ANNA LUGANINI
CURRICULUM VITAE ET STUDIORUM
ELENCO DELLE PUBBLICAZIONI
Gennaio 2014
Generalità_______________________________________________________________________
Nata a Torino, il 18 Settembre 1980.
Cittadina Italiana.
Nubile.
cell. 347-5304841
e-mail: [email protected]
Posizione attuale
_______________________________________________
Ricercatrice
Curriculum Formativo e Professionale_______________________________________________
1999
Diploma di Maturità con indirizzo sperimentale in informatica presso il
liceo scientifico statale “Albert Einstein” di Torino con la votazione di
79/100.
2004
Laurea in Scienze Biologiche indirizzo Fisiopatologico
l’Università degli Studi di Torino con votazione di 109/110.
2005
Dal Gennaio 2005 al Dicembre 2006 svolge attività di consulenza
scientifica per Ribovax Biotechnologies SA (Ginevra) nell’ambito di un
programma di ricerca finalizzato all’identificazione e caratterizzazione di
anticorpi monoclonali umani neutralizzanti l’infettività di HCMV, presso
il Dipartimento di Sanità Pubblica e Microbiologia.
2006
Vince il concorso per il conferimento di una borsa di studio (durata sei
mesi) per una ricerca dal titolo “ Studio del ruolo dei recettori toll-like
nel ciclo replicativo del citomegalovirus” finanziata nell’ambito del
progetto di Ricerca Scientifica Applicata della Regione Piemonte.
2007
Vince il concorso per il conferimento di una borsa di ricerca annuale
Lagrange Start Up (Progetto “Lagrange-Fondazione CRT”) per una
ricerca dal titolo “Studio dell’attività antivirale di nuovi peptidi
dendrimerici”.
2008
Presa di servizio come Ricercatore dell’Università degli Studi di Torino,
settore scientifico disciplinare BIO/19 (Microbiologia Generale).
2009
Diploma di specializzazione in Microbiologia e Virologia presso
l’Università degli Studi di Torino, Facoltà di Medicina e Chirurgia.
2014
Titolo di Dottore di ricerca della Scuola di Dottorato in Medicina
Molecolare Indirizzo Immunologia e Biologia Cellulare, presso
l’Università degli Studi di Torino.
2
presso
Attività Scientifica________________________________________________________________
L’attività scientifica della Dott.ssa Luganini si è sviluppata presso il laboratorio di Virologia
Molecolare, Dipartimento di Sanità Pubblica e di Microbiologia (come allieva interna nel periodo
2002-2004 e poi Specializzanda in Microbiologia e Virologia dal 2004). Successivamente, dal 2008
con il ruolo di Ricercatore.
In tale periodo l’attenzione si è focalizzata sullo studio dei meccanismi molecolari dell' interazione
virus-cellula ospite, sulla ricerca e validazione di nuove molecole antivirali (naturali e di sintesi) e
sullo sviluppo di metodologie innovative per la diagnosi e la ricerca di antivirali.
I progetti includono:
Clonaggio molecolare, espressione e caratterizzazione di nuove proteine virali, come per
esempio UL72. Lo studio ha valutato la cinetica di espressione e la caratterizzazione
funzionale in vitro di tale proteina. Successivamente la generazione di virus ricombinanti
deleti del gene UL72 (tramite la tecnica dei bacmidi e la mutagenesi in vitro) ha permesso di
determinare il ruolo di UL72 nel corso di un’infezione virale in vitro.
Disegno di un nuovo approccio metodologico per la produzione e caratterizzazione di
anticorpi monoclonali di origine umana in grado di neutralizzare l’infezione da HCMV.
Sviluppo e caratterizzazione di linee cellulari umane immortalizzate indicatrici per la
rilevazione di particelle infettive di HCMV, tramite l’espressione di un indicatore attivato
specificatamente da proteine virali immediati precoci (IE1 e IE2). Le linee cellulari generate
sono state validate anche per la ricerca e lo screening di nuove molecole antivirali. Tale
ricerca ha portato alla identificazione di peptidi dendrimerici di sintesi con attività
antierpetica in quanto in grado di legarsi agli eparan-solfati cellulari.
Con la tecnica dei bacmidi, ha approfondito il ruolo del fattore trascrizionale NF-kB nel
contesto del ciclo replicativo di HCMV in differenti tipi cellulari mantenuti in differenti
condizioni fisiologiche. Gli studi hanno dimostrato che l’enzima cellulare IKK2, un
attivatore di NF-kB in seguito a stimoli infiammatori, è attivato dall’ infezione da HCMV.
