Attività del 25 nov

Scuole aperte 2008 – 2009
Biotecnologia e Genetica
Attività del 31 mar. 09
Domande di apertura:
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Come è possibile vedere il DNA umano?
Come pensi di vederlo?
Isolare e rendere visibile il materiale genetico presente nelle cellule umane.
STRUMENTI E MATERIALI:
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Porta provette
Microprovette
Provetta di vetro
Spazzolini citologici
Contagocce
Acqua distillata
Alcool etilico (CH3CH2OH)
Detersivo TRIS
Enzima Proteasi
Beker
Piastra elettrica
Termometro
Pennarello indelebile
Cloruro di sodio (NaCl)
PROCEDIMENTO:
 Preparare in una microprovetta il sapone Tris
 Scrivere sulla provetta le iniziali del nostro nome con un
pennarello indelebile
 Con uno spazzolino raschiare la mucosa interna della
bocca per un minuto
 Disporre lo spazzolino con le cellule della mucosa nella
provetta contenente il sapone
 Ruotare lentamente tenendo lo spazzolino in posizione
verticale affinché tutte le cellule siano depositate nel
liquido
 Strofinare le setole sul bordo superiore della
provettapossibile
 Ripetere l’operazione con uno spazzolino nuovo
sull’altra guancia interna
 Trasferire nuovamente le cellule nella provetta
contenente il Tris
 Tappare l’imboccatura della provetta e mescolare due o
tre volte
 Aggiungere 4 gocce di enzima proteasi
 Tappare e mescolare
 Nel frattempo scaldare un beker con acqua sulla piastra
elettrica fino a raggiungere una temperatura di 37° C
 Mettere a bagno maria le provette con la mucosa
 Attendere 10 minuti
 Preparare una soluzione satura di NaCl in un beker
 Con un contagocce aggiungere alla provetta con l’estratto di cellule 2/3 gocce di NaCl
 Chiudere e capovolgere 4/5 volte per mescolare
 Versare delicatamente il contenuto in una provetta di vetro a fondo tondo
 Riempire un contagocce pulito con alcool freddo
 Inclinare la provetta a 45° e far fluire delicatamente sulla parete interna l’alcool (la
quantità di alcool deve raddoppiare il volume del campione)
A.P.
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Scuole aperte 2008 – 2009
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Biotecnologia e Genetica
Lasciare la provetta in verticale per circa 5 minuti
Osservare
OSSERVAZIONI:
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Nella provetta si forma una soluzione composta da due fasi, quella acquosa e quella alcolica
Quella alcolica galleggia
Si vedono dei filamenti biancastri, dei piccolo fiocchetti bianchi che risalgono verso l’alcool
CONCLUSIONI:
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Il DNA è contenuto nel nucleo delle cellule. La sua lunghezza è di circa 2 m. È arrotolato su
se stesso e compattato con delle proteine. Per ottenerlo
dobbiamo rompere la membrana del nucleo che è fatta
proteine e fosfolipidi e srotolarlo, per questo usiamo il
sapone (Tris) e la proteasi (enzima). L’enzima proteasi
lavora a 37° C e serve per srotolare la molecola di DNA
Il sale da cucina serve per bloccare tutte le attività
enzimatiche del citoplasma, in modo particolare l’enzima
DNAsi che digerisce il DNA se dovesse uscire dal nucleo!
Infatti se un DNA estraneo entrasse nella cellula, questo
verrebbe digerito subito dall’enzima. Inoltre il sale serve
per rendere visibile il DNA che, essendo solubile,
non si vedrebbe.
Il DNA si dispone attorno allo ione Na+
Il sale in soluzione si scinde in Na+ e Cl-; il DNA è uno ione – perciò viene attratto dallo ione
NA+
Il DNA esce dal nucleo e si sposta verso l’alcool, che essendo uno ione lo attira verso di sé
Poiché l’alcool galleggia il DNA sale verso l’alto
Osservo la provetta in controluce e vedo dei fiocchetti biancastri e gelatinosi che ricordano
una medusa. Questi filamenti sono il DNA.
Na+
A.P.
Fiocco di DNA che si dispone attorno al sale
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