OSSERVAZIONE
MORFOLOGICA
Calsystem
Esame a fresco
I microrganismi, allo stato vivente, possono essere
esaminati al microscopio in
- campo chiaro
- campo oscuro
- contrasto di fase
Con questa tecnica una goccia della sospensione
batterica viene posta su di un vetrino e coperta
dal vetrino coprioggetto ed è osservato
direttamente
Esame a fresco
Questa osservazione consente di rilevare
la mobilità del batterio connessa alla
presenza di flagelli
I flagelli sono strutture a forma di corda,
formati da subunità proteiche
avvolte ad elica (flagellina) ancorati
alla membrana batterica
L flagelline
Le
fl
lli sono dotate
d
di proprietà
i à
antigeniche e rappresentano
l’antigene H dei batteri provvisti di
motilità
(Salmonelle, Vibrioni)
Esame a fresco
Le spirochete presentano un
flagello interno
Esame a fresco
Pili o Fimbrie
S
Sono
strutture
t tt
proteiche
t i h
(pilina), lineari, a centinaia
intorno al batterio
batterio, che
favoriscono l’adesività.
Sono chiamate anche lectine,
evasine, aggressine
E. coli with fimbriae
Esame a fresco
Capsula e glicocalice
Strato
St
t llasso, viscoso
i
polisaccaridico
li
idi
o proteico che circonda i batteri
gram+ e gram-.
Nel caso sia poco aderente e poco
uniforme per densità e spessore,
spessore
questo materiale è definito strato
mucoso o glicocalice
Esame a fresco
I batteri differiscono per dimensioni e forma
Strepcococcus pneumoniae
Neisseriae gonorrhoeae
Staphylococcus aureus
Streptococcus pyogenes
SFERICI
Esame a fresco
BASTONCELLARI
Esame a fresco
BACILLI
•Enterobacteriaceae:
Enterobacteriaceae: Escherichia
coli, Salmonella, Shigella,
Yersinia pestis
•Legionella pneumophilae
•Haemophilus influenzae
•Clostridium
Cl
idi
tetani,i Clostridium
Cl
idi
botulinum e Clostridium perfrigens
•Bacillus
Bacillus anthracis
Calsystem
Esame a fresco
BACILLI
Mycobacterium
M
b t i
tuberculosis,
Mycobacterium leprae
Mycobacterium bovis
Mycobacterium avium
complex
Bacilli aerobi, immobili
che danno luogo a
forme filamentose
Esame a fresco
SPIRALIFORMI
Esame a fresco
SPIRALIFORMI
•Vibrio cholerae
Colorazioni
I COLORANTI
Sono generalmente dei sali nei quali uno dei due ioni è
colorato.
Esempio: il blu di metilene.
metilene
In acqua si dissocia in ione Cl- e blu di metilene+ (colorato)
Colorazioni
COLORANTI ACIDI E BASICI
Se la parte colorata è lo ione positivo, il colorante è detto
basico
- Blu di metilene
- Cristalvioletto
- Safranina
Se la parte colorata è lo ione negativo, il colorante è detto
acido
id
- Nigrosina
- Rosso Congo
Colorazioni
COLORANTI BASICI
I citoplasmi di tutte le cellule batteriche hanno una debole
carica negativa se fatte crescere a pH neutro
Il colorante basico colora direttamente l’organismo.
COLORANTI ACIDI
Il colorante acido forma un deposito
p
colorato attorno
all’organismo, lasciandolo incolore.
L’osservazione diventa indiretta ed è accurata per una
visione delle dimensioni
dimensioni, della forma e della
disposazione dei batteri.
Colorazioni
LE COLORAZIONI
- Gram
- Ziehl-Neelsen
Ziehl Neelsen
- Kinyoun
- Lattofenolo
- Auramina/Rodamina
- Auramina/fenolo
- Auramina/permanganato
- Tricromica
Ti
i
- Giemsa
- Lugol
- Arancio di acridina
- Blu di metilene
- Ematossilina