L’approccio di inibizione di IKK2, sia di tipo farmacologico che genetico, ha mostrato un
arresto della replicazione virale sia in fibroblasti che in cellule endoteliali. Tale risultato
supporta il ruolo cruciale di tale enzima cellulare per la replicazione del citomegalovirus.
Inoltre la generazione di virus mutanti per i siti NF-kB presenti nel MIEP virale ha permesso
di dimostrare che l’attivazione di NF-kB è richiesta per l’ espressione dei geni IE virali e la
progressione del ciclo re plicativo in cellule quiescenti. Anche i siti di legame per Elk-1 e
per serum factor (SRF) nel MIEP sono stati dimostrati essere fondamentali per la
progressione dell’infezione di HCMV. In particolare la generazione di virus mutanti deleti
contemporaneamente dei siti per NF-kB, Elk-1 e SRF ha permesso di dimostrare che i siti di
legame Elk-1 e SRF compensano la mancata attivazione del MIEP indotta da NF-kB in
cellule in proliferazione. Questi risultati mettono in risalto l’importanza della ridondanza dei
siti di legame sul MIEP virale per garantire un’efficace replicazione virale in cellule che si
trovano in differenti condizioni fisiologiche.
Studio delle alterazioni molecolari e fisiologiche indotte dall’infezione da HCMV in cellule
endoteliali. In questa linea di ricerca si è analizzata la capacità di HCMV di infettare le
cellule linfatiche endoteliali (LEC) e di modularne la risposta infiammatoria. Si è osservato
che il ceppo endoteliotropico di HCMV VR1814 infetta produttivamente le LEC e stimola
3
l'espressione di geni cellulari infiammatori. Il sovranatante delle LEC infettate, il cosiddetto
secretoma indotto da HCMV, si è dimostrato in grado di stimolare una risposta angiogenica
in cellule endoteliali omologhe ed eterologhe, suggerendo quindi un suo effetto sia autocrino
che paracrino. Una dettagliata analisi biochimica ha poi evidenziato nel secretoma la
presenza di 20 citochine e chemochine indotte dall’infezione con HCMV. Tra queste, IL-6 e
GM-CSF si sono dimostrate essere i principali fattori del secretoma HCMV-indotto in grado
di promuovere la risposta angiogenetica. Nel complesso, i risultati di questo studio hanno
indicato che HCMV è in grado di promuovere l'angiogenesi tramite un meccanismo
indiretto mediato dal rilascio di fattori di crescita e di differenziazione nel secretoma delle
cellule infette.
Studio del ruolo della proteina cellulare IFI16 nella replicazione degli Herpesvirus. La
proteina umana IFI16 è una nucleoproteina di 90 kDa, la cui espressione viene aumentata
dall’infezione con HCMV. Il silenziamento genico di IFI16 in fibroblasti umani si è
dimostrato in grado di aumentare in modo specifico la replicazione di Herpesvirus, quali
HCMV e HSV1/2, suggerendo quindi un ruolo antivirale di IFI16 nel corso dell’infezione
con questi virus. A conferma, la sovraespressione di IFI16 mediante vettori adenovirali
determina una forte riduzione della replicazione di HCMV. In particolare, IFI16 inibisce la
trascrizione dei geni precoci e tardivi di HCMV, bloccando l’attività dei corrispondenti
promotori genici. In questo studio, si è inoltre osservato che l’attività inibitoria di IFI16 sui
promotori virali (UL54 e UL44) è dovuta al blocco del legame del fattore trascrizionale
cellulare Sp1 ai promotori come conseguenza di una interazione diretta tra IFI16 e Sp1. Nel
loro insieme, questi risultati hanno dimostrato che la proteina cellulare IFI16 agisce come
fattore di restrizione per la replicazione di HCMV.
Identificazione della proteina US16 di HCMV come fattore del tropismo cellulare di
HCMV. Il gene US16 codifica per una proteina di 309 aa, con peso molecolare di 34 kDa, la
cui sequenza è altamente conservata in diversi ceppi di HCMV e presenta un ortologo nel
genoma dei Citomegalovirus dello chimpanzè (CCMV) e di rhesus (RhCMV). La
caratterizzazione funzionale di US16 nel contesto del ciclo replicativo di HCMV è stata
sviluppata con la tecnologia dei bacmidi. Virus ricombinanti con delezione intera o parziale
di US16 hanno dimostrato un significativo difetto di crescita durante l’infezione di cellule
endoteliali ed epiteliali, ma non in fibroblasti. Il difetto di crescita è probabilmente dovuto
ad un blocco cellula-specifico nella fase di ingresso dei virus deleti di US16. Studi sono in
corso per definire più precisamente i meccanismi molecolari del difetto di crescita e quindi
caratterizzare il ruolo di US16 nell’ingresso di HCMV in cellule differenti dai fibroblasti.
