OSSERVAZIONE MORFOLOGICA Calsystem Esame a fresco I microrganismi, allo stato vivente, possono essere esaminati al microscopio in - campo chiaro - campo oscuro - contrasto di fase Con questa tecnica una goccia della sospensione batterica viene posta su di un vetrino e coperta dal vetrino coprioggetto ed è osservato direttamente Esame a fresco Questa osservazione consente di rilevare la mobilità del batterio connessa alla presenza di flagelli I flagelli sono strutture a forma di corda, formati da subunità proteiche avvolte ad elica (flagellina) ancorati alla membrana batterica L flagelline Le fl lli sono dotate d di proprietà i à antigeniche e rappresentano l’antigene H dei batteri provvisti di motilità (Salmonelle, Vibrioni) Esame a fresco Le spirochete presentano un flagello interno Esame a fresco Pili o Fimbrie S Sono strutture t tt proteiche t i h (pilina), lineari, a centinaia intorno al batterio batterio, che favoriscono l’adesività. Sono chiamate anche lectine, evasine, aggressine E. coli with fimbriae Esame a fresco Capsula e glicocalice Strato St t llasso, viscoso i polisaccaridico li idi o proteico che circonda i batteri gram+ e gram-. Nel caso sia poco aderente e poco uniforme per densità e spessore, spessore questo materiale è definito strato mucoso o glicocalice Esame a fresco I batteri differiscono per dimensioni e forma Strepcococcus pneumoniae Neisseriae gonorrhoeae Staphylococcus aureus Streptococcus pyogenes SFERICI Esame a fresco BASTONCELLARI Esame a fresco BACILLI •Enterobacteriaceae: Enterobacteriaceae: Escherichia coli, Salmonella, Shigella, Yersinia pestis •Legionella pneumophilae •Haemophilus influenzae •Clostridium Cl idi tetani,i Clostridium Cl idi botulinum e Clostridium perfrigens •Bacillus Bacillus anthracis Calsystem Esame a fresco BACILLI Mycobacterium M b t i tuberculosis, Mycobacterium leprae Mycobacterium bovis Mycobacterium avium complex Bacilli aerobi, immobili che danno luogo a forme filamentose Esame a fresco SPIRALIFORMI Esame a fresco SPIRALIFORMI •Vibrio cholerae Colorazioni I COLORANTI Sono generalmente dei sali nei quali uno dei due ioni è colorato. Esempio: il blu di metilene. metilene In acqua si dissocia in ione Cl- e blu di metilene+ (colorato) Colorazioni COLORANTI ACIDI E BASICI Se la parte colorata è lo ione positivo, il colorante è detto basico - Blu di metilene - Cristalvioletto - Safranina Se la parte colorata è lo ione negativo, il colorante è detto acido id - Nigrosina - Rosso Congo Colorazioni COLORANTI BASICI I citoplasmi di tutte le cellule batteriche hanno una debole carica negativa se fatte crescere a pH neutro Il colorante basico colora direttamente l’organismo. COLORANTI ACIDI Il colorante acido forma un deposito p colorato attorno all’organismo, lasciandolo incolore. L’osservazione diventa indiretta ed è accurata per una visione delle dimensioni dimensioni, della forma e della disposazione dei batteri. Colorazioni LE COLORAZIONI - Gram - Ziehl-Neelsen Ziehl Neelsen - Kinyoun - Lattofenolo - Auramina/Rodamina - Auramina/fenolo - Auramina/permanganato - Tricromica Ti i - Giemsa - Lugol - Arancio di acridina - Blu di metilene - Ematossilina