 Enzima Origine 3374-L Bacillus subtilis (geneticamente modificato) 10 60 75-12 (20-60) Bacillus lentus (geneticamente modificato) GC897-H 3273-C Carica papaya pH 6 3.5-9 T (°C) 65 (65-78) Tempo sgommatura (min) Perdita di peso dei campioni di tessuto sgommato Tempo di sgommatura = 1h Osservazione dei tessuti in microscopia elettronica Non sgommato Parzialmente sgommato Sgommato Peso molecolare dei peptidi di sericina presenti in soluzione - G. Freddi, R. Mossotti, R. Innocenti, "Degumming of silk fabric with several proteases", J. Biotechnol. 106(1) (2003) 101-112. - R. Mossotti, R. Innocenti, M. Zoccola, A. Anghileri, G. Freddi, "The degumming of silk fabrics: A preliminary near infrared spectroscopy study", Journal of Near Infrared Spectroscopy 14(3) (2006) 201-208. Carica della seta: processo di finissaggio che serve a recuprare il peso perso con la sgommatura della seta e a fornire particolari caratteristiche di lucentezza, mano, tingibilità. Scopo: ottimizzare i parametri di processo di carica della seta con metacrilammide e calibrazione e validazione di un metodo analitico tramite NIRS per determinare la quantità di MAA residua negli effluenti dei bagni di carica. -.M. Zoccola, A. Boschi, C. Arosio, R. Mossotti, Innocenti, G. Freddi Silk Grafting with Methacrylamide: a Near Infrared Spectroscopy Study, Journal of Applied Polymer Science, 120, 1, (2011) 253-262. Studio di fattibilità BOMB-HI Studio sullo sviluppo di filiere di produzione di nuove fonti proteiche per l’alimentazione animale mediante l’allevamento di insetti Bombyx Mori, Hermetia Illucens Seta come filamento discontinuo da utilizzare il mista con fibre animali speciali Crisalide per itticoltura di qualità Studio della filiera legata al baco da seta Bombyx Mori Paesi produttori di seta Country 2008 2009 2010 2011 2012 Bangladesh 2013 2008 2009 2010 2011 2012 2013 Corea del Nord - - - 300 300 300 Corea del Sud 3 3 3 3 1.5 1.6 Filippine 1 1 1 1 0.89 1 Siria 0.4 0.6 0.6 0.5 0.5 0.7 Tailandia 1100 665 655 655 655 680 Tunisia 0.08 0.04 0.12 3 3.95 4 Turchia 15 20 18 22 22 25 Uzbekistan 770.5 780 940 940 940 980 Vietnam - - 550 500 450 475 Madagascar 15 16 16 16 18 18 Total 120396 106170 139100 129662 152846 159776 24 Brasile 1177 811 770 558 614 550 Bulgaria 7.5 6.3 9.4 6 8.5 8.5 Cina 98620 84000 115000 104000 126000 130000 Colombia Country 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 0.6 Egitto 3 3 0.3 0.7 0.7 0.7 India 18370 19690 21005 23060 23679 26538 Indonesia 37 19 20 20 20 16 Iran 180 82 75 120 123 123 Giappone 96 72 54 42 30 30 Fonte: International Sericultural Commission Italia come paese esportatore di seta Il distretto di Como è specializzato nella lavorazione della seta come filamento continuo a partire dalla preparazione del filato. I distretti tessili di Biella e Prato lavorano la seta prodotta a taglio laniero o cotoniero in mista con altre fibre (kashmir, lana e cotone) umidità (%) 80 Parte sperimentale: 70 60 Composizione dei bozzoli 50 40 1.8 30 1.6 20 1.4 10 1.2 0 1 peso medio bozzolo fresco (g) 0.8 peso medio bozzolo secco (g) 0.6 0.4 umidità (%) 0.35 b essic b essic b essic b essic b essic b essic 1cat 1 1cat 2 1 scarto 2 cat 1 2 cat 2 2 scarto Contenuto in umidità del bozzolo fresco in funzione della categoria di bozzolo e del periodo di essiccazione 0.3 0.25 peso bozzolo secco vuoto (g) 0.2 peso crisalide secca (g) 0.15 0.2 70 0.1 60 0.05 0 b essic 1cat 1 b b b b b essic essic 1 essic 2 essic 2 essic 2 1cat 2 scarto cat 1 cat 2 scarto 50 Pesi bozzoli freschi e secchi in funzione della categoria di bozzolo e del periodo di essiccazione 0 40 bava serica/bozzolo %peso/peso 30 crisalide/bozzolo % peso/peso 20 10 0 b essic 1cat 1 b b b b b essic essic 1 essic 2 essic 2 essic 2 1cat 2 scarto cat 1 cat 2 scarto Percentuali di bava serica e crisalide sui bozzoli secchi in funzione della categoria di bozzolo e del periodo di essiccazione. b b b b b b essic essic essic essic essic essic 1cat 1 1cat 2 1 2 cat 1 2 cat 2 2 scarto scarto Pesi dei bozzoli essiccati vuoti e delle crisalidi essiccate in relazione alla categoria di bozzolo e del periodo di essiccazione Parte sperimentale: sgommatura e cardatura Campione Crisalide (g su 100g) Seta da sgommare (g su 100g) Perdita di peso (%) (Pi-pf)/pi (*) Bozzoli di prima scelta 50,02 49,.98 29.,50 Bozzoli di seconda scelta 50,64 49,36 28,75 Bozzoli di scarto 47,86 52.14 24.07 Pesi di crisalide, seta da sgommare e perdite di peso in seguito a sgommatura per bozzoli delle diverse categorie Seta cardata dopo sgommatura del bozzolo Fibroina di seta da top in commercio Parte sperimentale: estrazione della chitina Campione Resa di estrazione(*) % Crisalide di Bombix Mori 3,1 Hermetia Illucens adulto 3,3 Hermetia Illucens pupario 22,2 La resa di estrazione è stata calcolata come rapporto tra il peso secco del campione prima e dopo i trattamenti acidi, basici ed il lavaggio SILKNET Lo scopo del progetto è lo studio, la progettazione e lo sviluppo di un nuovo processo integrato per la lavorazione della seta partendo dal bozzolo fino ad arrivare al nastro di carda oppure al filato, in base alle esigenze dell’utilizzatore finale. Beneficiari: Nuova Cosmatex, Caipo, Biella Manifatture tessili (gruppo Marzotto), fratelli Piacenza e tessitura Pertile. Supporto scientifico: CNR- Ismac Biella – INNOVHUB Stazioni Sperimentali Industria - STAZIONE SPERIMENTALE DELLA SETA Durata (mesi) Costi totali progetto (euro) 24 1’550’000 Contributi totali richiesti (euro) 822’500 Grazie per l’attenzione