Elenco delle pubblicazioni su riviste internazionali _________________________
_
1.
Caposio P., Musso T., Luganini A., Inoue H., Gariglio M., Landolfo S., and Gribaudo G.
Targeting the NF-B pathway through pharmacological inhibition of IKK2 prevents human
cytomegalovirus replication and virus-induced inflammatory response in infected endothelial
cells.
Antiviral Res., 73: 175-184, 2007.
2.
Caposio P., Luganini A., Hahn, G., Landolfo S., and Gribaudo G.
Activation of the virus-induced NF-B/IKK signaling axis is critical for the replication of
human cytomegalovirus in quiescent cells.
4
Cell. Microbiol., 9: 2040-2054, 2007.
3.
Luganini A., Caposio P., Landolfo S., and Gribaudo G.
Phosphorothioate-modified oligodeoxynucleotides inhibit human cytomegalovirus replication
by blocking virus entry
Antimicrob. Agents Chemother, 52: 1111-1120, 2008.
4.
Luganini A., Caposio P., Mondini M., Landolfo S., and Gribaudo G.
New cell-based indicator assays for the detection of human cytomegalovirus infection and
screening of inhibitors of viral immediate-early 2 (IE2) protein activity.
J. Applied Microbiol., 1791-1801, 2008.
5.
Funaro A., Gribaudo G., Luganini A., Ortolani, E., Lo Buono N., Murphy M., Vicenzi
E., Cassetta, L., Landolfo S.,Garotta G., and Malavasi F.
Generation of potent neutralizing human monoclonal antibodies against cytomegalovirus
infection from immune B cells.
BMC Biotechnol. 8: 85, 2008.
6.
Luganini A, Giuliani A, Pirri G, Pizzuto L, Landolfo S, Gribaudo G.
Peptide-derivatized dendrimers inhibit human cytomegalovirus infection by blocking virus
binding to cell surface heparan sulfate.
Antiviral Res. 2010 Mar;85(3):532-40. Epub 2010 Jan 18
7.
Caposio P, Luganini A, Bronzini M, Landolfo S, Gribaudo G.
The Elk-1 and Serum Response Factor Binding Sites in the Major Immediate-Early Promoter
of Human Cytomegalovirus Are Required for Efficient Viral Replication in Quiescent Cells
and Compensate for Inactivation of the NF-kB Sites in Proliferating Cells
JOURNAL OF VIROLOGY, May 2010, p. 4481–4493
8. Fiorentini S., Luganini A., Dell’Oste V., Lorusso B., Cervi E., Caccuri F., Bonardelli S.,
Landolfo S., Caruso A. and Gribaudo G.
“Human Cytomegalovirus Productively Infects Lymphatic Endothelial 1 Cells and Induces a
Secretome that Promotes Angiogenesis and Lymphangiogenesis through IL-6 and GM-CSF”. J
Gen Virol., 92, 650-660, 2011.
9. Luganini A., Nicoletto S.F., Pizzuto L., Pirri G., Giuliani A., Landolfo S., and Gribaudo G.
“Inhibition of herpes simplex virus type 1 and type 2 infections by peptide-derivatized
dendrimers”. Antimicrob Agents Chemother. 55, 3231-3239, 2011.
10. Gariano G.R., Dell’Oste V., Bronzini M., Gatti D., Luganini A., De Andrea M., Gribaudo G.,
Gariglio M. and Landolfo S.
“The Intracellular DNA Sensor IFI16 Gene Acts as Restriction Factor for Human
Cytomegalovirus Replication”. PLoS Pathog., 8 (1), e1002498, 2012.
11. Bronzini M.*, Luganini A.*, Dell'Oste V., De Andrea M., Landolfo S. and Gribaudo G.
"The US16 gene of Human Cytomegalovirus is required for efficient viral infection of
endothelial and epithelial Cells". J Virol., Jun;86(12):6875-88., 2012.
12. Mercorelli B., Luganini A., Muratore G., Massari S., Terlizzi M.E., Tabarrini O., Gribaudo G.;
Palù G. and Loregian A.
5
“The 6-Aminoquinolone WC5 Inhibits Different Functions of the Immediate-Early 2 (IE2)
Protein of Human Cytomegalovirus that are Essential for Viral Replication”
Antimicrob. Agents Chemother [Epub ahead of print].
Elenco delle comunicazioni ed abstract a congressi
1. Caposio P., Luganini A., Hahn G., Landolfo S., Gribaudo G.
“The Human Cytomegalovirus 46 kDa UL72 protein is not an active dUTPase but a late protein
dispensable for replication in fibroblasts”.
6° Convegno FISV
Riva del Garda, 403, 2004.
2. Caposio P., Luganini A., Liofante L., Landolfo S., Gribaudo G.
“Human Cytomegalovirus stimulates cyclooxygenase-2 gene expression in endothelial cells”.
7° Convegno FISV
Riva del Garda, D5.1, 2005.
3. Caposio P., Luganini A., Landolfo S., Gribaudo G.
“Activation of the NF-B signaling axis is required for human cytomegalovirus productive
replication”.
25° Congresso Nazionale SIMGBM
Orvieto, 33, 2006.
4. Caposio P., Luganini A., Hahn G., Landolfo S., Gribaudo G.
“Activation of the virus-induced IKK/NF-B signaling axis is critical for the replication of HCMV
in quiescent cells”.
11th International CMV and Betaherpes Virus Workshop
Toulouse, S2-P9, 2007.
5. Caposio P., Luganini A., Hahn G., Landolfo S., Gribaudo G.
“Mutational analysis of human cytomegalovirus MIEP reveals a critical role of the NF-kB binding
sites for the virus replication in quiescent cells”.
13th International Conference on Immunology and Prophylaxis of Human Herpesvirus
Infections
Orvieto, 2007.
6. Luganini A., Caposio P., Landolfo S., and Gribaudo G.
“Phosphorothioate-modified oligodeoxynucleotides inhibit human cytomegalovirus replication by
blocking virus entry”.
8th National Congress of the Italian Society of Virology
Orvieto, 2008.
7. Caposio P., Jarvis M., Ashlee M., Streblow D., Luganini A., Bronzini M., Landolfo S., Gribaudo
G., Nelson J. “A Human Cytomegalovirus late-kinetic class of gene(s) induces the production of
factors in the cellular secretome that promotes endothelial cell angiogenesis and prevents cellular
apoptosis”
9th National Congress of the Italian Society of Virology
Orvieto, 22, 2009.
6
8. Luganini A., Caposio P., Mondini M., Landolfo S., Gribaudo G. “New cell-based indicator
assays for the detection of human cytomegalovirus infection and screening of inhibitors of viral
immediate early 2 (IE2) protein activity.”
9th National Congress of the Italian Society of Virology
Orvieto, 64, 2009.
9. Caposio P., Luganini A., Bronzini M., Landolfo S. and Gribaudo G. “The Elk-1 and serum
response factor sites in the major immediate-early promoter of human cytomegalovirus are required
for efficient viral replication in quiescent cells”.
37° Congresso nazionale della Società Italiana di Microbiologia (SIM)
Torino, 228, 2009.
10. Caposio P., Luganini A., Bronzini M., Landolfo S. and Gribaudo G. “The ELK-1 and serum
response factor binding sites in the major immediate early promoter of the human citomegalovirus
are required for efficient viral replication in quiescent cells”.
4th European congress of virology
Cernobbio 84, 2010.
11. De Andrea M., Luganini A., Gugliesi F., Gribaudo G., Gariglio M. and Landolfo S. “The
interferon-inducible IFI16 gene acts as a restriction factor for human citomegalovirus replication”.
8th Joint Conference of the International Cytokine Society and the International Society for
Interferon and Cytokine research
Chicago, USA, 79, 2010.
12. Fiorentini S., Caposio P., Luganini A., Garrafa E., Caruso A. and Gribaudo G. “Human
cytomegalovirus productively infects lymphatic endothelial cells and triggers a secretome that
promotes angiogenesis and lymphangiogenesis”.
35th Annual International Herpesvirus Workshop
Salt Lake City, USA, p.2.36-2,36, 2010.
13. Dell’Oste V., De Andrea M., Luganini A., Gariano G.R., Gatti D., Bronzini M., Gribaudo G.,
Gariglio M. and Landolfo S. “The interferon-inducible IFI-16 gene is a restriction factor for Human
Cytomegalovirus replication”.
13th International CMV/BetaHerpesvirus Workshop
Norimberga (Germania), 97, 2011.
14. Luganini A., Terlizzi M.E., Cavaletto N., Olivero C. and Gribaudo G.
“Functional Analysis of the US12 Gene Family of Human Cytomegalovirus (HCMV) Reveals the
Presence of Multiple Endothelial Cell Tropism Determinants”
38th Annual International Herpesvirus Workshop
Grand Rapids, Michigan, USA. 1.24-p54, 2013.
15. Luganini A., Cavaletto N., Raimondo S., Geuna S. and Gribaudo G.
“The US16 Protein of Human Cytomegalovirus Regulates the Tropism for Endothelial and
Epithelial Cells by Promoting Efficient Incorporation of pUL Proteins in Virions”
European society of Virology: "Early Events in Virus Infection"
Monte Verita Conference Ascona, Switzerland, 2014.
16. S. Scutera S., Luganini A., Rossi S., Del Prete A., Landolfo S., Gribaudo G., Sozzani S snd
Musso T.
“Anti-cytomegalovirus response in AP-3-deficient mice”
7
42°Congresso nazionale della Società Italiana di Microbiologia (SIM)
Torino, 2014.
Attività Didattica________________________________________________________________
A.A 2005-2006
Attività di complemento alla didattica nella
disciplina di Microbiologia e Microbiologia
Clinica, Corso di laurea triennale in Infermieristica,
Facoltà di Medicina e Chirurgia, Università degli
Studi di Torino.
A.A. 2005-2006
Insegnamento del corso di Microbiologia Generale e
Medica-Oculare
nell’ambito
del
corso
di
Specializzazione
in
Optometria
organizzato
dall’Istituto Benigno Zaccagnini (Bologna).
A.A. 2006-2007
Attività di complemento alla didattica nella
disciplina di Microbiologia e Microbiologia
Clinica, Corso di laurea triennale in Infermieristica,
Facoltà di Medicina e Chirurgia, Università degli
Studi di Torino.
A.A. 2007-2008
Insegnamento del corso di Microbiologia generale e
Microbiologia Medica, presso il corso di Laurea in
Tecniche della Prevenzione nell’Ambiente e nei
Luoghi di Lavoro, Università degli Studi di Torino.
A.A. 2007-2008
Professore a contratto per l’insegnamento di
Microbiologia Oculare, Corso di Laurea in Ottica e
Optometria, Facoltà di Scienze M.F.N., Università
degli Studi di Torino.
A.A. 2007-2008
Attività di complemento alla didattica nelle
disciplina di Microbiologia e Microbiologia
Clinica, Corso di laurea triennale in Infermieristica,
Facoltà di Medicina e Chirurgia, Università degli
Studi di Torino.
A.A. 2008-2009
Affidamento del modulo di Microbiologia Oculare
(2 CFU) del corso integrato di “Microbiologia
Generale e Oculare”, II anno del Corso di Laurea in
Ottica e Optometria, in responsabilità collegiale con
il Prof. Gribaudo.
A.A. 2009-2010
Affidamento del modulo di Microbiologia Oculare
(2 CFU) del corso integrato di “Microbiologia
Generale e Oculare”, II anno del Corso di Laurea in
Ottica e Optometria, in responsabilità collegiale con
il Prof. Gribaudo.
8
Esercitatore di laboratorio del modulo di
Microbiologia Generale (6 CFU) per i corsi di
“Microbiologia
Generale”,
“Biologia
dei
Microrganismi” e “Microbiologia”, II anno, del
Corso di Laurea in Scienze Biologiche.
A.A. 2010-2011
A.A. 2010-2011
Attività di didattica nel modulo "Analisi
microbiologiche e biotecnologiche applicate agli
alimenti” del corso integrato “Caratterizzazione
chimico-fisica, microbiologica e sensoriale degli
alimenti” per il Master Ferrero in "SCIENZA E
TECNOLOGIA DELL'ALIMENTAZIONE E
NUTRIZIONE UMANA".
ad oggi
A.A. 2011-2012 ad oggi
Esercitatore di laboratorio del modulo di
Microbiologia Generale (6 CFU) per i corsi di
“Microbiologia Generale”, “Biologia dei
Microrganismi” e “Microbiologia”, II anno, del
Corso di Laurea in Scienze Biologiche.
Affidamento del modulo di Microbiologia
(3 CFU) del corso integrato di “Microbiologia e
Igiene”, III anno del Corso di Laurea in Ottica e
Optometria, in responsabilità collegiale con il Prof.
Gilli.
9
